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银杏叶聚戊烯醇(GP)的分离和衍生物合成机理及生物活性研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-17页
第一章 绪论第17-29页
   ·我国银杏叶加工现状与面临的问题第17-18页
   ·问题的思考第18页
   ·国内外植物聚戊烯醇研究现状第18-20页
   ·银杏叶聚戊烯醇(GP)HPLC分布及其结构特征研究第20-25页
     ·HPLC单科性和多科性特征第20-21页
     ·聚戊烯醇的存在特征第21页
     ·GP结构鉴定方法第21-22页
     ·GP的光谱特征第22-25页
       ·GP的红外光谱(IR)特征第22-23页
       ·GP的氢谱(~1H-NMR)特征第23页
       ·GP的碳谱(~(13)C-NMR)特征第23-24页
       ·GP的质谱(MS)特征第24-25页
   ·国内外植物聚戊烯醇的药理和临床应用第25页
   ·GP的应用前景第25-27页
     ·GP合成多萜醇及其衍生物第25-26页
     ·GP合成聚戊烯醇磷酸酯及其衍生物第26页
     ·其它衍生物的合成第26-27页
   ·本课题研究目的、意义及内容第27-28页
   ·本课题的创新点第28-29页
第二章 银杏叶聚戊烯醇(GP)分析方法及其含量的研究第29-42页
   ·引言第29页
   ·GP的定性分析方法第29-33页
     ·仪器、材料与试剂第29-30页
     ·GP样品的制备第30页
     ·TLC定性试验第30-31页
     ·HPLC定性试验第31-33页
   ·GP的HPLC定量方法第33-37页
     ·仪器、材料与试剂第33页
     ·HPLC定量的依据第33-34页
     ·紫外吸收波长的选择第34页
     ·HPLC-UV流动相的选择第34-35页
     ·HPLC外标法的方法学第35-37页
       ·标准对照品溶液的配制第35页
       ·标准对照品曲线的绘制第35-36页
       ·聚戊烯醇含量计算公式第36页
       ·GP软膏的分析第36页
       ·精密度试验第36-37页
       ·样品加样回收率试验第37页
       ·稳定性试验第37页
   ·银杏叶中GP含量测定第37-40页
     ·样品的制备第37-38页
     ·不同地区、不同树龄银杏叶中GP的含量第38页
     ·银杏叶中GP的季节性变化规律第38-39页
     ·银杏叶中不同链长聚戊烯醇的相对含量第39-40页
   ·小结第40-42页
第三章 银杏叶聚戊烯醇(GP)提取方法及其工艺的研究第42-52页
   ·引言第42页
   ·超声波提取GP的研究第42-46页
     ·超声波提取原理第42-43页
     ·仪器、材料与试剂第43页
     ·实验方法第43-44页
       ·不同溶剂超声波提取第43页
       ·超声波单因数提取工艺第43-44页
     ·结果与讨论第44-46页
       ·不同溶剂提取GP的影响第44页
       ·不同功率对GP提取的影响第44-45页
       ·不同提取时间对GP的影响第45页
       ·不同提取次数对GP的影响第45-46页
   ·溶剂热浸提GP的研究第46-51页
     ·浸提原理第46-47页
     ·仪器、材料与试剂第47页
     ·实验方法第47-48页
       ·不同溶剂热浸提第47页
       ·索氏法回流提取第47页
       ·不同提取方式对比试验第47页
       ·GP和银杏叶提取物(GBE)分级提取第47-48页
     ·结果与讨论第48-51页
       ·不同溶剂热浸提对GP的影响第48页
       ·索氏提取时间对GP的影响第48-49页
       ·不同提取方式的比较第49-50页
       ·GP和GBE综合加工工艺第50-51页
   ·小结第51-52页
第四章 银杏叶聚戊烯醇(GP)的分离纯化机理及其制备方法第52-64页
   ·引言第52页
   ·实验部分第52-54页
     ·仪器、材料与试剂第52-53页
     ·实验方法第53-54页
       ·银杏叶精油的测定第53页
       ·银杏叶脂肪酸及其酯的测定第53页
       ·石油醚浸提软膏的皂化值测定第53页
       ·银杏叶脂溶性不皂化物的制备第53-54页
       ·溶剂冷冻分离制备GP第54页
       ·介质吸附分离制备GP第54页
