| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1. 植物黄酮合成的研究进展 | 第12-16页 |
| ·植物黄酮合成途径 | 第12-13页 |
| ·植物黄酮的代谢生理 | 第13-15页 |
| ·非生物因素的影响 | 第14页 |
| ·生物因素的影响 | 第14-15页 |
| ·植物黄酮的代谢调控 | 第15页 |
| ·植物苯丙氨酸解氨酶 | 第15-16页 |
| 2 启动子的研究进展 | 第16-23页 |
| ·植物启动子的基本结构 | 第16-17页 |
| ·核心启动子 | 第16页 |
| ·上游启动子元件 | 第16-17页 |
| ·启动子克隆方法进展 | 第17-20页 |
| ·利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第17页 |
| ·基于PCR技术的方法 | 第17-20页 |
| ·启动子功能研究进展 | 第20-23页 |
| ·生物信息学方法 | 第20-21页 |
| ·实验方法功能分析 | 第21-23页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 苦荞苯丙氨酸解氨酶基因启动子(P_(FtPal))的克隆和序列分析 | 第24-33页 |
| 1 材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌种以及质粒 | 第24页 |
| ·主要试剂和酶 | 第24页 |
| ·培养基以及各种溶液 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-27页 |
| ·苦荞DNA的提取 | 第25页 |
| ·Pal基因启动子的克隆 | 第25-26页 |
| ·DNA的连接与转化 | 第26-27页 |
| ·重组子的筛选和验证 | 第27页 |
| ·序列分析 | 第27页 |
| 3 结果和分析 | 第27-31页 |
| ·苦荞总DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·苦荞Pal基因启动子的克隆 | 第28页 |
| ·启动子序列生物信息学分析结果 | 第28-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 P_(FtPal)启动子在烟草中功能的初步分析 | 第33-46页 |
| 1 材料 | 第33-35页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·质粒以及菌种 | 第33页 |
| ·主要试剂和酶 | 第33页 |
| ·溶液以及培养基 | 第33-35页 |
| ·MS培养基母液的配置 | 第33页 |
| ·LB培养基 | 第33页 |
| ·YEB培养基 | 第33-34页 |
| ·GUS染色液 | 第34页 |
| ·GUS蛋白提取液 | 第34页 |
| ·考马斯亮蓝G250溶液 | 第34页 |
| ·BSA标准溶液 | 第34页 |
| ·4-MU和4-MUG溶液 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| 2 实验方法 | 第35-40页 |
| ·P_(FtPal)序列表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·P_(FtPal)全长以及各5'端缺失片段的克隆 | 第35-36页 |
| ·P_(FtPal)全长以及各5'端缺失片段表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·PBI121原始质粒和重组质粒转化根癌农杆菌LBA4404 | 第37页 |
| ·农杆菌LBA4404感受态细胞的制备及转化 | 第37页 |
| ·PBI121原始质粒和重组质粒转化根癌农杆菌LBA4404 | 第37页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第37-38页 |
| ·转基因烟草叶片的检测 | 第38页 |
| ·重组植物表达载体转化烟草愈伤组织 | 第38页 |
| ·转化后的烟草愈伤组织在不同条件下的细胞悬浮培养 | 第38-39页 |
| ·GUS蛋白活性测定 | 第39-40页 |
| ·GUS蛋白的提取 | 第39页 |
| ·GUS蛋白浓度测定 | 第39-40页 |
| ·GUS蛋白活性的测定 | 第40页 |
| 3 结果 | 第40-44页 |
| ·P_(FtPal)全长以及各5'端缺失片段的克隆 | 第40-41页 |
| ·转基因烟草的瞬时表达检测 | 第41-42页 |
| ·BSA标准曲线的绘制以及GUS蛋白的浓度测定 | 第42页 |
| ·4-MU标准曲线的绘制和转基因烟草中GUS蛋白活性的测定 | 第42页 |
| ·不同培养条件下的转基因烟草细胞中GUS蛋白酶的活力 | 第42-44页 |
| ·无诱导条件下的GUS蛋白酶的相对活力 | 第42-43页 |
| ·茉莉酸诱导条件下的GUS蛋白酶的相对活力 | 第43-44页 |
| ·低温肋、迫条件下的GUS蛋白酶的相对活力 | 第44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第52页 |
