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双基因活化的骨软骨组织工程复合体的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩写词表第9-10页
第一章 综述第10-31页
   ·组织工程第10-16页
     ·组织工程的定义第10页
     ·组织工程的要素第10-16页
   ·骨软骨第16-21页
     ·骨软骨结构第16-17页
     ·软骨下骨的生理功能第17-18页
     ·骨软骨的损伤第18页
     ·骨软骨缺损的自发修复第18-19页
     ·深层骨软骨缺损的医学处理第19-21页
   ·骨软骨组织工程研究进展第21-24页
     ·支架策略1:成骨支架和无软骨支架第21页
     ·支架策略2:不同支架分别形成骨和软骨第21-23页
     ·支架策略3:异质整体双层支架第23页
     ·支架策略4:均质整体双层支架第23-24页
   ·基因传输技术第24-26页
 小结第26-27页
 参考文献第27-31页
第二章 MSC在TGF-β1活化的壳聚糖/明胶支架和BMP-2活化的壳聚糖/明胶/羟基磷灰石支架上的生长第31-40页
   ·实验材料和仪器第31-32页
   ·实验方法第32-35页
     ·质粒DNA的扩增与纯化第32-33页
     ·原代兔骨髓间充质干细胞的分离与培养第33页
     ·单层支架的制作和质粒活化第33-34页
     ·细胞种植和实验体外分组第34页
     ·支架的扫描电镜观察(SEM)第34页
     ·MSC在基因活化材料上的生长增殖第34-35页
   ·结果第35-37页
     ·MSC的提取与培养第35页
     ·支架形态第35-36页
     ·MSC在支架上的依附第36页
     ·MSC在基因活化支架上的生长第36-37页
   ·实验讨论第37-39页
 参考文献第39-40页
第三章 MSc在TGF-β1活化的壳聚糖/明胶支架和BMP-2活化的壳聚糖/明胶/羟基磷灰石支架上的分化第40-50页
   ·实验材料第41页
   ·实验方法第41-44页
     ·双层培养复合物的建立第41-42页
     ·双层体系中中TGF-β1和BMP-2蛋白因子的表达第42页
     ·real-time PCR检测GAM上MSC骨软骨分化相关基因的表达第42-43页
     ·基因活化材料的包埋和切片第43页
     ·双层培养复合物的HE组织学检测第43-44页
     ·双层培养复合物的免疫组化检测第44页
   ·结果第44-47页
     ·双层体系中TGF-β1和BMP-2蛋白因子的表达第44-45页
     ·双层体系中中骨软骨相关基因的mRNA水平的表达第45-46页
     ·双层培养复合物的免疫组化检测第46-47页
   ·讨论第47-49页
 参考文献第49-50页
第四章 双基因活化的双层支架修复兔关节骨软骨缺损的体内试验第50-64页
   ·实验材料第50-51页
   ·实验方法第51-53页
     ·基因活化的双层复合物的构建及体内试验的分组第51页
     ·兔膝关节骨软骨缺损模型构建及修复实验第51-52页
     ·兔膝关节标本取材第52页
     ·组织标本的包埋和切片第52页
     ·修复缺损部位的组织学检测第52-53页
     ·免疫组织化学检测第53页
   ·结果第53-60页
     ·空白对照的修复效果第53-55页
     ·未活化的双层支架修复效果第55-57页
     ·BMP-2活化的单层支架修复效果第57页
     ·TGF活化的单层支架修复效果第57-58页
     ·双基因活化的双层支架修复效果第58-60页
   ·讨论第60-62页
 参考文献第62-64页
附录 攻读硕士学位期间发表的学术论文第64-65页
致谢第65-66页

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