| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-31页 |
| ·禽白血病简介 | 第12-13页 |
| ·ALV-J病原学 | 第13-15页 |
| ·ALV的宿主范围 | 第15-16页 |
| ·发病机理 | 第16-18页 |
| ·内源性白血病病毒 | 第18-20页 |
| ·流行病学 | 第20-21页 |
| ·病理变化及临床症状 | 第21-23页 |
| ·诊断技术 | 第23-25页 |
| ·病毒的分离与鉴定 | 第23页 |
| ·病毒中和试验(neutralization,NT) | 第23页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第23页 |
| ·ALV的ELISA检测 | 第23-24页 |
| ·间接免疫荧光检测方法(IFA) | 第24页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第24-25页 |
| ·预防和控制措施 | 第25-27页 |
| ·政府主管部门要强化种鸡群的监控类 | 第26页 |
| ·保持种鸡群对ALV的高度洁净状态 | 第26页 |
| ·强化弱毒疫苗中ALV污染的检测和监控 | 第26-27页 |
| ·原种鸡群的净化 | 第27页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第27-31页 |
| ·实时荧光定量PCR的分类 | 第27-29页 |
| ·实时荧光定量PCR的定量方法 | 第29页 |
| ·实时荧光定量PCR的应用 | 第29-31页 |
| ·荧光定量PCR进行ALV-J检测的国内外研究进展 | 第31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-43页 |
| ·实验材料 | 第31-32页 |
| ·毒株 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-32页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-43页 |
| ·从正常商品蛋鸡中扩增出内源性禽白血病 | 第33页 |
| ·病毒的扩增 | 第33页 |
| ·病毒的测定 | 第33-34页 |
| ·试验动物攻毒 | 第34页 |
| ·实验组与对照组总体重及各器官重量比较 | 第34页 |
| ·血液学指标检测 | 第34页 |
| ·淋巴细胞转化率的测定 | 第34-35页 |
| ·病毒的提取 | 第35页 |
| ·ELISA试剂盒的检测 | 第35-36页 |
| ·ALV-J的引物设计及目的片段扩增 | 第36页 |
| ·重组质粒PMD-18-J和PMD-18-β的构建 | 第36-40页 |
| ·SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR的建立 | 第40-41页 |
| ·实时劳光定量PCR检测人工感染鸡的器官 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-60页 |
| ·内源性ALVev-1测序结果 | 第43-45页 |
| ·实验组与对照总体重比较结果 | 第45页 |
| ·实验组与对照组各器官与相对应鸡只总体重的比值的比较结果 | 第45-47页 |
| ·血液学指标检测结果 | 第47-48页 |
| ·淋巴细胞转化率的测定 | 第48-49页 |
| ·ELISA试剂盒的鉴定结果 | 第49页 |
| ·组织病理学观察 | 第49-50页 |
| ·荧光定量PCR引物特异性分析 | 第50页 |
| ·荧光定量引物ALV-J和p-actin的PCR扩增结果 | 第50-51页 |
| ·人工感染SPF鸡组织中ALV-J的PCR扩增 | 第51-52页 |
| ·荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第52-55页 |
| ·PMD-18-J标准曲线的建立 | 第52-53页 |
| ·PMD-18-β标准曲线的建立 | 第53-54页 |
| ·敏感性试验 | 第54页 |
| ·特异性试验 | 第54-55页 |
| ·重复性试验 | 第55页 |
| ·Real-time PCR检测攻毒组样本 | 第55-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第74页 |
