中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-9页 |
1 绪论 | 第9-26页 |
1.1 2型糖尿病药物治疗及新药筛选 | 第9-11页 |
1.1.1 2型糖尿病药物治疗现状 | 第9-11页 |
1.1.2 2型糖尿病药物筛选 | 第11页 |
1.2 高通量药物筛选技术 | 第11-16页 |
1.2.1 药物筛选模型 | 第12-14页 |
1.2.2 高通量药物筛选库 | 第14-16页 |
1.3 G蛋白偶联受体与高通量筛选 | 第16-25页 |
1.3.1 G蛋白偶联受体是重要的药靶 | 第16-17页 |
1.3.2 G蛋白偶联受体的高通量筛选 | 第17-24页 |
1.3.3 筛选方法的比较 | 第24-25页 |
1.4 本课题的研究意义、目的及内容 | 第25页 |
1.5 本课题研究主要技术路线 | 第25-26页 |
2 胰升血糖素样肽-1及其受体与2型糖尿病的治疗 | 第26-31页 |
2.1 胰升血糖素样肽-1(GLP-1) | 第26-27页 |
2.1.1 GLP-1的生化特征 | 第26页 |
2.1.2 GLP-1的生理功能 | 第26-27页 |
2.2 GLP-1受体 | 第27-30页 |
2.2.1 GLP-1受体的结构 | 第27-29页 |
2.2.2 GLP-1受体的组织分布及其信号传递 | 第29-30页 |
2.3 GLP-1及其受体与2型糖尿病的治疗 | 第30-31页 |
3 中药提取物库的建立 | 第31-37页 |
3.1 实验仪器与试剂 | 第31页 |
3.2 中药的选择 | 第31-32页 |
3.3 中药提取物库的建立 | 第32-36页 |
3.3.1 中药溶剂提取法 | 第32-35页 |
3.3.2 提取方法的确定 | 第35页 |
3.3.3 提取流程 | 第35-36页 |
3.4 本章小结 | 第36-37页 |
4 GLP-1受体激动剂高通量筛选模型的建立 | 第37-47页 |
4.1 GLP-1受体激动剂筛选模型的设计 | 第37-39页 |
4.1.1 基本设计原理 | 第37-38页 |
4.1.2 响应元件及启动子的选择 | 第38页 |
4.1.3 报告基因的选择 | 第38-39页 |
4.2 GLP-1受体激动剂高通量筛选模型的建立 | 第39-47页 |
4.2.1 材料 | 第39-40页 |
4.2.2 受体质粒的构建 | 第40-42页 |
4.2.3 报告基因质粒的构建 | 第42页 |
4.2.4 GLP-1R细胞模型中细胞株的选择 | 第42-44页 |
4.2.5 GLP-1R稳定细胞株的建立 | 第44-46页 |
4.2.6 阴性细胞株的建立 | 第46-47页 |
5 筛选条件的优化及筛选模型的评估 | 第47-53页 |
5.1 筛选条件的优化 | 第47-50页 |
5.1.1 细胞接种密度 | 第47-48页 |
5.1.2 荧光素酶的表达时间 | 第48页 |
5.1.3 Bright-Glo~(TM)试剂的用量 | 第48-49页 |
5.1.4 DMSO的用量 | 第49-50页 |
5.2 筛选模型的评估 | 第50-53页 |
5.2.1 Z'因子分析 | 第50-51页 |
5.2.2 GLP-1R细胞株内源干扰性的检测 | 第51-53页 |
6 GLP-1受体激动剂的高通量筛选 | 第53-56页 |
6.1 材料与仪器 | 第53页 |
6.1.1 材料 | 第53页 |
6.1.2 仪器 | 第53页 |
6.2 实验方法 | 第53页 |
6.3 结果与讨论 | 第53-56页 |
7 结论与展望 | 第56-57页 |
7.1 主要结论 | 第56页 |
7.2 后续工作及展望 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-63页 |
附录 | 第63-64页 |