水稻齿叶矮缩病毒基因组S8和S10片段的原核表达及抗血清制备
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| ·水稻齿叶矮缩病毒研究概况 | 第9-15页 |
| ·RRSV的生物学特性 | 第9-11页 |
| ·病害流行学 | 第11页 |
| ·病毒粒体特征和细胞病理学 | 第11-12页 |
| ·RRSV的基因组结构及组成和功能 | 第12-15页 |
| ·本项目研究的目的及意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·病毒分离物 | 第17页 |
| ·载体和菌株 | 第17页 |
| ·试剂及酶类 | 第17-18页 |
| ·试验动物 | 第18页 |
| ·供试仪器及其它 | 第18-20页 |
| ·实验方法 | 第20-29页 |
| ·RRSV dsRNA和病叶总RNA的提取 | 第20-21页 |
| ·RNA的分析和定量 | 第21页 |
| ·RRSV基因组S8和S10片段编码区的扩增 | 第21-23页 |
| ·克隆操作 | 第23-25页 |
| ·RRSV基因组S10和S8片段的原核表达 | 第25-26页 |
| ·RRSV P10融合蛋白抗血清的制备 | 第26-28页 |
| ·生物信息学分析 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-45页 |
| ·RRSV-dsRNA的提取及纯化 | 第29页 |
| ·RRSV基因组S10片段的克隆及序列分析 | 第29-31页 |
| ·S10片段基因克隆 | 第29-30页 |
| ·序列测定及分析 | 第30-31页 |
| ·基因组S8片段的克隆 | 第31-33页 |
| ·S10片段基因克隆 | 第31-32页 |
| ·序列测定及分析 | 第32-33页 |
| ·外层衣壳蛋白系统进化分析 | 第33-36页 |
| ·RRSV基因S10和S8片段的原核表达 | 第36-42页 |
| ·RRSV S10基因的原核表达 | 第36-39页 |
| ·RRSV S8基因的原核表达 | 第39-42页 |
| ·RRSV基因组S10片段融合蛋白抗血清的制备 | 第42-45页 |
| ·融合蛋白抗血清效价的测定 | 第42页 |
| ·Western-Blot分析 | 第42-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·水稻齿叶矮缩病毒的起源 | 第45页 |
| ·RRSV S10和S8基因克隆和原核表达 | 第45-46页 |
| ·RRSV S10融合蛋白的抗血清制备 | 第46-48页 |
| 小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录1 构建系统进化树所用的病毒及其序列号和属名 | 第54-55页 |
| 附录2 主要试剂与缓冲液的配制 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
