| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 1 前言 | 第14-29页 |
| ·沙门氏菌的致病性 | 第14-22页 |
| ·沙门氏菌III 型分泌系统的组成 | 第16-20页 |
| ·外膜蛋白和内膜蛋白 | 第16-17页 |
| ·附属蛋白 | 第17页 |
| ·沙门氏菌III 型分泌系统的靶蛋白 | 第17页 |
| ·III 型分泌系统的特点 | 第17-18页 |
| ·III 型分泌系统的机制及调控 | 第18-19页 |
| ·SPI-1 编码III 型分泌系统的致病作用 | 第19-20页 |
| ·沙门氏菌入侵基因研究现状 | 第20-22页 |
| ·沙门氏菌invH 基因功能的研究 | 第20-22页 |
| ·invA 基因功能的研究 | 第22页 |
| ·invF 基因功能的研究 | 第22页 |
| ·invI 和invJ 基因功能的研究 | 第22页 |
| ·补体C3d 研究进展 | 第22-28页 |
| ·C3d 的分子结构 | 第23-24页 |
| ·C3d 的分子佐剂作用 | 第24-26页 |
| ·C3d 可能的作用机制 | 第26-28页 |
| ·促进CR2+细胞对与C3d 偶联抗原的摄取 | 第26页 |
| ·利于抗原向次级淋巴组织的运输 | 第26-27页 |
| ·促进膜分子87 的表达 | 第27页 |
| ·降低B 细胞的活化阈值 | 第27页 |
| ·利于生发中心的形成 | 第27页 |
| ·促进抗体亲和力成熟和记忆性B 淋巴细胞的形成 | 第27-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-53页 |
| ·材料 | 第29-34页 |
| ·菌株和实验动物 | 第29页 |
| ·主要载体 | 第29-30页 |
| ·主要试剂与试剂盒 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第31-34页 |
| ·方法 | 第34-53页 |
| ·不同来源沙门氏菌入侵基因invH 的检测及序列分析 | 第34-38页 |
| ·细菌基因组DNA 的提取 | 第34页 |
| ·目的基因的PCR 扩增和回收 | 第34-36页 |
| ·制作感受态细胞 | 第36页 |
| ·PCR 产物与pMD18-T 的连接 | 第36页 |
| ·连接物的转化 | 第36页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36-38页 |
| ·特异性试验 | 第38页 |
| ·敏感性试验 | 第38页 |
| ·invH 基因的序列测定 | 第38页 |
| ·蛋白质抗原性分析 | 第38页 |
| ·沙门氏菌invH 基因的重组表达与免疫功能研究 | 第38-45页 |
| ·PCR 扩增invH 基因 | 第38-39页 |
| ·PCR 产物及pGEX-4T-3 载体的酶切处理 | 第39页 |
| ·PCR 产物与原核表达载体pGEX-4T-3 的连接 | 第39页 |
| ·连接产物的转化与阳性克隆的筛选鉴定 | 第39-40页 |
| ·invH 融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达及鉴定 | 第40-42页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第42-44页 |
| ·重组蛋白疫苗和细菌灭活疫苗的制备 | 第44页 |
| ·动物的分组与免疫 | 第44-45页 |
| ·IL-4、IFN-γ及抗体含量检测 | 第45页 |
| ·攻毒保护试验 | 第45页 |
| ·抗血清的体外活性试验 | 第45页 |
| ·C3d-P28 分子佐剂invH 核酸疫苗的构建及免疫效果研究 | 第45-53页 |
| ·P28 串联体的构建 | 第45-48页 |
| ·pcDNA-P28.n(n=2,4,6)的构建 | 第48-50页 |
| ·沙门氏菌invH 基因的PCR 扩增 | 第50页 |
| ·插入外源基因 | 第50页 |
| ·重组质粒在Marc145 细胞的表达 | 第50-52页 |
| ·小鼠的分组与免疫 | 第52页 |
| ·血清中IL-4、IFN-γ和抗体的检测 | 第52页 |
| ·攻毒保护试验 | 第52-53页 |
| ·抗血清的体外活性试验 | 第53页 |
| ·数据处理 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-67页 |
| ·不同来源沙门氏菌入侵基因invH 的检测及序列分析 | 第53-56页 |
| ·沙门氏菌invH 基因的PCR 扩增 | 第53-54页 |
| ·特异性检验 | 第54页 |
| ·敏感性检验 | 第54-55页 |
| ·PCR 扩增产物的克隆与鉴定 | 第55页 |
| ·invH 基因的序列分析 | 第55-56页 |
| ·蛋白质抗原性分析 | 第56页 |
| ·沙门氏菌invH 基因的重组表达及免疫效果研究 | 第56-62页 |
| ·沙门氏菌invH 基因的PCR 扩增 | 第56-57页 |
| ·融合表达载体的构建和鉴定 | 第57-58页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第58页 |
| ·表达产物的Western blotting 鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组蛋白疫苗的免疫效果 | 第59-61页 |
| ·抗体检测结果 | 第59-60页 |
| ·IL-4、IFN-γ的检测结果 | 第60页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第60-61页 |
| ·抗血清的体外活性（黏附与黏附抑制）试验 | 第61-62页 |
| ·C3d-P28 分子佐剂invH 核酸疫苗的构建及免疫效果研究 | 第62-67页 |
| ·RT-PCR 扩增C3dcDNA | 第62页 |
| ·单拷贝C3d-p28 基因克隆 | 第62-63页 |
| ·C3d-p28 串联体的构建 | 第63-64页 |
| ·沙门氏菌invH 的PCR 扩增 | 第64页 |
| ·pcDNA3.1-invH-P28.6 的鉴定 | 第64-65页 |
| ·重组质粒的转染及瞬时表达检测 | 第65页 |
| ·免疫小鼠血清的ELISA 抗体检测 | 第65-66页 |
| ·IL-4、IFN-γ的检测结果 | 第66页 |
| ·攻毒保护试验结果 | 第66-67页 |
| ·抗血清的体外活性（黏附与黏附抑制）试验 | 第67页 |
| 4 讨论 | 第67-70页 |
| ·不同来源沙门氏菌入侵基因invH 的检测及序列分析 | 第67-68页 |
| ·沙门氏菌invH 基因的重组表达及免疫效果研究 | 第68-69页 |
| ·C3d-P28 分子佐剂invH 核酸疫苗的构建及免疫效果研究 | 第69-70页 |
| 5 结论与分析 | 第70-72页 |
| ·不同来源沙门氏菌入侵基因invH 的检测及序列分析 | 第70-71页 |
| ·沙门氏菌invH 基因的重组表达及免疫效果研究 | 第71页 |
| ·C3d-P28 分子佐剂invH 核酸疫苗的构建及免疫效果研究 | 第71-72页 |
| 6 参考文献 | 第72-80页 |
| 7 致谢 | 第80-81页 |
| 8 攻读学位期间发表论文情况 | 第81-82页 |
| 硕士学位论文内容简介及自评 | 第82页 |
