| 中文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-24页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的病原学特性 | 第11-16页 |
| ·病原形态 | 第11页 |
| ·生长特性 | 第11-12页 |
| ·生化特性 | 第12页 |
| ·生物型与血清型 | 第12页 |
| ·毒力因子及致病性 | 第12-16页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的流行病学 | 第16-17页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎的诊断 | 第17-20页 |
| ·临床诊断和病理变化 | 第17-18页 |
| ·病原学诊断 | 第18页 |
| ·血清学方法诊断 | 第18-20页 |
| ·分子生物学方法诊断 | 第20页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎疫苗的研究进展 | 第20-24页 |
| ·传统的灭活疫苗 | 第21页 |
| ·弱毒疫苗 | 第21-22页 |
| ·亚单位疫苗 | 第22-23页 |
| ·基因疫苗 | 第23页 |
| ·口服疫苗 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第24页 |
| 2 材料 | 第24-27页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·病料来源 | 第24页 |
| ·细胞、菌株、载体及实验动物 | 第24-25页 |
| ·主要培养基 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要溶液配制 | 第25-27页 |
| ·细菌培养用液 | 第25-26页 |
| ·细胞培养用液 | 第26-27页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE所用试剂 | 第27页 |
| 3 实验方法 | 第27-42页 |
| ·APP的分离鉴定 | 第27-29页 |
| ·细菌的分离 | 第27-28页 |
| ·微生物学鉴定 | 第28页 |
| ·PCR鉴定 | 第28-29页 |
| ·血清型鉴定 | 第29页 |
| ·1型APP核酸疫苗的初步研究 | 第29-42页 |
| ·APP基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| ·引物的设计与合成 | 第30-31页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
| ·Apx Ⅰ A基因片段和OmIA基因的克隆 | 第32-35页 |
| ·pIRES-Apx Ⅰ A-OmIA真核表达质粒的构建 | 第35-37页 |
| ·重组质粒pIRES-Apx Ⅰ A-OmIA的体外表达 | 第37-39页 |
| ·重组质粒免疫原性的初步研究 | 第39-42页 |
| 4 结果 | 第42-54页 |
| ·细菌的分离鉴定 | 第42-44页 |
| ·细菌的形态 | 第42页 |
| ·生化试验结果 | 第42-43页 |
| ·药敏试验结果 | 第43页 |
| ·血清型鉴定 | 第43页 |
| ·PCR鉴定 | 第43-44页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第44-48页 |
| ·Apx Ⅰ A N端基因片段的扩增 | 第44页 |
| ·OmlA基因的扩增 | 第44-45页 |
| ·pMD-Apx Ⅰ A重组质粒的构建 | 第45页 |
| ·pMD-OmlA重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| ·pIRES-Apx Ⅰ A重组质粒的构建 | 第46-47页 |
| ·pIRES-Apx Ⅰ A-OmlA真核表达载体的构建 | 第47-48页 |
| ·真核表达载体pIRES-Apx Ⅰ A-OmlA的体外表达 | 第48-49页 |
| ·pIRES-Apx Ⅰ A-OmlA转染BHK-21细胞 | 第48页 |
| ·体外表达产物的SDS-PAGE检测 | 第48-49页 |
| ·重组质粒pIRES-Apx Ⅰ A-OmlA对小鼠的免疫原性 | 第49-54页 |
| ·免疫小鼠血清中IgG_1、lgG_(2a)抗体的检测结果 | 第49-50页 |
| ·免疫小鼠血清中IL-4、IFN-γ含量的检测结果 | 第50-52页 |
| ·免疫小鼠T淋巴细胞亚群的检测结果 | 第52-53页 |
| ·免疫小鼠脾淋巴细胞增值试验结果 | 第53-54页 |
| 5 讨论 | 第54-59页 |
| ·APP的分离与鉴定 | 第54-55页 |
| ·目的基因的选择 | 第55-56页 |
| ·真核表达载体的选择与构建 | 第56页 |
| ·重组质粒的体外表达 | 第56-57页 |
| ·核酸疫苗对小鼠的免疫原性 | 第57-59页 |
| ·体液免疫 | 第57-58页 |
| ·细胞免疫 | 第58-59页 |
| 6 小结 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
