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鸡白介素18成熟蛋白的发酵工艺及其对新城疫疫苗免疫增强作用研究

符号说明第1-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-14页
1 前言第14-37页
   ·细胞因子的研究进展第14-16页
   ·白细胞介素 18 的研究进展第16-20页
     ·IL-18 的发现第16页
     ·IL-18 的分子结构第16-17页
     ·IL-18 的分布及产生第17-18页
     ·IL-18 的受体及信号转导机制第18-20页
   ·鸡 IL-18 的研究进展第20-28页
     ·鸡 IL-18 的发现第20页
     ·鸡 IL-18 的研究第20页
     ·鸡 IL-18 的生物学功能第20-23页
     ·鸡 IL-18 在疾病发展过程中的作用第23-27页
     ·鸡 IL-18 作为新型免疫佐剂的研究现状第27-28页
   ·毕赤酵母的研究进展第28-35页
     ·毕赤酵母表达系统的特性第29页
     ·毕赤酵母菌株第29-30页
     ·毕赤酵母表达载体第30-31页
     ·巴斯德毕赤酵母表达系统的转化方式第31页
     ·外源蛋白在毕赤酵母中的表达机理第31-33页
     ·外源蛋白的表达第33-35页
   ·毕赤酵母高密度发酵方式第35-36页
   ·本研究的目的及意义第36-37页
2 材料与方法第37-53页
   ·材料第37-41页
     ·菌株及实验动物第37页
     ·所用试剂及耗材第37页
     ·主要培养基及试剂的配制方法第37-40页
     ·主要仪器及设备第40-41页
   ·方法第41-53页
     ·重组酵母菌株 GS115/pPIC9K-mChIL-18 的鉴定第41-45页
     ·毕赤酵母大规模表达 mChIL-18 条件的优化第45-47页
     ·Bradford 法测定表达上清中 mChIL-18 蛋白含量第47-48页
     ·mChIL-18 的纯化第48页
     ·脂质体包被 mChIL-18第48-49页
     ·mChIL-18 脂质体对新城疫疫苗免疫增强作用的研究第49页
     ·细胞免疫检测(流氏细胞术)第49-50页
     ·血凝血抑试验第50-52页
     ·攻毒试验第52页
     ·数据处理第52-53页
3 结果与分析第53-64页
   ·重组酵母菌株 GS115/pPIC9K-mChIL-18 的鉴定第53-55页
     ·PCR 法鉴定重组酵母菌株第53-54页
     ·表达产物的 SDS-PAGE 分析第54页
     ·表达产物的 Western blot 分析第54-55页
   ·毕赤酵母大规模表达 mChIL-18 条件的优化第55-58页
     ·发酵液 pH 值对 mChIL-18 发酵产量的影响第55-56页
     ·溶解氧对 mChIL-18 发酵表达产量的影响第56页
     ·培养基成分对 mChIL-18 发酵表达产量的影响第56-57页
     ·温度对 mChIL-18 发酵表达产量的影响第57页
     ·甲醇流加速度对 mChIL-18 发酵表达产量的影响第57页
     ·消泡剂对 mChIL-18 发酵表达产量的影响第57页
     ·mChIL-18 大规模发酵时细胞湿重和 OD600 监测结果第57-58页
   ·Bradford 法测定表达上清中 mChIL-18 蛋白含量第58-59页
   ·mChIL-18 的纯化结果第59页
   ·脂质体包被 mChIL-18第59页
   ·mChIL-18 脂质体对新城疫疫苗的免疫增强作用第59-64页
     ·mChIL-18 脂质体促进细胞免疫水平检测第59-62页
     ·mChIL-18 脂质体对 HI 抗体的影响第62-63页
     ·mChIL-18 攻毒保护试验第63-64页
4 讨论第64-68页
结论第68-69页
参考文献第69-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间论文发表情况第80页

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