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农杆菌介导苹果转FT基因及枣树早期芽cDNA文库构建的研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-14页
第一部分 农杆菌介导的苹果转FT基因研究第14-30页
 1 引言第14-21页
   ·根癌农杆菌介导苹果遗传转化研究进展第14-17页
     ·苹果离体再生的影响因素第14-15页
     ·苹果遗传转化的影响因素第15-17页
       ·基因型第15页
       ·外植体生理状态第15页
       ·农杆菌菌株类型及致毒性第15页
       ·Vir区基因诱导的活化第15-16页
       ·菌液浓度,浸染时间及共培养时间第16页
       ·抗生素及选择压第16页
       ·预培养和延迟选择第16-17页
       ·外源基因在苹果中的遗传表达第17页
   ·植物开花相关基因的研究第17-20页
     ·光周期途径第17-18页
     ·春化途径第18-19页
     ·自主途径第19页
     ·赤霉素途径第19-20页
   ·本研究工作的背景和意义第20-21页
 2 材料与方法第21-25页
   ·农杆菌介导苹果转化体系的确立第21-22页
     ·试验材料第21页
     ·菌株第21页
     ·试剂第21页
     ·农杆菌培养第21页
     ·试验方法第21-22页
   ·转基因植株的PCR扩增鉴定第22-25页
     ·植物总DNA的提取(CTAB法)第22-23页
     ·农杆菌质粒DNA的提取第23-24页
     ·PCR扩增第24-25页
 3 结果与分析第25-28页
   ·不同抗生素对离体叶片再生频率的影响第25-27页
     ·卡那霉素对苹果再生频率的影响第25-26页
     ·头孢噻肟钠、头孢唑林钠、羧苄青霉素对苹果再生频率的影响第26-27页
   ·抗生素对农杆菌的抑制作用第27页
   ·农杆菌的转化结果第27-28页
 4 讨论第28-30页
第二部分 枣花芽形成期cDNA文库的构建与分析第30-48页
 1 引言第30-35页
   ·cDNA文库的载体系统第30-31页
   ·cDNA文库构建方法进展第31-35页
     ·差减cDNA文库第32页
     ·标准化cDNA文库第32页
     ·标准化cDNA差减文库第32-33页
     ·cDNA PCR文库与RACE cDNA文库第33-34页
     ·cDNA文库的质量第34页
     ·cDNA文库的应用第34页
     ·筛选与性状相关的重要基因第34-35页
     ·结合芯片技术对生物体基因的时空表达进行研究第35页
     ·为EST的开发提供材料第35页
   ·本研究工作的背景和意义第35页
 2 材料与方法第35-41页
   ·植物材料第35-36页
   ·试剂第36页
   ·实验方法第36-41页
     ·植物总RNA的提取第36页
     ·mRNA的纯化第36-37页
     ·cDNA第一链的合成第37页
     ·cDNA第二链的合成第37-38页
     ·加入Sal I Adapter第38页
     ·Not I酶解第38-39页
     ·柱层析第39页
     ·cDNA与质粒载体相连第39页
     ·转入宿主菌第39页
     ·插入片段大小的检测第39-41页
 3 结果与分析第41-46页
   ·枣花芽总RNA的提取与mRNA的纯化第41页
   ·cDNA文库插入片段大小的检测与分析第41-45页
   ·cDNA文库插入片段的EST功能分析第45-46页
 4 讨论第46-48页
参考文献第48-54页
附图第54-57页
发表文章及个人简历和联系方式第57-58页
致谢第58-59页

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