桑树低温诱导基因Wap25的克隆及植株转化技术研究
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-13页 |
| 缩写符号说明 | 第13-15页 |
| 第一章 植物对低温逆境的生理反应机制 | 第15-30页 |
| 1 低温逆境下的细胞膜相变 | 第15-16页 |
| 2 低温逆境中生理代谢的变化 | 第16-19页 |
| ·碳水化合物 | 第17页 |
| ·可溶性蛋白 | 第17-18页 |
| ·渗透调节物质 | 第18-19页 |
| ·细胞抗氧化系统 | 第19页 |
| 3 ABA变化与低温逆境应答 | 第19-21页 |
| 4 低温逆境信号及其转导 | 第21-24页 |
| 5 植物低温诱导蛋白 | 第24-28页 |
| ·抗冻蛋白(APF) | 第24-26页 |
| ·胚胎发育后期富集蛋白(LEA) | 第26-28页 |
| ·LEA蛋白的种类、结构特征及功能 | 第26-27页 |
| ·LEA蛋白的细胞定位 | 第27-28页 |
| ·LEA基因的表达及调控 | 第28页 |
| 6 利用转基因技术提高植物抗冻性的新思路 | 第28-30页 |
| 第二章 根癌农杆菌致病基因及生物学功能的研究进展 | 第30-44页 |
| 1 根癌农杆菌及其毒性基因 | 第31-33页 |
| 2 毒性基因的研究策略 | 第33-34页 |
| 3 农杆菌在受体细胞表面的附着 | 第34-36页 |
| 4 T链形成和转移的分子生物学 | 第36-40页 |
| ·T单链的形成 | 第36-37页 |
| ·T链的包装 | 第37页 |
| ·T链的转移 | 第37-38页 |
| ·T-DNA的整合 | 第38-39页 |
| ·T-DNA的表达 | 第39-40页 |
| 5 推测与展望 | 第40-41页 |
| 6 课题研究背景 | 第41-42页 |
| 7 研究内容及技术路线 | 第42-44页 |
| 第三章 低温诱导基因的克隆及序列分析 | 第44-67页 |
| 1 材料与方法 | 第45-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-63页 |
| ·实验材料的筛选 | 第51-52页 |
| ·幼茎总RNA的制备 | 第52页 |
| ·基因编码区的获得及序列分析 | 第52-55页 |
| ·基因产物的生物信息学分析 | 第55-63页 |
| 3 讨论 | 第63-67页 |
| 第四章 低温诱导基因的原核表达 | 第67-77页 |
| 1 材料与方法 | 第67-74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-76页 |
| ·原核表达载体的构建及鉴定 | 第74-75页 |
| ·表达产物的Western检测 | 第75-76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 第五章 低温诱导基因转化矮牵牛的研究 | 第77-96页 |
| 1 材料与方法 | 第77-84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-94页 |
| ·RT700与pGEM连接 | 第84-85页 |
| ·Wap25基因植物表达载体的构建策略 | 第85-86页 |
| ·植物表达载体pIG121/Wap5的鉴定 | 第86-87页 |
| ·pIG121/Wap5对农杆菌的转化 | 第87-88页 |
| ·矮牵牛叶盘生长的抗生素敏感性试验 | 第88-90页 |
| ·Wap25基因转矮牵牛叶盘 | 第90-92页 |
| ·转基因矮牵牛再生植株的PCR鉴定 | 第92-93页 |
| ·转化株PCR-Southern鉴定 | 第93-94页 |
| 3 讨论 | 第94-96页 |
| 第六章 植株转化技术在桑树转基因中的应用研究 | 第96-106页 |
| 1 材料与方法 | 第96-99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-104页 |
| ·接种后桑苗的形态 | 第99-100页 |
| ·转化株中菌体残留检测 | 第100-101页 |
| ·PCR产物Southern检测 | 第101-102页 |
| ·Southern杂交鉴定 | 第102-103页 |
| ·GUS基因表达的检测 | 第103-104页 |
| 3 讨论 | 第104-106页 |
| 第七章 小结与展望 | 第106-109页 |
| 1 主要小结及创新 | 第106-107页 |
| 2 有待进一步开展的工作 | 第107页 |
| 3 展望 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第119-120页 |
| 附录 | 第120-124页 |
