摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
本文所用主要缩略词 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-31页 |
第一章 棉纤维发育及其相关基因研究进展 | 第13-25页 |
1 棉纤维细胞发育的过程 | 第13-16页 |
·棉纤维细胞起始发育 | 第13-14页 |
·棉纤维细胞伸长 | 第14-15页 |
·棉纤维细胞次生壁增厚 | 第15页 |
·棉纤维的成熟 | 第15-16页 |
2 棉纤维发育相关基因及表达调控研究进展 | 第16-21页 |
·棉纤维起始相关基因表达调控的研究进展 | 第19-20页 |
·棉纤维伸长相关基因的表达调控研究进展 | 第20-21页 |
·棉纤维次生壁加厚相关基因的表达调控研究进展 | 第21页 |
3 实时荧光定量PCR技术检测基因表达研究进展 | 第21-25页 |
·荧光定量PCR技术原理 | 第22-23页 |
·荧光定量PCR在检测基因表达中的应用 | 第23-25页 |
第二章 遗传转化验证棉花重要基因功能 | 第25-29页 |
1 棉花的遗传转化方法 | 第25-27页 |
·农杆菌介导法 | 第25-26页 |
·基因枪法 | 第26页 |
·花粉管通道法 | 第26-27页 |
2 β-葡萄糖糖苷酶基因研究进展 | 第27-28页 |
3.转基因验证棉花重要基因功能 | 第28-29页 |
本研究的目的和意义 | 第29-31页 |
第二部分 研究报告 | 第31-91页 |
第三章 棉纤维发育相关基因时空表达与纤维品质关联分析 | 第31-67页 |
1 材料和方法 | 第32-39页 |
·棉花材料 | 第32页 |
·基因来源 | 第32页 |
·荧光定量PCR引物合成 | 第32-33页 |
·实验仪器与试剂 | 第33-34页 |
·棉花总RNA的提取 | 第34-37页 |
·实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
·基因表达差异的分析方法 | 第38-39页 |
·差异显著性及相关性分析方法 | 第39页 |
·14个棉花品种(或品系)纤维品质检测分析 | 第39页 |
2.结果与分析 | 第39-62页 |
·RNA纯度和完整性分析 | 第39-40页 |
·定性PCR反应 | 第40页 |
·实时PCR反应的可靠性 | 第40页 |
·10个基因在14个不同棉花品种(或品系)中的表达趋势 | 第40-50页 |
·14个棉花品种(或品系)纤维品质测定结果 | 第50-52页 |
·10个基因与棉纤维品质各指标的相关性分析 | 第52-62页 |
3.讨论 | 第62-67页 |
·荧光定量PCR技术检测基因表达差异的分析 | 第62-63页 |
·10个基因在不同材料中的表达水平与纤维品质相关性的分析 | 第63-67页 |
第四章 棉花β-1,4-葡糖苷酶基因的转基因功能验证 | 第67-91页 |
1 材料与方法 | 第67-82页 |
·植物材料 | 第67页 |
·菌株和质粒 | 第67-68页 |
·培养基 | 第68页 |
·细菌培养基 | 第68页 |
·植物培养基 | 第68页 |
·引物 | 第68-69页 |
·pBI121-E6-GhBG的正义表达载体的构建 | 第69-73页 |
·植物表达载体的农杆菌转化 | 第73页 |
·农杆菌介导的棉花遗传转化 | 第73-75页 |
·PCR检测 | 第75-77页 |
·Southern杂交 | 第77-81页 |
·卡那霉素抗性检测 | 第81页 |
·纤维素含量的测定 | 第81-82页 |
·转基因植株的时空表达分析 | 第82页 |
·转基因株系纤维品质检测分析 | 第82页 |
2 结果与分析 | 第82-89页 |
·pBI121-E6-GhBG的正义表达载体的鉴定 | 第82-83页 |
·再生植株的获得 | 第83-84页 |
·转基因植株的分子检测 | 第84-86页 |
·转GhBG基因棉花T_1和T_2代的遗传分析 | 第86-87页 |
·转基因植株T_1和T_2代纤维素含量的测定 | 第87-88页 |
·纯合株系的实时荧光定量分析 | 第88-89页 |
·转基因植株T_1和T_2代纤维品质检测分析 | 第89页 |
3.结论和讨论 | 第89-91页 |
全文结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-101页 |
致谢 | 第101页 |