       ·GP精制工艺第54页
   ·结果与讨论第54-62页
     ·银杏叶中脂溶性化学组成及其分离机理第54-56页
     ·皂化反应工艺参数筛选第56-59页
       ·不同皂化剂对皂化的影响第56-57页
       ·均化方式对皂化的影响第57页
       ·不同皂化温度对皂化的影响第57-58页
       ·不同皂化时间对皂化的影响第58-59页
       ·不皂化物的制备条件第59页
     ·GP的分离方法第59-62页
       ·溶剂冷冻分离GP的效果第59-60页
       ·溶剂冷冻次数对GP的影响第60页
       ·不同介质对GP的吸附第60-62页
       ·不同叶源对GP精制的影响第62页
   ·小结第62-64页
第五章 分子蒸馏分离银杏叶聚戊烯醇(GP)和甾醇的研究第64-79页
   ·引言第64页
   ·分子短程蒸馏分离原理第64-66页
   ·仪器、材料与试剂第66页
   ·实验方法第66-68页
     ·不皂化物软膏的制备第66-67页
     ·分子蒸馏分离方法第67页
     ·GP定性和定量测定第67页
     ·甾醇的精制方法第67-68页
     ·银杏甾醇的GC—MS分析第68页
     ·银杏甾醇的的HPLC分离第68页
     ·银杏甾醇含量分析第68页
   ·结果与讨论第68-77页
     ·分子蒸馏分离GP和甾醇的机理第68-69页
     ·进料温度对馏出物的影响第69-70页
     ·进料速率对馏出物的影响第70-71页
     ·刮膜转子速率对馏出物的影响第71页
     ·蒸馏真空度对馏出物的影响第71-72页
     ·分子蒸馏分离级数的影响第72-73页
     ·甾醇类集分结晶的前处理第73页
     ·不同溶剂对甾醇结晶的影响第73-74页
     ·甾醇GC-MS离子流和组成第74-77页
     ·甾醇结晶物的HPLC第77页
   ·小结第77-79页
第六章 银杏叶聚戊烯醇(GP)衍生物的化学合成及其机理第79-94页
   ·引言第79页
   ·GP衍生物的合成路线设计第79-81页
     ·聚戊烯基二氯磷酸酯第80页
     ·聚戊烯基磷酸单酯(GPP)第80页
     ·氯磷酸二乙酯第80-81页
     ·聚戊烯基磷酸二乙酯第81页
   ·仪器、材料与试剂第81页
   ·实验方法第81-84页
     ·GP样品的精制第81-82页
     ·氯磷酸二乙酯的合成第82页
     ·聚戊烯基磷酸二乙酯的合成第82页
     ·聚戊烯基二氯磷酸酯的合成第82页
     ·聚戊烯基磷酸单酯(GPP)的合成第82-83页
     ·焦磷酸合成聚戊烯基磷酸单酯(GPP)第83页
     ·聚戊烯醇磷酸单酯(GPP)HPLC制备第83页
     ·聚戊烯醇衍生物的光谱鉴定第83-84页
   ·结果与讨论第84-93页
     ·聚戊烯基磷酸二乙酯的光谱特征第84-86页
     ·聚戊烯基二氯磷酸酯的光谱特征第86-87页
     ·聚戊烯基磷酸单酯的光谱特征第87-91页
     ·磷酰化剂的选择第91-92页
     ·相反应的催化剂选择第92页
     ·氯磷酸二乙酯一步法合成对GPP转化率的影响第92页
     ·GPP反应产物的分离纯化机理第92-93页
   ·小结第93-94页
第七章 银杏叶聚戊烯醇(GP)对肝损伤的保护作用第94-109页
   ·引言第94页
   ·实验部分第94-97页
       ·药物和试剂第94-95页
       ·实验动物第95页
     ·实验仪器第95页
     ·实验方法第95-97页
       ·CCL_4急性肝损伤小鼠模型第95-96页
       ·D-GAL急性肝损伤大鼠模型第96页
       ·D-GAL酒精急性肝损伤小鼠模型第96页
       ·CCL_4慢性肝损伤大鼠模型第96-97页
       ·肝功能指标和羟脯氨酸检测第97页
       ·病理学综合评分方法第97页
       ·统计学方法第97页
   ·结果与讨论第97-107页
     ·GP对CCL_4肝损伤小鼠血清ALT和AST的影响第97-98页
     ·GP对CCL_4急性肝损伤小鼠肝组织病理变化的影响第98-99页
     ·GP对D-GAL肝损伤大鼠血清ALT和AST的影响第99页
     ·GP对D-GAL肝损伤大鼠肝组织病理变化的影响第99-101页
     ·GP对酒精性肝损伤小鼠体重的影响第101页
     ·GP对酒精性肝损伤的生化指数的影响第101-102页
     ·GP对酒精性肝损伤小鼠肝组织病理变化的影响第102页
