人类GMP还原酶2(GMPR2)的结构与功能研究
| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略词 | 第9-10页 |
| 第一章 前言GMP还原酶(GMPR)研究概述 | 第10-15页 |
| ·GMPR的分布模式 | 第10页 |
| ·GMPR的两种同工酶 | 第10-12页 |
| ·GMPR的生理学功能 | 第12-13页 |
| ·GMPR与IMPDH | 第13-15页 |
| 第二章 人类GMPR2的三维结构研究 | 第15-48页 |
| Ⅰ.材料和方法 | 第15-23页 |
| 1.材料与试剂 | 第15-19页 |
| 2.方法 | 第19-23页 |
| Ⅱ.实验结果 | 第23-40页 |
| 1.GMPR2蛋白的表达与纯化 | 第23页 |
| 2.GMPR2与GMP复合物晶体的制备及数据收集 | 第23-25页 |
| 3.GMPR2与GMP复合物的晶体结构解析 | 第25-40页 |
| ·晶体结构的解析及修正过程 | 第25页 |
| ·最终模型的质量分析 | 第25-30页 |
| ·GMPR2与GMP复合物的总体结构 | 第30-31页 |
| ·GMPR2复合物的单体结构 | 第31-33页 |
| ·底物结合与构像变化 | 第33-35页 |
| ·GMPR2与GMPR1及IMPDH家族结构比较 | 第35-40页 |
| Ⅲ.讨论 | 第40-48页 |
| 1.GMPR家族晶体结构研究 | 第41-43页 |
| 2.人类GMPR2的保守位点和催化机制探讨 | 第43-46页 |
| 3.GMPR在嘌呤代谢进化中的地位探讨 | 第46页 |
| 4.本章基本结论 | 第46-48页 |
| 第二章 人类GMPR2的生物学功能研究 | 第48-80页 |
| Ⅰ.材料与方法 | 第48-59页 |
| 1.材料与试剂 | 第48-50页 |
| 2.实验方法 | 第50-59页 |
| Ⅱ.实验结果 | 第59-74页 |
| 1.GMPR2结构与生化关系研究 | 第59-61页 |
| 2.GMPR2的表达谱分析 | 第61-65页 |
| ·MTC Panel分析 | 第61页 |
| ·细胞系RT-PCR分析 | 第61-62页 |
| ·基因芯片杂交分析 | 第62-63页 |
| ·基因芯片聚类分析 | 第63-65页 |
| 3.GMPR2的亚细胞定位分析 | 第65-67页 |
| 4.GMPR在真核细胞中的表达 | 第67页 |
| 5.GMPR2与细胞周期的关系 | 第67-71页 |
| 6.GMPR2与细胞凋亡的关系 | 第71-74页 |
| Ⅲ.讨论 | 第74-80页 |
| 1.GMPR2的关键氨基酸位点分析 | 第74页 |
| 2.GMPR2的相关功能研究 | 第74-77页 |
| ·GMPR2在GMPR家族中所处的地位 | 第74-75页 |
| ·GMPR2的组织表达谱分析 | 第75页 |
| ·GMPR2的基因芯片聚类分析 | 第75-77页 |
| ·GMPR2的亚细胞定位分析 | 第77页 |
| 3.GMPR2与细胞周期和细胞凋亡的关系 | 第77-79页 |
| 4.本章基本结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 综述:核苷酸代谢相关酶及疾病研究 | 第84-112页 |
| 附录 | 第112-116页 |
| 1.人GMPR2蛋白及核苷酸序列 | 第112-113页 |
| 2.博士期间发表的文章 | 第113-115页 |
| 3.致谢 | 第115-116页 |