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酿酒酵母中木酮糖激酶基因的克隆与表达

致谢第1-4页
摘要第4-5页
ABSTRACT第5-8页
1 前言第8-9页
   ·研究背景第8页
   ·研究的目的和内容第8-9页
2 文献综述第9-19页
   ·生物乙醇的发展第9-10页
   ·植物纤维原料生产乙醇第10-12页
   ·木糖的乙醇发酵第12页
   ·可发酵木糖生成乙醇的微生物第12-13页
   ·微生物的木糖代谢途径第13-17页
     ·木糖转化成木酮糖第13-14页
     ·木酮糖生成5-磷酸木酮糖第14页
     ·磷酸戊糖途径第14页
     ·乙醇生成第14-17页
   ·氧对木糖代谢的影响第17-18页
   ·木糖发酵重组酿酒酵母研究现状第18-19页
3 木酮糖激酶基因的结构分析与合成第19-35页
   ·引言第19页
   ·材料与方法第19-21页
     ·菌种第19页
     ·DNA序列获取第19页
     ·基因组DNA获取第19-20页
     ·DNA引物设计第20页
     ·DNA序列PCR扩增第20页
     ·电泳分析第20页
     ·DNA测序第20-21页
     ·DNA序列的相似性分析第21页
   ·结果与讨论第21-33页
     ·PCR引物的设计与PCR扩增第21-22页
     ·木酮糖激酶基因X3的测序与结构分析第22-30页
     ·酵母基因相似性比对第30-33页
   ·小结第33-35页
4 木糖代谢重组酿酒酵母的构建第35-51页
   ·引言第35-37页
   ·材料与方法第37-41页
     ·菌种和质粒第37页
     ·PCR扩增X1、X2、X3、URA3以及ITS序列第37-38页
     ·DNA电泳分离与凝胶纯化第38页
     ·限制性酶切和酶连反应第38-39页
     ·质粒转化与提取第39-40页
     ·重组酵母菌株的生理学特性鉴定第40-41页
   ·结果与讨论第41-49页
     ·质粒T-X3的构建第41页
     ·构建含有X3序列的表达质粒第41-44页
     ·PCR扩增YEp-X1X2第44-45页
     ·构建表达质粒YEP24-X1X2X3第45-46页
     ·重组酵母菌株的构建及生理学、形态学鉴定第46-47页
     ·重组酵母菌株的分子学鉴定第47-49页
   ·小结第49-51页
5 重组酵母菌株木糖发酵性能的研究第51-61页
   ·引言第51页
   ·材料与方法第51-53页
     ·酵母菌株第51页
     ·重组酵母菌株液体发酵第51-52页
     ·好氧发酵第52页
     ·兼气发酵第52页
     ·厌氧发酵第52页
     ·酵母兼气分批发酵第52页
     ·发酵液分析第52页
     ·发酵液的高效液相色谱(HPLC)分析第52-53页
   ·结果与讨论第53-58页
     ·重组酵母菌株的好氧发酵性能第53-54页
     ·重组酵母菌株的兼气发酵性能第54-55页
     ·重组酵母菌株的厌氧发酵性能第55-56页
     ·重组酵母兼气条件下分批发酵第56-57页
     ·酵母菌木糖发酵碳元素物料衡算第57-58页
   ·重组酵母菌株的木糖代谢性能评价与分析第58-59页
   ·小结第59-61页
6 结论第61-62页
参考文献第62-66页
附页:X3序列侧序图谱第66-70页
详细摘要第70-72页

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