摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-32页 |
1. 海水养殖鱼类的细菌性病害 | 第12-14页 |
2. 海洋弧菌密度感应系统 | 第14-20页 |
·费氏弧菌 | 第14-16页 |
·哈维氏弧菌 | 第16-17页 |
·霍乱弧菌 | 第17-18页 |
·鳗弧菌 | 第18-19页 |
·创伤弧菌 | 第19-20页 |
·副溶血弧菌 | 第20页 |
3. 密度感应系统的干扰及应用 | 第20-25页 |
·抑制信号分子的生物合成 | 第20-21页 |
·密度感应系统拮抗剂的应用 | 第21-22页 |
·AHL 介导的密度感应的拮抗剂 | 第21-22页 |
·AI-2 介导的密度感应体系的拮抗剂 | 第22页 |
·密度感应分子的化学失活 | 第22-23页 |
·密度感应分子的酶失活和生物降解 | 第23-25页 |
·细菌的AHL 内酯酶 | 第23-24页 |
·细菌的AHL 乙酰酶 | 第24-25页 |
4. 破坏密度感应系统策略的局限性及展望 | 第25-26页 |
5. 哈维氏弧菌生物学特性及致病机制 | 第26-29页 |
·哈维氏弧菌(=鲨鱼弧菌)的生物学特性 | 第26-27页 |
·哈维氏弧菌(=鲨鱼弧菌)的流行病学 | 第27-28页 |
·哈维氏弧菌的致病制 | 第28-29页 |
6. 本论文研究的目的和意义 | 第29-32页 |
第二章 哈维氏弧菌的密度感应系统研究 | 第32-53页 |
1. 材料与方法 | 第34-41页 |
·菌种 | 第34-35页 |
·培养基 | 第35-36页 |
·试剂和仪器 | 第36页 |
·观察哈维氏弧菌发光菌株的发光强度和发光时间 | 第36-37页 |
·哈维氏弧菌信号分子对发光现象的促进作用实验 | 第37页 |
·哈维氏弧菌密度感应系统突变菌株中胞外酶活性检测 | 第37-38页 |
·明胶酶活性 | 第37页 |
·脂酶活性 | 第37页 |
·卵磷脂酶活性 | 第37页 |
·溶血素活性 | 第37-38页 |
·哈维氏弧菌V18645的luxS基因的克隆鉴定 | 第38-40页 |
·引物设计及合成 | 第38页 |
·luxS 基因的PCR 扩增 | 第38页 |
·扩增产物的检测及纯化 | 第38页 |
·pUC/luxS 克隆质粒的构建 | 第38-39页 |
·感受态细胞的制备 | 第39页 |
·pUC/luxS 克隆质粒的转化 | 第39-40页 |
·pUC/luxS 克隆质粒的鉴定 | 第40页 |
·哈维氏弧菌V18645的luxS基因序列分析 | 第40页 |
·luxS基因核苷酸进化分析 | 第40-41页 |
2. 结果与分析 | 第41-49页 |
·哈维氏弧菌发光菌株的发光情况 | 第41-43页 |
·哈维氏弧菌发光菌株在固体平板培养基上培养时发光情况 | 第41页 |
·哈维氏弧菌发光菌株在固体斜面培养基上培养时发光情况 | 第41-42页 |
·哈维氏弧菌发光菌株在液体培养基上培养时发光情况 | 第42-43页 |
·哈维氏弧菌信号分子对发光现象的促进作用 | 第43页 |
·哈维氏弧菌密度感应系统突变菌株中胞外酶活性检测 | 第43-45页 |
·明胶酶活性 | 第44页 |
·脂酶活性 | 第44-45页 |
·卵磷脂酶活性 | 第45页 |
·溶血素活性 | 第45页 |
·哈维氏弧菌V18645的luxS基因的克隆与鉴定 | 第45-46页 |
·luxS基因的PCR扩增 | 第45-46页 |
·luxS基因克隆质粒的构建和鉴定 | 第46页 |
·哈维氏弧菌V18645的luxS基因序列分析 | 第46-47页 |
·luxS基因核苷酸进化树分析 | 第47-49页 |
3. 讨论 | 第49-53页 |
第三章 哈维氏弧菌密度感应系统的信号干扰研究 | 第53-68页 |
1. 材料与方法 | 第55-59页 |
·菌种和质粒载体 | 第55-56页 |
·培养基 | 第56页 |
·试剂和仪器 | 第56页 |
·苏云金芽胞杆菌aiiA基因表达载体的构建 | 第56-57页 |
·苏云金芽胞杆菌aiiA基因在大肠杆菌中的诱导表达及AiiA蛋白粗体物的制备 | 第57-58页 |
·重组菌 BL21(DE3)/pET-24d(+)/aiiA对紫色色杆菌ATCC 12472的产色素情况的影响 | 第58页 |
·重组菌 BL21(DE3)/pET-24d(+)/aiiA对哈维氏弧菌发光强度影响的测定 | 第58-59页 |
2. 结果与分析 | 第59-65页 |
·克隆载体的构建及鉴定 | 第59页 |
·aiiA基因表达载体的构建及鉴定 | 第59-60页 |
·重组菌BL21(DE3)/pET-24d(+)/aiiA的诱导表达以及表达条件的优化 | 第60-61页 |
·重组菌 BL21(DE3)/pET-24d(+)/aiiA对紫色色杆菌ATCC 12472产色素情况的影响 | 第61-62页 |
·重组菌 BL21(DE3)/pET-24d(+)/aiiA对哈维氏弧菌发光强度的影响 | 第62-65页 |
3. 讨论 | 第65-68页 |
小结 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-78页 |
附录Ⅰ | 第78-80页 |
附录Ⅱ | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |