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激活蛋白诱导的水稻叶片SSH文库的构建

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-5页
目录第5-8页
第一章 文献综述第8-20页
 1 新型微生物蛋白农药第8-11页
   ·过敏蛋白Harpin第8-9页
   ·诱导素elicitin第9-10页
   ·植物激活蛋白Activator第10-11页
 2 分离差异表达基因的方法第11-19页
   ·mDNA差异显示(DD)技术第11-12页
   ·代表性差异分析法(RDA)第12-13页
   ·抑制差减杂交技术(SSH)第13-16页
   ·表达序列标签(EST)技术第16-17页
   ·基因表达序列分析(SAGE)第17-19页
   ·cDNA微阵列技术(cDNA microarray)第19页
 3 研究的目的和意义第19-20页
第二章 材料与方法第20-30页
 1 材料准备第20-21页
   ·主要试剂和仪器第20页
     ·主要试剂第20页
     ·主要仪器第20页
   ·激活蛋白的获得第20-21页
     ·稻瘟菌体的获得第20-21页
     ·蛋白粗提液的制备第21页
   ·水稻样品的获得第21页
 2 试验方法第21-30页
   ·总RNA提取与mRNA的分离纯化第21-22页
     ·总RNA的提取第21-22页
     ·mRNA的纯化第22页
   ·SSH文库构建第22-28页
     ·一链cDNA合成第22-23页
     ·二链cDNA的合成第23页
     ·Rsa Ⅰ酶解第23-24页
     ·接头连接第24-25页
     ·第一轮杂交第25页
     ·第二轮杂交第25页
     ·PCR扩增第25-26页
     ·PCR产物的连接与克隆第26-28页
   ·地高辛杂交检测第28-29页
     ·尼龙膜的制备第28页
     ·探针的标记第28页
     ·探针标记效率的检测第28页
     ·分子杂交第28页
     ·免疫学检测第28-29页
   ·阳性克隆测序及结果分析第29-30页
第三章 结果与分析第30-37页
 1 材料准备第30-32页
   ·激活蛋白的粗提与纯化第30页
   ·水稻的培养第30-31页
   ·总RNA与mRNA质量检测第31-32页
 2 SSH文库构建第32-34页
   ·接头效率的检测第32页
   ·差减杂交PCR产物分析第32-33页
   ·插入片段检测第33页
   ·地高辛杂交检测第33-34页
 3 阳性克隆测序结果第34页
 4 序列对比分析第34-37页
第四章 讨论第37-40页
 1 植物激活蛋白第37页
 2 SSH cDNA文库在水稻基因差异表达研究中的优越性第37-38页
 3激活蛋白诱导的水稻差异表达基因第38-40页
结论第40-41页
附录A 溶液配方第41-42页
附录B 中英文专业名词及英文缩写第42-43页
参考文献第43-49页
致谢第49-50页
作者简介第50页

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