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水稻端粒及着丝粒相关序列的转化及其功能研究

目录第1-11页
中文摘要第11-14页
英文摘要第14-18页
符号说明第18-20页
第1章 文献综述第20-54页
   ·前言第20页
   ·真核生物染色体末端——端粒第20-30页
     ·端粒的概念第20-21页
     ·端粒DNA序列第21-23页
     ·端粒重复序列长度的变化第23页
     ·端粒的结构特点第23-24页
     ·端粒酶与端粒的合成第24-26页
     ·端粒结合蛋白第26-28页
       ·端粒DNA双链结合蛋白第26-27页
       ·端粒DNA单链结合蛋白第27-28页
       ·端粒相关蛋白第28页
     ·端粒的细胞学第28-29页
     ·端粒的功能第29-30页
   ·生物染色体关键元件——着丝粒第30-36页
     ·着丝粒的概念第30-31页
     ·着丝粒的功能第31页
     ·着丝粒DNA序列第31-33页
     ·着丝粒/动粒蛋白复合体第33-34页
     ·异染色质化的着丝粒含有功能基因第34-35页
     ·着丝粒的进化第35-36页
   ·人工染色体的研究进展第36-43页
     ·人工染色体的概念第37页
     ·人工染色体的种类及特点第37-39页
       ·YAC(酵母人工染色体)第37页
       ·BAC(细菌人工染色体)第37-38页
       ·PAC(P1衍生人工染色体)第38页
       ·MAC(哺乳动物人工染色体)第38页
       ·BIBAC(双元细菌人工染色体)第38页
       ·TAC(可转化人工染色体)第38-39页
       ·HAC(人类人工染色体)第39页
       ·PLAC(植物人工染色体)第39页
     ·人工染色体的合成策略第39-41页
       ·组装法第40页
       ·截短法第40-41页
     ·人工染色体的用途第41-43页
       ·构建基因组物理图谱第41页
       ·基因的图位克隆第41-42页
       ·转基因技术第42页
       ·比较基因组学第42页
       ·基因治疗第42-43页
   ·本研究的目的及其研究内容第43-44页
 参考文献第44-54页
第2章 农杆菌介导籼稻中籼3037转化体系的优化及其应用第54-69页
   ·前言第54页
   ·材料与方法第54-58页
     ·水稻品种第54-55页
     ·质粒、农杆菌菌株第55页
     ·化学试剂及药品第55页
     ·水稻的愈伤组织培养第55-57页
     ·农杆菌菌液浓度和浸染时间的确立实验第57页
     ·转基因植株的分子鉴定第57页
     ·转基因植株潮霉素抗性鉴定第57-58页
     ·转基因植株的种植第58页
   ·结果与分析第58-65页
     ·影响中籼3037转化因素的研究第58-62页
       ·愈伤组织诱导培养基的筛选第58-59页
       ·不同农杆菌菌株浸染效率的比较第59页
       ·中籼3037不同外植体转化效率的比较第59-60页
       ·农杆菌菌液浓度和浸染时间对中籼3037转化率的影响第60-61页
       ·山梨醇对愈伤组织分化的影响第61页
       ·农杆菌介导转化中籼3037体系的确立第61-62页
     ·农杆菌介导转化中籼3037体系的应用第62-65页
       ·不同品种(系)间转化效率的比较第62-63页
       ·转基因植株的PCR检测第63-64页
       ·转基因植株Southern blotting分析第64页
       ·转基因植株后代遗传分析第64-65页
   ·讨论第65-66页
   ·结论第66页
 参考文献第66-69页
第3章 GFP-OsCENH3融合转基因水稻的创建及其遗传应用第69-87页
   ·前言第69-70页
   ·材料与方法第70-74页
     ·植物材料第70页
     ·农杆菌菌株及质粒第70-71页
     ·探针、分子生物学试剂第71-72页
     ·农杆菌介导的水稻转化第72页
     ·转基因水稻植株总DNA的PCR和Southern杂交分析第72页
     ·荧光原位杂交及蛋白质抗体免疫荧光染色反应第72-74页
   ·结果与分析第74-81页
     ·转基因水稻植株的获得第74-75页
     ·转基因水稻植株的PCR检测第75页
     ·转基因水稻植株Southern杂交分析第75-76页
     ·GFP与CENH3蛋白在转基因水稻中的细胞学定位第76-78页
     ·GFP-CENH3融合蛋白与水稻着丝粒特异重复序列CentO的细胞学定位第78-79页
     ·GFP-CENH3融合蛋白与微管蛋白和PAIR2蛋白的细胞学定位第79-81页
   ·讨论第81-83页
   ·结论第83页
 参考文献第83-87页
第4章 水稻端粒酶催化亚基基因RNA干涉的初步研究第87-108页
   ·前言第87-88页
   ·材料与方法第88-93页
     ·实验材料第88-91页
       ·水稻材料第88页
       ·菌株和载体第88页
       ·分子生物学试剂和化学试剂第88-90页
       ·培养基第90-91页
