| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-15页 |
| 缩略语 | 第15-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-21页 |
| 1 microRNA 的发现与起源 | 第16-17页 |
| 2 miRNA 与肿瘤的发生 | 第17页 |
| 3 miRNA-449a 研究现状 | 第17-18页 |
| 4 microRNA 的研究方法 | 第18-21页 |
| ·miRNA 表达谱研究 | 第18页 |
| ·miRNA 的检测 | 第18-19页 |
| ·microRNA 的抑制和过表达 | 第19-20页 |
| ·microRNA 的检测系统 | 第20-21页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第21-23页 |
| 1 实验来源和意义 | 第21页 |
| 2 实验内容 | 第21-23页 |
| 第三章 实验材料 | 第23-29页 |
| 1 主要质粒、试剂盒和抗体 | 第23-24页 |
| 2 主要仪器 | 第24-25页 |
| 3 主要溶液的配制 | 第25-26页 |
| 4 引物与Linker | 第26-28页 |
| 5 细胞株系及培养条件 | 第28-29页 |
| 第四章 实验方法 | 第29-50页 |
| 1 miR-449a 在肝癌细胞中本底表达水平的检测 | 第29-32页 |
| ·细胞培养 | 第29-30页 |
| ·miR-449a 表达水平的检测 | 第30-32页 |
| 2 检测质粒pEGFP-C1-miR-449aT 的构建 | 第32-34页 |
| 3 miR-449a 表达质粒的构建 | 第34-37页 |
| 4 pshuttle-cmv-miR-449a 的构建 | 第37-38页 |
| 5 miR-449a 检测质粒pEGFP-C1-miR-449aT 与表达质pshuttle-cmv-miR-449a有效性的检验 | 第38-40页 |
| 6 mir-449a 腺病毒表达系统Ad-miR-449a 的构建 | 第40-44页 |
| 7 腺病毒Ad-miR-449a 有效性的检验 | 第44-45页 |
| 8 miR-449a 对周期蛋白Cyclin D1 和癌细胞转移相关蛋白c-Met 的影响 | 第45-50页 |
| ·miR-449a 靶点分析 | 第45页 |
| ·miR-449a 抑制周期蛋白Cyclin D1 和癌细胞转移相关蛋白c-Met 的表达 | 第45-47页 |
| ·miR-449a 抑制CCND1 和c-Met 蛋白的表达量 | 第47-48页 |
| ·Transwell 细胞迁移实验 | 第48-49页 |
| ·统计学分析 | 第49-50页 |
| 第五章 实验结果 | 第50-62页 |
| 1 肝癌细胞中miR-449a 的本底表达水平 | 第50页 |
| 2 检测质粒pEGFP-C1-miR-449aT 的构建 | 第50-51页 |
| 3 miR-449a 表达质粒的构建 | 第51-54页 |
| 4 miR-449a 检测质粒pEGFP-C1-miR-449aT 与表达质pshuttle-cmv-miR-449a有效性的检验 | 第54页 |
| 5 miR-449a 腺病毒表达系统Ad-miR-449a 的构建 | 第54-57页 |
| 6 Ad-miR-449a 病毒有效性的检验 | 第57-58页 |
| 7 Ad-miR-449a 对转移相关蛋白c-Met 和细胞周期蛋白Cyclin D1 表达的影响 | 第58-62页 |
| ·miR-449a 靶点分析 | 第58-59页 |
| ·miR-449a 抑制CCND1 和c-Met mRNA 的表达量 | 第59-60页 |
| ·miR-449a 抑制CCND1 和c-Met 蛋白的表达量 | 第60页 |
| ·Transwell 检测miR-449a 对HepG2 细胞迁移的影响 | 第60-62页 |
| 第六章 结论 | 第62-63页 |
| 第七章 讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 在学期间发表论文 | 第69页 |
