农杆菌介导的水稻高效转化系统的建立和水稻转EPSP基因的初步研究
| 摘要 | 第1-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第12-29页 |
| ·转基因技术在水稻育种上的应用 | 第13-17页 |
| ·转基因技术在水稻抗除草剂育种中的研究进展 | 第13-14页 |
| ·转基因技术在水稻抗病育种中的研究进展 | 第14-15页 |
| ·抗病毒病害基因 | 第14页 |
| ·抗细菌病害基因工程 | 第14-15页 |
| ·抗真菌病害基因工程 | 第15页 |
| ·转基因技术在水稻抗虫育种中的研究进展 | 第15-16页 |
| ·苏云金芽孢杆菌 | 第15页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因 | 第15-16页 |
| ·植物凝集素基因 | 第16页 |
| ·淀粉酶抑制剂基因 | 第16页 |
| ·转基因技术在水稻抗逆育种中的研究进展 | 第16-17页 |
| ·在品质改良育种中的研究进展 | 第17页 |
| ·转基因方法的研究进展 | 第17-21页 |
| ·基因枪法 | 第17-18页 |
| ·PEG法 | 第18页 |
| ·电激法 | 第18-19页 |
| ·花粉管通道法 | 第19页 |
| ·根癌农杆菌介导转化法 | 第19-21页 |
| ·选择标记基因的研究 | 第21-23页 |
| ·水稻中常用的标记基因 | 第21-22页 |
| ·标记基因的安全性和去除 | 第22-23页 |
| ·标记基因的剔除 | 第22-23页 |
| ·位点专一性重组系统 | 第22页 |
| ·共转化系统 | 第22-23页 |
| ·染色体内同源重组诱导缺失 | 第23页 |
| ·安全标记基因 | 第23页 |
| ·化合物解毒酶基因 | 第23页 |
| ·糖类代谢酶基因 | 第23页 |
| ·外源基因的表达 | 第23-24页 |
| ·植物转基因沉默 | 第24-25页 |
| ·转基因沉默的机理 | 第24页 |
| ·转录水平的基因沉默(TGS) | 第24-25页 |
| ·转录后水平的基因沉默(PTGS) | 第25页 |
| ·阈值模型 | 第25页 |
| ·异常RNA模型 | 第25页 |
| ·分子间(内)碱基配对模型 | 第25页 |
| ·转基因的安全性 | 第25-27页 |
| ·转基因植物的环境安全性 | 第26-27页 |
| ·转基因植物的食品安全性 | 第27页 |
| ·展望 | 第27-28页 |
| ·本实验的立题思想 | 第28-29页 |
| Ⅱ 材料与方法 | 第29-39页 |
| ·水稻转EPSP基因的初步研究 | 第29-37页 |
| ·实验材料 | 第29-30页 |
| ·供试品种 | 第29页 |
| ·质粒及菌种 | 第29页 |
| ·常用激素、抗生素及其工作浓度 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-37页 |
| ·培养基成分 | 第30-31页 |
| ·操作步骤 | 第31-32页 |
| ·选择压的确定 | 第32页 |
| ·质粒DNA的繁殖 | 第32-35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第32-33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第33页 |
| ·质粒的提取 | 第33-35页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第35-37页 |
| ·植物DNA抽提方法 | 第36页 |
| ·转基因水稻植株中EPSP基因的PC检测 | 第36-37页 |
| ·农杆菌介导的水稻高效转化系统的建立 | 第37-39页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-39页 |
| ·实验方法 | 第39页 |
| Ⅲ 结果和分析 | 第39-44页 |
| 第一部分: 水稻转EPSP基因的初步研究 | 第39-40页 |
| ·转化体的筛选及再生 | 第39-40页 |
| ·筛选浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·卡那霉素对于愈伤组织的筛选 | 第40页 |
| ·抗性愈伤的分化 | 第40页 |
| ·转化植株的分子生物学检测结果 | 第40页 |
| 第二部分: 农杆菌介导的水稻高效转化系统的建立 | 第40-44页 |
| ·幼胚与成熟胚诱导率的比较 | 第40-41页 |
| ·不同品种成熟胚在不同培养基上诱导情况 | 第41页 |
| ·不同激素种类和浓度对愈伤组织诱导的影响 | 第41-42页 |
| ·不同接种方式对愈伤诱导及分化的影响 | 第42页 |
| ·脯氨酸对于愈伤生长的影响 | 第42-43页 |
| ·干燥处理对愈伤组织分化的影响 | 第43-44页 |
| Ⅳ 讨论 | 第44-48页 |
| ·转EPSP基因水稻的初步研究 | 第44-47页 |
| ·转化受体的选择 | 第44页 |
| ·2,4-D对于愈伤组织诱导的影响 | 第44页 |
| ·共培养时间对于转化的影响 | 第44-45页 |
| ·菌液重悬对于转化效率的影响 | 第45页 |
| ·乙酰丁香酮的加入量对转化效率的影响 | 第45页 |
| ·抑菌方法对于水稻愈伤组织的影响 | 第45-46页 |
| ·卡那抗性作为水稻遗传转化标记基因的不足 | 第46页 |
| ·抗除草剂的安全性问题 | 第46-47页 |
| ·农杆菌介导的水稻高效转化系统的建立 | 第47-48页 |
| ·幼胚与成熟胚诱导率的比较 | 第47页 |
| ·不同品种成熟胚在不同培养基上诱导情况 | 第47页 |
| ·不同激素种类和浓度对愈伤组织诱导的影响 | 第47页 |
| ·不同接种方式对愈伤诱导及分化的影响 | 第47-48页 |
| ·脯氨酸对于愈伤生长的影响 | 第48页 |
| ·干燥处理对愈伤组织分化的影响 | 第48页 |
| Ⅴ 参考文献 | 第48-56页 |
| 图版及说明 | 第56-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
