中文摘要 | 第1-14页 |
英文摘要 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-38页 |
一、蛋白质组学研究技术 | 第16-27页 |
(一) 样品制备 | 第17-20页 |
1、分步提取 | 第18页 |
2、特殊植物材料蛋白质样品制备 | 第18-19页 |
3、膜结合和疏水蛋白的提取 | 第19页 |
4、细胞器蛋白的提取 | 第19页 |
5、连续分步溶解 | 第19-20页 |
(二) 蛋白质分离技术 | 第20-23页 |
1、双向电泳 | 第20-21页 |
2、多维液相色谱 | 第21-22页 |
3、金属亲和迁移凝胶电泳 | 第22页 |
4、亲和色谱 | 第22页 |
5、固定化金属离子亲和色谱 | 第22-23页 |
(三) 蛋白质分析鉴定技术 | 第23-25页 |
1、质谱技术 | 第23-24页 |
2、蛋白质的N-端和C-端氨基酸序列分析 | 第24-25页 |
(四) 蛋白质组学中的生物信息学 | 第25-27页 |
(五) 蛋白质相互作用研究技术 | 第27页 |
二、蛋白质组学研究进展 | 第27-36页 |
(一) 蛋白质组学在遗传研究中的应用 | 第27-29页 |
1、多样性分析 | 第27-28页 |
2、突变体分析 | 第28-29页 |
(二) 蛋白质组学在发育生物学研究中的应用 | 第29-31页 |
1、不同组织/器官蛋白质组学研究 | 第29-30页 |
2、细胞器质蛋白质组学研究 | 第30-31页 |
(三) 植物非生物胁迫的蛋白质组学研究 | 第31-33页 |
1、冷害 | 第31-32页 |
2、干旱 | 第32页 |
3、高温 | 第32页 |
4、氧胁迫 | 第32页 |
5、盐胁迫 | 第32页 |
6、机械损伤 | 第32-33页 |
7、缺/低氧胁迫 | 第33页 |
8、臭氧胁迫 | 第33页 |
9、重金属离子胁迫 | 第33页 |
(四) 植物生长调控的蛋白质组学研究 | 第33页 |
(五) 植物与其它生物相互作用的蛋白质组学研究 | 第33-34页 |
1、真菌-植物相互作用 | 第33-34页 |
2、寄生虫-植物相互作用 | 第34页 |
3、病毒-植物相互作用 | 第34页 |
4、根瘤菌-植物相互作用 | 第34页 |
(六) 蛋白质组学在医学研究中的应用 | 第34-36页 |
(七) 蛋白质组学在药物开发研究中的应用 | 第36页 |
三、蛋白质组学研究的发展趋势和重要意义 | 第36-38页 |
第二章 F.graminearum侵染后穗部表达蛋白的差异分析 | 第38-53页 |
引言 | 第38-40页 |
材料与方法 | 第40-43页 |
一、实验材料 | 第40页 |
二、仪器和试剂 | 第40页 |
三、接种和取样 | 第40页 |
四、蛋白质样品制备 | 第40-41页 |
五、蛋白质浓度测定 | 第41页 |
六、等电聚焦 | 第41页 |
七、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第41-42页 |
八、银染 | 第42页 |
九、图像扫描与分析 | 第42页 |
十、胶内酶解 | 第42-43页 |
十一、肽混合物的MALDI-TOFMS分析 | 第43页 |
十二、数据库检索 | 第43页 |
十三、染色体定位 | 第43页 |
结果与分析 | 第43-51页 |
一、F.graminearum侵染后不同时段小麦穗部蛋白的2-DE分析 | 第43-45页 |
二、差异蛋白质点的定量分析 | 第45-46页 |
三、差异蛋白质点的质谱分析与鉴定 | 第46-49页 |
四、差异表达蛋白基因的染色体定位 | 第49-51页 |
讨论 | 第51-53页 |
第三章 小麦钙网联蛋白基因的克隆与功能分析 | 第53-76页 |
引言 | 第53-55页 |
材料与方法 | 第55-60页 |
一、实验材料 | 第55页 |
二、基因组DNA及总RNA的提取 | 第55页 |
三、RT-PCR和半定量RT-PCR | 第55-56页 |
四、小麦钙网联蛋白的生物信息学分析 | 第56页 |
五、PA诱导的细胞程序性死亡及Trypan染色 | 第56页 |
六、PCR及PCR产物的克隆 | 第56-57页 |
七、TaCRT在大肠杆菌中的表达、纯化、酶切及SDS-PAGE | 第57-58页 |
八、Ca~(2+)浓度测定及钙网联蛋白Ca~(2+)结合容量的测定 | 第58页 |
九、过量表达载体的构建和转化 | 第58-59页 |
十、农杆菌介导法烟草的遗传转化 | 第59页 |
十一、转基因烟草的PCR及GUS检测验证 | 第59-60页 |
结果与分析 | 第60-74页 |
一、小麦钙网联蛋白基因全长cDNA的克隆 | 第60-64页 |
二、钙网联蛋白在不同物种中的保守性分析 | 第64-66页 |
三、TaCRT的表达分析 | 第66-67页 |
四、TaCRT在细胞程序性死亡过程中的表达分析 | 第67-68页 |
五、TaCRT上游序列的分离 | 第68-70页 |
六、TaCRT的纯化及其Ca~(2+)结合能力 | 第70-71页 |
七、TaCRT的过量表达提高了烟草对花叶病毒抗性 | 第71-74页 |
讨论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-95页 |
全文总结 | 第95-96页 |
全文创新点 | 第96-97页 |
发表文章情况 | 第97-104页 |
致谢 | 第104页 |