中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-12页 |
前言 | 第12-15页 |
实验材料与实验方法 | 第15-33页 |
实验结果 | 第33-73页 |
第一部分 MR-1基本研究 | 第33-37页 |
1.MR-1在肿瘤细胞中的表达 | 第33页 |
2.MR-1在人肿瘤细胞系以及人正常细胞系中mRNA和蛋白表达水平的比较 | 第33-35页 |
3.MR-1在细胞内的定位 | 第35-37页 |
第二部分 RNA干扰技术瞬时沉默MR-1表达对细胞生物学功能的影响 | 第37-42页 |
1.MR-1-siRNA的设计、合成以及干扰效率检测 | 第37-38页 |
2.MR-1-siRNA对HepG2细胞增殖生长的影响 | 第38-39页 |
3.MR-1-siRNA对细胞迁移能力的影响 | 第39-40页 |
4.MR-1-siRNA对人肝癌HepG2细胞的基质粘附能力的影响 | 第40-42页 |
第三部分 MR-1稳定低表达细胞系HepG2/HR-1(-)细胞学功能的改变 | 第42-52页 |
1.可稳定表达MR-1 shRNA的质粒载体pCD-shRNA-MR-1的构建 | 第42-43页 |
2.稳定细胞系的筛选 | 第43-44页 |
3.HepG2/MR-1(-)细胞增殖生长能力的变化 | 第44-46页 |
4.HepG2/MR-1(-)细胞的迁移能力的变化 | 第46-47页 |
5.HepG2/MR-1(-)细胞的基质粘附能力的变化 | 第47页 |
6.HepG2/MR-1(-)细胞在FN上伸展能力的变化 | 第47-48页 |
7.HepG2/MR-1(-)细胞体内生长速度的变化 | 第48-52页 |
第四部分 MR-1稳定高表达细胞系BEL-7402/MR-1(+)细胞学功能的改变 | 第52-58页 |
1.稳定高表达载体pcDNA3.1-MR-1的构建 | 第52页 |
2.稳定细胞系的筛选 | 第52-53页 |
3.BEL-7402/MR-1(+)细胞增殖生长能力的变化 | 第53-54页 |
4.BEL-7402/MR-1(+)细胞迁移能力的变化 | 第54页 |
5.BEL-7402/MR-1(+)细胞基质粘附能力的变化 | 第54-57页 |
6.BEL-7402/MR-1(+)细胞在FN上伸展能力的变化 | 第57-58页 |
第五部分 MR-1机制的探讨 | 第58-73页 |
1.MR-1对MLC2,FAK和Akt活性的影响 | 第58-59页 |
2.MR-1-siRNA对F-actin聚合水平的影响 | 第59页 |
3.MR-1-siRNA对FN诱导的FAK和Akt活化的影响 | 第59-60页 |
4.MLCK抑制剂和张力纤维解聚剂对FAK/Akt信号通路以及细胞增殖和运动的影响 | 第60-63页 |
5.PI3K抑制剂LY294002对FAK信号通路的影响 | 第63-64页 |
6.外源性表达MR-1增强MLC2,FAK以及Akt磷酸化水平 | 第64-65页 |
7.基因芯片方法检测MR-1对细胞内其他基因水平的影响 | 第65-73页 |
讨论 | 第73-78页 |
结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-85页 |
文献综述 | 第85-107页 |
致谢 | 第107页 |