| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 引言 | 第10-19页 |
| 论文总体设计 | 第19-21页 |
| 第一章 鉴定激酶RX218多肽底物 | 第21-38页 |
| 1.前言 | 第21-23页 |
| 2.结果与讨论 | 第23-37页 |
| ·丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶多肽底物的合成及纯化 | 第23-28页 |
| ·激酶底物筛选方法的建立及激酶底物的筛选 | 第28-32页 |
| ·Kinase-Glo发光法筛选模型的建立 | 第32-34页 |
| ·应用Kinase-Glo发光法筛选激酶RX218的抑制剂 | 第34-37页 |
| 3.小结 | 第37页 |
| 4.参考文献 | 第37-38页 |
| 第二章 建立质谱技术筛选激酶抑制剂的方法 | 第38-62页 |
| 1.前言 | 第38-39页 |
| 2.结果与讨论 | 第39-58页 |
| ·磷酸化多肽的合成及纯化 | 第39-40页 |
| ·样品前处理 | 第40-42页 |
| ·建立LC-MS分析方法 | 第42-47页 |
| ·反应的淬灭及蛋白质沉淀 | 第47-48页 |
| ·优化激酶反应体系 | 第48-55页 |
| ·DMSO的影响 | 第55页 |
| ·方法学 | 第55-58页 |
| ·RX218 LC-MS筛选模型的评价 | 第58页 |
| 3.小结 | 第58-59页 |
| 4.参考文献 | 第59-62页 |
| 第三章 应用质谱技术筛选RX218激酶抑制剂 | 第62-83页 |
| 1.前言 | 第62页 |
| 2.结果与讨论 | 第62-80页 |
| ·底物多肽Pep8的合成 | 第62-63页 |
| ·联苯类化合物的筛选 | 第63-66页 |
| ·1,2,7-三取代-1H-咪唑并[4,5-g]喹喔啉-6-酮类混合物库的筛选 | 第66-70页 |
| ·单一化合物的合成 | 第70-77页 |
| ·单一化合物活性筛选 | 第77-79页 |
| ·质谱法筛选及生物发光筛选方法的比较 | 第79-80页 |
| 3.小结 | 第80页 |
| 4.参考文献 | 第80-83页 |
| 第四章 实验部分 | 第83-96页 |
| 1.实验仪器 | 第83-84页 |
| 2.溶剂与试剂 | 第84-86页 |
| 3.数据分析软件 | 第86页 |
| 4.第一章 实验部分 | 第86-89页 |
| 5.第二章 实验部分 | 第89-92页 |
| ·单体法合成磷酸化多肽 | 第89-90页 |
| ·内标Pep8(O_2)-P的制备 | 第90页 |
| ·激酶对于ATP和Pep8的Km值 | 第90-91页 |
| ·筛选模型线性反应时间及RX218浓度的确定: | 第91页 |
| ·DMSO对筛选模型的影响 | 第91-92页 |
| 6.第三章 实验部分 | 第92-96页 |
| ·化合物V8804抑制激酶RX218的IC_(50)值测定 | 第92-93页 |
| ·应用质谱法进行激酶抑制剂的混合物筛选 | 第93-94页 |
| ·7-胺基-3,6-二取代-2-喹喔啉酮(Ⅳ)的制备 | 第94-95页 |
| ·以骨架Ⅳ化合物为原料合成骨架Ⅴ单一化合物 | 第95页 |
| ·应用质谱法对65个单一化合物进行筛选 | 第95-96页 |
| 全文总结 | 第96-98页 |
| 综述 | 第98-113页 |
| 附图1:纯化多肽的LC-MS图谱 | 第113-115页 |
| 附图2:肽库的LC-MS图谱 | 第115-125页 |
| 附图3:65个单一化合物的LC-MS图谱 | 第125-142页 |
| 缩略语 | 第142-144页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第144-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