     ·实验方法第91-93页
       ·TERT蛋白的生物信息学第91-92页
       ·水稻的转化程序第92页
       ·PCR检测分析第92-93页
       ·Southern杂交分析第93页
       ·染色体末端限制片段分析法第93页
       ·染色体荧光原位杂交第93页
       ·转基因植株的种植第93页
   ·结果与分析第93-103页
     ·TERT基因的生物信息学分析第94-97页
       ·TERT蛋白序列的多重比较分析第94-95页
       ·TERT蛋白序列的进化树分析第95-96页
       ·水稻OsTERT基因的外显子与结构第96-97页
     ·表达载体的获得第97-98页
     ·转基因水稻植株的获得第98页
     ·转基因水稻植株的分子生物学鉴定第98-101页
       ·转基因水稻植株的PCR分析第98-99页
       ·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析第99-100页
       ·转基因植株染色体端粒DNA长度变化分析第100-101页
     ·转基因植株细胞学鉴定第101-102页
     ·转基因植株的农艺性状第102-103页
     ·讨论第103-104页
     ·端粒酶亚基缺失的水稻出现农艺性状变异世代的估算第103-104页
     ·端粒酶活性的测定第104页
   ·结论第104-105页
 参考文献第105-108页
第5章 农杆菌介导端粒DNA转化及突变体分析第108-131页
   ·前言第108-109页
   ·材料与方法第109-116页
     ·实验材料第109页
       ·水稻品种第109页
       ·菌株和载体第109页
       ·分子生物学试剂和化学试剂第109页
     ·实验方法第109-116页
       ·质粒提取纯化第109-110页
       ·农杆菌感受态的制备第110页
       ·农杆菌的转化第110-111页
       ·水稻遗传转化过程第111页
       ·转基因水稻植株总DNA的PCR分析第111-112页
         ·基因组DNA的小量提取:CTAB法第111页
         ·转基因水稻植株总DNA的PCR扩增第111-112页
       ·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析第112-116页
         ·大量总DNA的提取:SDS法第112页
         ·Southern杂交分析第112-116页
           ·酶切第112-113页
           ·转膜第113页
           ·DNA在尼龙膜上的固定第113页
           ·DIG标记的特异性探针的制备第113-114页
           ·预杂交第114-115页
           ·杂交第115页
           ·洗膜第115页
           ·显影第115-116页
       ·细胞学检测第116页
       ·转基因水稻植株田间种植与性状观察第116页
   ·结果与分析第116-126页
     ·转化载体的构建第116-117页
     ·转基因水稻植株的获得第117-118页
     ·转基因水稻植株的分子生物学鉴定第118-119页
       ·转基因水稻植株的PCR分析第118页
       ·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析第118-119页
     ·转基因水稻植株农艺性状第119-126页
       ·T_0代的植株性状分析第119-123页
       ·T_1代植株的遗传分析第123-126页
   ·讨论第126-128页
     ·有关转化载体的问题第126页
     ·载体中端粒DNA序列长度的问题第126-127页
     ·转基因水稻中变异植株的来源第127-128页
   ·结论第128页
 参考文献第128-131页
第6章 一个显性矮秆水稻突变体的获得及其遗传分析第131-144页
   ·前言第131-132页
   ·材料与方法第132-133页
     ·植物材料第132页
     ·农秆菌菌株及质粒第132页
     ·生化试剂第132页
     ·根癌农秆菌介导的水稻转化第132页
     ·转基因水稻的分子鉴定第132-133页
     ·潮霉素抗性鉴定第133页
     ·突变体的种植第133页
   ·结果与分析第133-139页
     ·矮秆突变体的获得第133页
     ·矮秆突变体的性状表现第133-135页
     ·突变体的分子鉴定第135-137页
     ·矮秆突变性状的遗传分析第137-139页
       ·矮秆突变性状与T-DNA共分离的遗传分析第137-138页
       ·杂合矮秆突变体自交后代遗传分析第138-139页
       ·纯合矮秆突变体测交后代遗传分析第139页
   ·讨论第139-141页
   ·结论第141-142页
 参考文献第142-144页
致谢第144-145页
攻读学位期间发表的学术论文目录第145-146页

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