| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 插图和附表清单 | 第9-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-24页 |
| ·肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的结构 | 第10-11页 |
| ·TRAIL的发现史 | 第10页 |
| ·分布 | 第10页 |
| ·结构 | 第10-11页 |
| ·TRAIL的功能—TRAIL与其受体的相互作用 | 第11-14页 |
| ·TRAIL受体 | 第11-13页 |
| ·TRAIL与其受体的相互作用 | 第13-14页 |
| ·TRAIL的抗肿瘤机制 | 第14-16页 |
| ·凋亡诱导途径 | 第14-15页 |
| ·凋亡诱导调控 | 第15-16页 |
| ·TRAIL诱导肿瘤细胞凋亡的调控 | 第16-17页 |
| ·TRAIL在肿瘤治疗中的研究与应用 | 第17-22页 |
| ·抗DR蛋白 | 第17-18页 |
| ·TRAIL联合放疗的使用 | 第18-19页 |
| ·TRAIL与化疗 | 第19-21页 |
| ·基因疗法 | 第21-22页 |
| ·重组TRAIL蛋白 | 第22页 |
| ·其他新的治疗方法 | 第22页 |
| ·研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 TRAIL141-281蛋白的表达纯化 | 第24-58页 |
| ·材料和方法 | 第24-40页 |
| ·材料 | 第24-31页 |
| ·方法 | 第31-40页 |
| ·结果 | 第40-54页 |
| ·TRAIL141-281基因扩增 | 第40页 |
| ·菌落PCR鉴定TRAIL141-281/pMD18-T/DH5α | 第40-41页 |
| ·重组质粒TRAIL141-281/pMD18-T/DH5α酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·测序结果 | 第42-43页 |
| ·菌落PCR鉴定TRAIL141-281/pET30α/DH5α | 第43-45页 |
| ·重组质粒TRAIL141-281/pET30a酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·探索目的蛋白的表达条件 | 第46-48页 |
| ·目的蛋白的表达形式确定 | 第48-50页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第50-51页 |
| ·MTT法检测目的蛋白活性 | 第51-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| ·表达系统的选择 | 第54页 |
| ·载体的选择和构建 | 第54页 |
| ·目的蛋白的诱导表达条件和表达形式 | 第54-55页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第55页 |
| ·目的蛋白的鉴定 | 第55-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第三章 稳定表达DR5细胞系的构建 | 第58-71页 |
| ·材料和方法 | 第58-63页 |
| ·材料 | 第58-60页 |
| ·方法 | 第60-63页 |
| ·结果 | 第63-67页 |
| ·细胞系的选择 | 第63页 |
| ·确定转染试剂 | 第63-64页 |
| ·确定最佳筛选浓度 | 第64-65页 |
| ·转染后细胞筛选 | 第65-66页 |
| ·TRAIL对DR5-U2OS细胞系的作用 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| ·细胞株的选择 | 第67页 |
| ·肿瘤细胞的凋亡疗法 | 第67-68页 |
| ·抗性基因新霉素 | 第68页 |
| ·脂质体转染法 | 第68-69页 |
| ·融合蛋白的稳定表达 | 第69-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 第四章 总结与展望 | 第71-73页 |
| (一) 总结 | 第71页 |
| (二) 展望 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| References | 第74-82页 |
| 附录A | 第82页 |