     ·GP对CCL_4慢性肝损伤大鼠肝功能的影响第102-103页
     ·GP对CCL_4慢性肝损伤大鼠肝组织羟脯氨酸含量的影响第103-104页
     ·GP对CCL_4慢性肝损伤大鼠肝脏病理学检查第104-106页
     ·GP保护肝损伤的机理第106-107页
   ·小结第107-109页
第八章 银杏叶聚戊烯醇(GP)体内抗肿瘤的生物活性研究第109-132页
   ·引言第109页
   ·试验材料第109-110页
     ·动物和瘤谱第109-110页
     ·供试样品和药品第110页
     ·仪器设备第110页
   ·试验方法第110-115页
     ·试验药物的配制第110页
     ·GP对EC艾氏腹水瘤小鼠延命的测定第110-111页
     ·SF763人脑瘤荷瘤鼠模型第111页
     ·A549人肺腺癌裸鼠生长抑制方法第111-112页
     ·移植性荷瘤小鼠抑瘤率测定方法第112页
     ·GP联合化疗荷瘤鼠实验方法第112页
     ·GP联合~(60)CO放疗荷瘤鼠实验方法第112页
     ·巨噬细胞吞噬功能测定方法第112-113页
     ·荷瘤小鼠胸腺、脾重量及指数的测定方法第113页
     ·流式细胞术检测DNA含量第113页
     ·荷瘤鼠T细胞亚群和B细胞亚群的检测第113-114页
     ·端粒酶活性检测第114页
       ·RNA提取第114页
       ·端粒重复序列扩增第114页
       ·杂交及ELISA检测第114页
     ·统计学分析第114-115页
   ·结果与讨论第115-130页
     ·GP对EC荷瘤鼠生命延长率的影响第115页
     ·GP合并阿霉素对荷人脑瘤SF763裸鼠生命延长的影响第115-116页
     ·GP对A549人肺腺癌裸鼠生命延长影响第116-117页
     ·GP和GPP对不同肿瘤荷瘤鼠抑制作用对比第117-120页
       ·GP和GPP对肝癌HEPS荷瘤鼠的抑制作用第117-118页
       ·GP和GPP对肉瘤S_(180)荷瘤鼠的抑制作用第118-119页
       ·GP和GPP对艾氏癌EC荷瘤鼠的抑制作用第119-120页
     ·GP联合化疗药对荷瘤鼠的药效筛选第120-122页
       ·GP联合化疗药对肉瘤S_(180)荷瘤鼠的药效作用第120-121页
       ·GP联合化疗药对肝癌HEPS荷瘤鼠的药效作用第121-122页
       ·GP联合化疗药对艾氏腹水癌EC荷瘤鼠的药效作用第122页
     ·GP联合~(60)Co放疗对荷瘤鼠的药效作用第122-123页
     ·GP对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响第123-124页
     ·GP对荷瘤小鼠脏器指数的影响第124-125页
     ·GP对S_(180)荷瘤鼠T和B淋巴细胞亚群的影响第125-126页
     ·GP对S_(180)肿瘤细胞DNA增殖和凋亡水平的影响第126页
     ·GP对S_(180)荷瘤小鼠端粒酶活性(TMA)的影响第126-127页
     ·GP抗肿瘤机理的探讨第127-130页
   ·小结第130-132页
第九章 银杏叶聚戊烯醇(GP)体外抗病毒的生物活性研究第132-144页
   ·引言第132页
   ·材料与仪器第132-133页
     ·药物第132-133页
     ·试剂第133页
     ·仪器、设备第133页
   ·实验方法第133-137页
     ·GP外体抗乙肝病毒检测第133页
     ·GP外体抗H_3N_2甲型流感病毒检测第133-134页
     ·GP对细胞毒性实验第134页
     ·GP对HBV的抑制实验第134-135页
     ·乙肝病毒基因组DNA的分离第135页
     ·荧光定量PCR反应(ICYCLER)第135-136页
     ·GP对H3N2甲型流感病毒杀灭实验第136页
     ·GP对MDCK细胞保护实验第136-137页
     ·数据处理第137页
   ·结果与讨论第137-140页
     ·GP对细胞的毒性效应第137-138页
     ·GP对HBV DNA抑制作用第138-139页
     ·GP对抗H3N2甲型流感病毒的作用第139-140页
   ·GP抗病毒机理探讨第140-143页
   ·小结第143-144页
第十章 结论第144-147页
参考文献第147-154页
附录第154-155页
致谢第155页

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