摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
插图和附表清单 | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第10-24页 |
·肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的结构 | 第10-11页 |
·TRAIL的发现史 | 第10页 |
·分布 | 第10页 |
·结构 | 第10-11页 |
·TRAIL的功能—TRAIL与其受体的相互作用 | 第11-14页 |
·TRAIL受体 | 第11-13页 |
·TRAIL与其受体的相互作用 | 第13-14页 |
·TRAIL的抗肿瘤机制 | 第14-16页 |
·凋亡诱导途径 | 第14-15页 |
·凋亡诱导调控 | 第15-16页 |
·TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的调控 | 第16-17页 |
·TRAIL在肿瘤治疗中的研究与应用 | 第17-22页 |
·抗DR蛋白 | 第17-18页 |
·TRAIL联合放疗的使用 | 第18-19页 |
·TRAIL与化疗 | 第19-21页 |
·基因疗法 | 第21-22页 |
·重组TRAIL蛋白 | 第22页 |
·其他新的治疗方法 | 第22页 |
·研究的目的和意义 | 第22-24页 |
第二章 TRAIL141-281蛋白的表达纯化 | 第24-58页 |
·材料和方法 | 第24-40页 |
·材料 | 第24-31页 |
·方法 | 第31-40页 |
·结果 | 第40-54页 |
·TRAIL141-281基因扩增 | 第40页 |
·菌落PCR鉴定TRAIL141-281/pMD18-T/DH5α | 第40-41页 |
·重组质粒TRAIL141-281/pMD18-T/DH5α酶切鉴定 | 第41-42页 |
·测序结果 | 第42-43页 |
·菌落PCR鉴定TRAIL141-281/pET30α/DH5α | 第43-45页 |
·重组质粒TRAIL141-281/pET30a酶切鉴定 | 第45-46页 |
·探索目的蛋白的表达条件 | 第46-48页 |
·目的蛋白的表达形式确定 | 第48-50页 |
·目的蛋白的纯化 | 第50-51页 |
·MTT法检测目的蛋白活性 | 第51-54页 |
·讨论 | 第54-57页 |
·表达系统的选择 | 第54页 |
·载体的选择和构建 | 第54页 |
·目的蛋白的诱导表达条件和表达形式 | 第54-55页 |
·目的蛋白的纯化 | 第55页 |
·目的蛋白的鉴定 | 第55-57页 |
·小结 | 第57-58页 |
第三章 稳定表达DR5细胞系的构建 | 第58-71页 |
·材料和方法 | 第58-63页 |
·材料 | 第58-60页 |
·方法 | 第60-63页 |
·结果 | 第63-67页 |
·细胞系的选择 | 第63页 |
·确定转染试剂 | 第63-64页 |
·确定最佳筛选浓度 | 第64-65页 |
·转染后细胞筛选 | 第65-66页 |
·TRAIL对DR5-U2OS细胞系的作用 | 第66-67页 |
·讨论 | 第67-70页 |
·细胞株的选择 | 第67页 |
·肿瘤细胞的凋亡疗法 | 第67-68页 |
·抗性基因新霉素 | 第68页 |
·脂质体转染法 | 第68-69页 |
·融合蛋白的稳定表达 | 第69-70页 |
·小结 | 第70-71页 |
第四章 总结与展望 | 第71-73页 |
(一) 总结 | 第71页 |
(二) 展望 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
References | 第74-82页 |
附录A | 第82页 |