| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-29页 |
| ·苏云金芽胞杆菌概述 | 第11-12页 |
| ·芽胞期调控因子 | 第12-14页 |
| ·早期母细胞中的sigma因子σ~E | 第12-13页 |
| ·转录调节因子SpoⅢD | 第13页 |
| ·芽胞形成的晚期的σ~K因子 | 第13页 |
| ·转录调节因子GerE | 第13-14页 |
| ·Bt杀虫蛋白 | 第14-16页 |
| ·Bt杀虫蛋白基因 | 第14页 |
| ·Bt杀虫蛋白基因的分类 | 第14-16页 |
| ·Bt杀虫蛋白的表达调控 | 第16-24页 |
| ·转录水平调控 | 第16-20页 |
| ·mRNA的稳定性 | 第20-21页 |
| ·cry基因的拷贝数 | 第21-22页 |
| ·辅助蛋白 | 第22-24页 |
| ·small RNA | 第24-27页 |
| ·small RNA简介 | 第24-25页 |
| ·sRNA的作用机理 | 第25页 |
| ·芽胞杆菌中sRNA的研究概况 | 第25-27页 |
| ·本研究的立题依据和目的意义 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-42页 |
| ·实验材料 | 第29-33页 |
| ·菌株与质粒 | 第29页 |
| ·培养基和抗生素 | 第29-30页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第30页 |
| ·引物序列 | 第30-32页 |
| ·常用溶液和缓冲液 | 第32-33页 |
| ·仪器设备 | 第33-34页 |
| ·研究方法 | 第34-42页 |
| ·PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·转录活性分析载体的构建 | 第35-36页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性分析 | 第36页 |
| ·HD~--△SpoⅢD突变体的筛选 | 第36页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·不同启动子指导的Cry1Ac蛋白产量分析 | 第37-39页 |
| ·室内生物活性测定 | 第39页 |
| ·生物信息学分析软件 | 第39页 |
| ·RNA的提取和纯化 | 第39-40页 |
| ·反转录PCR | 第40-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-56页 |
| ·cry基因启动子转录活性比较 | 第42页 |
| ·spoⅢD基因缺失对cry基因启动子转录活性影响 | 第42-44页 |
| ·不同cry基因启动子指导的Cry1Ac蛋白产量分析 | 第44-46页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第44-45页 |
| ·总蛋白量定量 | 第45页 |
| ·蛋白产量的分析 | 第45-46页 |
| ·室内生物活性分析 | 第46-47页 |
| ·无晶体spoⅢD突变体的筛选 | 第47-48页 |
| ·cry启动子指导cry1Ac基因在无晶体spoⅢD突变体中的产量分析 | 第48-49页 |
| ·总蛋白量定量 | 第48-49页 |
| ·蛋白产量的分析 | 第49页 |
| ·苏云金芽胞杆菌芽胞相关基因sRNA的生物信息学分析 | 第49-52页 |
| ·Bt总RNA的提取 | 第52-53页 |
| ·RT-PCR鉴定候选sRNA转录活性 | 第53-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67页 |
