摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第一部分 农杆菌介导的苹果转FT基因研究 | 第14-30页 |
1 引言 | 第14-21页 |
·根癌农杆菌介导苹果遗传转化研究进展 | 第14-17页 |
·苹果离体再生的影响因素 | 第14-15页 |
·苹果遗传转化的影响因素 | 第15-17页 |
·基因型 | 第15页 |
·外植体生理状态 | 第15页 |
·农杆菌菌株类型及致毒性 | 第15页 |
·Vir区基因诱导的活化 | 第15-16页 |
·菌液浓度,浸染时间及共培养时间 | 第16页 |
·抗生素及选择压 | 第16页 |
·预培养和延迟选择 | 第16-17页 |
·外源基因在苹果中的遗传表达 | 第17页 |
·植物开花相关基因的研究 | 第17-20页 |
·光周期途径 | 第17-18页 |
·春化途径 | 第18-19页 |
·自主途径 | 第19页 |
·赤霉素途径 | 第19-20页 |
·本研究工作的背景和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-25页 |
·农杆菌介导苹果转化体系的确立 | 第21-22页 |
·试验材料 | 第21页 |
·菌株 | 第21页 |
·试剂 | 第21页 |
·农杆菌培养 | 第21页 |
·试验方法 | 第21-22页 |
·转基因植株的PCR扩增鉴定 | 第22-25页 |
·植物总DNA的提取(CTAB法) | 第22-23页 |
·农杆菌质粒DNA的提取 | 第23-24页 |
·PCR扩增 | 第24-25页 |
3 结果与分析 | 第25-28页 |
·不同抗生素对离体叶片再生频率的影响 | 第25-27页 |
·卡那霉素对苹果再生频率的影响 | 第25-26页 |
·头孢噻肟钠、头孢唑林钠、羧苄青霉素对苹果再生频率的影响 | 第26-27页 |
·抗生素对农杆菌的抑制作用 | 第27页 |
·农杆菌的转化结果 | 第27-28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
第二部分 枣花芽形成期cDNA文库的构建与分析 | 第30-48页 |
1 引言 | 第30-35页 |
·cDNA文库的载体系统 | 第30-31页 |
·cDNA文库构建方法进展 | 第31-35页 |
·差减cDNA文库 | 第32页 |
·标准化cDNA文库 | 第32页 |
·标准化cDNA差减文库 | 第32-33页 |
·cDNA PCR文库与RACE cDNA文库 | 第33-34页 |
·cDNA文库的质量 | 第34页 |
·cDNA文库的应用 | 第34页 |
·筛选与性状相关的重要基因 | 第34-35页 |
·结合芯片技术对生物体基因的时空表达进行研究 | 第35页 |
·为EST的开发提供材料 | 第35页 |
·本研究工作的背景和意义 | 第35页 |
2 材料与方法 | 第35-41页 |
·植物材料 | 第35-36页 |
·试剂 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
·植物总RNA的提取 | 第36页 |
·mRNA的纯化 | 第36-37页 |
·cDNA第一链的合成 | 第37页 |
·cDNA第二链的合成 | 第37-38页 |
·加入Sal I Adapter | 第38页 |
·Not I酶解 | 第38-39页 |
·柱层析 | 第39页 |
·cDNA与质粒载体相连 | 第39页 |
·转入宿主菌 | 第39页 |
·插入片段大小的检测 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-46页 |
·枣花芽总RNA的提取与mRNA的纯化 | 第41页 |
·cDNA文库插入片段大小的检测与分析 | 第41-45页 |
·cDNA文库插入片段的EST功能分析 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
附图 | 第54-57页 |
发表文章及个人简历和联系方式 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |