目录 | 第1-11页 |
中文摘要 | 第11-14页 |
英文摘要 | 第14-18页 |
符号说明 | 第18-20页 |
第1章 文献综述 | 第20-54页 |
·前言 | 第20页 |
·真核生物染色体末端——端粒 | 第20-30页 |
·端粒的概念 | 第20-21页 |
·端粒DNA序列 | 第21-23页 |
·端粒重复序列长度的变化 | 第23页 |
·端粒的结构特点 | 第23-24页 |
·端粒酶与端粒的合成 | 第24-26页 |
·端粒结合蛋白 | 第26-28页 |
·端粒DNA双链结合蛋白 | 第26-27页 |
·端粒DNA单链结合蛋白 | 第27-28页 |
·端粒相关蛋白 | 第28页 |
·端粒的细胞学 | 第28-29页 |
·端粒的功能 | 第29-30页 |
·生物染色体关键元件——着丝粒 | 第30-36页 |
·着丝粒的概念 | 第30-31页 |
·着丝粒的功能 | 第31页 |
·着丝粒DNA序列 | 第31-33页 |
·着丝粒/动粒蛋白复合体 | 第33-34页 |
·异染色质化的着丝粒含有功能基因 | 第34-35页 |
·着丝粒的进化 | 第35-36页 |
·人工染色体的研究进展 | 第36-43页 |
·人工染色体的概念 | 第37页 |
·人工染色体的种类及特点 | 第37-39页 |
·YAC(酵母人工染色体) | 第37页 |
·BAC(细菌人工染色体) | 第37-38页 |
·PAC(P1衍生人工染色体) | 第38页 |
·MAC(哺乳动物人工染色体) | 第38页 |
·BIBAC(双元细菌人工染色体) | 第38页 |
·TAC(可转化人工染色体) | 第38-39页 |
·HAC(人类人工染色体) | 第39页 |
·PLAC(植物人工染色体) | 第39页 |
·人工染色体的合成策略 | 第39-41页 |
·组装法 | 第40页 |
·截短法 | 第40-41页 |
·人工染色体的用途 | 第41-43页 |
·构建基因组物理图谱 | 第41页 |
·基因的图位克隆 | 第41-42页 |
·转基因技术 | 第42页 |
·比较基因组学 | 第42页 |
·基因治疗 | 第42-43页 |
·本研究的目的及其研究内容 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-54页 |
第2章 农杆菌介导籼稻中籼3037转化体系的优化及其应用 | 第54-69页 |
·前言 | 第54页 |
·材料与方法 | 第54-58页 |
·水稻品种 | 第54-55页 |
·质粒、农杆菌菌株 | 第55页 |
·化学试剂及药品 | 第55页 |
·水稻的愈伤组织培养 | 第55-57页 |
·农杆菌菌液浓度和浸染时间的确立实验 | 第57页 |
·转基因植株的分子鉴定 | 第57页 |
·转基因植株潮霉素抗性鉴定 | 第57-58页 |
·转基因植株的种植 | 第58页 |
·结果与分析 | 第58-65页 |
·影响中籼3037转化因素的研究 | 第58-62页 |
·愈伤组织诱导培养基的筛选 | 第58-59页 |
·不同农杆菌菌株浸染效率的比较 | 第59页 |
·中籼3037不同外植体转化效率的比较 | 第59-60页 |
·农杆菌菌液浓度和浸染时间对中籼3037转化率的影响 | 第60-61页 |
·山梨醇对愈伤组织分化的影响 | 第61页 |
·农杆菌介导转化中籼3037体系的确立 | 第61-62页 |
·农杆菌介导转化中籼3037体系的应用 | 第62-65页 |
·不同品种(系)间转化效率的比较 | 第62-63页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第63-64页 |
·转基因植株Southern blotting分析 | 第64页 |
·转基因植株后代遗传分析 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-66页 |
·结论 | 第66页 |
参考文献 | 第66-69页 |
第3章 GFP-OsCENH3融合转基因水稻的创建及其遗传应用 | 第69-87页 |
·前言 | 第69-70页 |
·材料与方法 | 第70-74页 |
·植物材料 | 第70页 |
·农杆菌菌株及质粒 | 第70-71页 |
·探针、分子生物学试剂 | 第71-72页 |
·农杆菌介导的水稻转化 | 第72页 |
·转基因水稻植株总DNA的PCR和Southern杂交分析 | 第72页 |
·荧光原位杂交及蛋白质抗体免疫荧光染色反应 | 第72-74页 |
·结果与分析 | 第74-81页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第74-75页 |
·转基因水稻植株的PCR检测 | 第75页 |
·转基因水稻植株Southern杂交分析 | 第75-76页 |
·GFP与CENH3蛋白在转基因水稻中的细胞学定位 | 第76-78页 |
·GFP-CENH3融合蛋白与水稻着丝粒特异重复序列CentO的细胞学定位 | 第78-79页 |
·GFP-CENH3融合蛋白与微管蛋白和PAIR2蛋白的细胞学定位 | 第79-81页 |
·讨论 | 第81-83页 |
·结论 | 第83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
第4章 水稻端粒酶催化亚基基因RNA干涉的初步研究 | 第87-108页 |
·前言 | 第87-88页 |
·材料与方法 | 第88-93页 |
·实验材料 | 第88-91页 |
·水稻材料 | 第88页 |
