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新基因MR-1在肝癌细胞中的功能研究

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-12页
前言第12-15页
实验材料与实验方法第15-33页
实验结果第33-73页
 第一部分 MR-1基本研究第33-37页
  1.MR-1在肿瘤细胞中的表达第33页
  2.MR-1在人肿瘤细胞系以及人正常细胞系中mRNA和蛋白表达水平的比较第33-35页
  3.MR-1在细胞内的定位第35-37页
 第二部分 RNA干扰技术瞬时沉默MR-1表达对细胞生物学功能的影响第37-42页
  1.MR-1-siRNA的设计、合成以及干扰效率检测第37-38页
  2.MR-1-siRNA对HepG2细胞增殖生长的影响第38-39页
  3.MR-1-siRNA对细胞迁移能力的影响第39-40页
  4.MR-1-siRNA对人肝癌HepG2细胞的基质粘附能力的影响第40-42页
 第三部分 MR-1稳定低表达细胞系HepG2/HR-1(-)细胞学功能的改变第42-52页
  1.可稳定表达MR-1 shRNA的质粒载体pCD-shRNA-MR-1的构建第42-43页
  2.稳定细胞系的筛选第43-44页
  3.HepG2/MR-1(-)细胞增殖生长能力的变化第44-46页
  4.HepG2/MR-1(-)细胞的迁移能力的变化第46-47页
  5.HepG2/MR-1(-)细胞的基质粘附能力的变化第47页
  6.HepG2/MR-1(-)细胞在FN上伸展能力的变化第47-48页
  7.HepG2/MR-1(-)细胞体内生长速度的变化第48-52页
 第四部分 MR-1稳定高表达细胞系BEL-7402/MR-1(+)细胞学功能的改变第52-58页
  1.稳定高表达载体pcDNA3.1-MR-1的构建第52页
  2.稳定细胞系的筛选第52-53页
  3.BEL-7402/MR-1(+)细胞增殖生长能力的变化第53-54页
  4.BEL-7402/MR-1(+)细胞迁移能力的变化第54页
  5.BEL-7402/MR-1(+)细胞基质粘附能力的变化第54-57页
  6.BEL-7402/MR-1(+)细胞在FN上伸展能力的变化第57-58页
 第五部分 MR-1机制的探讨第58-73页
  1.MR-1对MLC2,FAK和Akt活性的影响第58-59页
  2.MR-1-siRNA对F-actin聚合水平的影响第59页
  3.MR-1-siRNA对FN诱导的FAK和Akt活化的影响第59-60页
  4.MLCK抑制剂和张力纤维解聚剂对FAK/Akt信号通路以及细胞增殖和运动的影响第60-63页
  5.PI3K抑制剂LY294002对FAK信号通路的影响第63-64页
  6.外源性表达MR-1增强MLC2,FAK以及Akt磷酸化水平第64-65页
  7.基因芯片方法检测MR-1对细胞内其他基因水平的影响第65-73页
讨论第73-78页
结论第78-79页
参考文献第79-85页
文献综述第85-107页
致谢第107页

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