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基于cDNA-AFLP筛选茶树被茶尺蠖取食诱导的相关差异基因及SAMT的克隆与表达分析

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
1 文献综述第11-19页
   ·植物与害虫相互作用研究进展第11-14页
   ·cDNA-AFLP 技术在植物研究中的应用第14-15页
   ·SAMT 的基本特征第15-18页
   ·SAMT 在非生物及生物逆境诱导防御中的作用第18-19页
2 引言第19-21页
   ·研究意义与目的第19页
   ·研究内容第19-20页
   ·技术路线第20-21页
3 材料与方法第21-37页
   ·试验材料及处理第21页
     ·试验材料第21页
     ·试验处理第21页
   ·仪器与试剂第21-23页
     ·主要仪器设备第21-22页
     ·主要试剂第22页
     ·实验中常用试剂配方第22-23页
   ·实验方法第23-37页
     ·总 RNA 的提取和检测第23-25页
     ·cDNA 第一链的合成第25-26页
     ·cDNA 第二链的合成及末端平滑化第26页
     ·cDNA 的精制第26页
     ·cDNA-AFLP 分析第26-28页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染第28-29页
     ·差异条带的回收、克隆、测序第29-31页
     ·差异片段的 qRT-PCR 分析第31-32页
     ·CsSAMT 的全长克隆第32-34页
     ·CsSAMT 的生物信息学分析第34页
     ·CsSAMT 的原核表达第34-36页
     ·CsSAMT 表达特征的 qRT-PCR 分析第36-37页
4 结果分析第37-59页
   ·茶树叶片总 RNA 的提取与检测第37页
     ·总 RNA 的提取第37页
     ·提取 RNA 的纯度检测第37页
   ·预扩及选扩效果检测第37-38页
     ·预扩效果检测第37-38页
     ·选扩效果检测第38页
   ·变性凝胶电泳结果分析第38-39页
   ·差异片段回收、验证结果分析第39-44页
     ·差异片段克隆及测序第39-40页
     ·差异片段序列分析第40-44页
   ·部分差异条带 qRT-PCR 分析第44-47页
     ·qRT-PCR 标准曲线的确定第44-46页
     ·四个差异条带的表达特征分析第46-47页
   ·CsSAMT 的全长 cDNA 克隆及序列分析第47-54页
     ·CsSAMT 的 3’/5’-RACE 克隆第47-48页
     ·CsSAMT 的全长序列验证第48-49页
     ·CsSAMT 的序列分析第49-54页
   ·CsSAMT 的原核表达第54-57页
     ·CsSAMT 的 ORF 扩增第54页
     ·重组体表达载体的双酶切验证第54-55页
     ·CsSAMT 的原核表达优化第55-57页
   ·CsSAMT 的表达特征分析第57-59页
     ·实时荧光定量 PCR 标准曲线的确定第57页
     ·茶尺蠖取食诱导 CsSAMT 的表达特征分析第57-58页
     ·MeJA 处理对 CsSAMT 的表达特征影响分析第58-59页
5 讨论第59-65页
   ·cDNA-AFLP 技术第59-60页
   ·差异片段序列功能分析及预测第60-62页
   ·CsSAMT 的全长克隆和序列分析第62-63页
   ·CsSAMT 的原核表达和优化第63页
   ·CsSAMT 的表达特征分析第63-65页
6 结论第65-66页
参考文献第66-71页
附录A 中英文缩写与注释第71-72页
致谢第72-73页
个人简介第73页
成果清单第73页

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