·菌株和载体 | 第88页 |
·分子生物学试剂和化学试剂 | 第88-90页 |
·培养基 | 第90-91页 |
·实验方法 | 第91-93页 |
·TERT蛋白的生物信息学 | 第91-92页 |
·水稻的转化程序 | 第92页 |
·PCR检测分析 | 第92-93页 |
·Southern杂交分析 | 第93页 |
·染色体末端限制片段分析法 | 第93页 |
·染色体荧光原位杂交 | 第93页 |
·转基因植株的种植 | 第93页 |
·结果与分析 | 第93-103页 |
·TERT基因的生物信息学分析 | 第94-97页 |
·TERT蛋白序列的多重比较分析 | 第94-95页 |
·TERT蛋白序列的进化树分析 | 第95-96页 |
·水稻OsTERT基因的外显子与结构 | 第96-97页 |
·表达载体的获得 | 第97-98页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第98页 |
·转基因水稻植株的分子生物学鉴定 | 第98-101页 |
·转基因水稻植株的PCR分析 | 第98-99页 |
·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析 | 第99-100页 |
·转基因植株染色体端粒DNA长度变化分析 | 第100-101页 |
·转基因植株细胞学鉴定 | 第101-102页 |
·转基因植株的农艺性状 | 第102-103页 |
·讨论 | 第103-104页 |
·端粒酶亚基缺失的水稻出现农艺性状变异世代的估算 | 第103-104页 |
·端粒酶活性的测定 | 第104页 |
·结论 | 第104-105页 |
参考文献 | 第105-108页 |
第5章 农杆菌介导端粒DNA转化及突变体分析 | 第108-131页 |
·前言 | 第108-109页 |
·材料与方法 | 第109-116页 |
·实验材料 | 第109页 |
·水稻品种 | 第109页 |
·菌株和载体 | 第109页 |
·分子生物学试剂和化学试剂 | 第109页 |
·实验方法 | 第109-116页 |
·质粒提取纯化 | 第109-110页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第110页 |
·农杆菌的转化 | 第110-111页 |
·水稻遗传转化过程 | 第111页 |
·转基因水稻植株总DNA的PCR分析 | 第111-112页 |
·基因组DNA的小量提取:CTAB法 | 第111页 |
·转基因水稻植株总DNA的PCR扩增 | 第111-112页 |
·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析 | 第112-116页 |
·大量总DNA的提取:SDS法 | 第112页 |
·Southern杂交分析 | 第112-116页 |
·酶切 | 第112-113页 |
·转膜 | 第113页 |
·DNA在尼龙膜上的固定 | 第113页 |
·DIG标记的特异性探针的制备 | 第113-114页 |
·预杂交 | 第114-115页 |
·杂交 | 第115页 |
·洗膜 | 第115页 |
·显影 | 第115-116页 |
·细胞学检测 | 第116页 |
·转基因水稻植株田间种植与性状观察 | 第116页 |
·结果与分析 | 第116-126页 |
·转化载体的构建 | 第116-117页 |
·转基因水稻植株的获得 | 第117-118页 |
·转基因水稻植株的分子生物学鉴定 | 第118-119页 |
·转基因水稻植株的PCR分析 | 第118页 |
·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析 | 第118-119页 |
·转基因水稻植株农艺性状 | 第119-126页 |
·T_0代的植株性状分析 | 第119-123页 |
·T_1代植株的遗传分析 | 第123-126页 |
·讨论 | 第126-128页 |
·有关转化载体的问题 | 第126页 |
·载体中端粒DNA序列长度的问题 | 第126-127页 |
·转基因水稻中变异植株的来源 | 第127-128页 |
·结论 | 第128页 |
参考文献 | 第128-131页 |
第6章 一个显性矮秆水稻突变体的获得及其遗传分析 | 第131-144页 |
·前言 | 第131-132页 |
·材料与方法 | 第132-133页 |
·植物材料 | 第132页 |
·农秆菌菌株及质粒 | 第132页 |
·生化试剂 | 第132页 |
·根癌农秆菌介导的水稻转化 | 第132页 |
·转基因水稻的分子鉴定 | 第132-133页 |
·潮霉素抗性鉴定 | 第133页 |
·突变体的种植 | 第133页 |
·结果与分析 | 第133-139页 |
·矮秆突变体的获得 | 第133页 |
·矮秆突变体的性状表现 | 第133-135页 |
·突变体的分子鉴定 | 第135-137页 |
·矮秆突变性状的遗传分析 | 第137-139页 |
·矮秆突变性状与T-DNA共分离的遗传分析 | 第137-138页 |
·杂合矮秆突变体自交后代遗传分析 | 第138-139页 |
·纯合矮秆突变体测交后代遗传分析 | 第139页 |
·讨论 | 第139-141页 |
·结论 | 第141-142页 |
参考文献 | 第142-144页 |
致谢 | 第144-145页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第145-146页 |