| 目录 | 第1-5页 |
| 缩写词及专用名词 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-10页 |
| 综述 | 第10-26页 |
| 1 植物的雄性不育 | 第10-19页 |
| ·植物雄性不育类型及发生时期 | 第10-13页 |
| ·细胞核雄性不育(GMS) | 第13页 |
| ·核质互作雄性不育(CMS) | 第13-18页 |
| ·雄性不育系和保持系的选育方法 | 第18页 |
| ·雄性不育基因表达和环境条件关系 | 第18-19页 |
| 2 核质互作雄性不育的遗传机制 | 第19-20页 |
| ·经典遗传学研究 | 第19-20页 |
| ·恢复基因的研究进展 | 第20页 |
| 3 植物雄性不育基因工程 | 第20-21页 |
| 4 mRNA差异显示技术及应用 | 第21-26页 |
| ·mRNA差异显示技术原理 | 第21页 |
| ·mRNA差异显示实验步骤 | 第21-22页 |
| ·mRNA差异显示技术存在的问题及解决的方法 | 第22-23页 |
| ·mRNA差异显示技术的应用与展望 | 第23-26页 |
| 材料和方法 | 第26-38页 |
| 1 实验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第26-27页 |
| 2 实验方法 | 第27-38页 |
| ·小麦苗期总RNA的提取和鉴定 | 第27-28页 |
| ·反转录 | 第28-29页 |
| ·PCR扩增 | 第29页 |
| ·电泳 | 第29-30页 |
| ·银染程序 | 第30页 |
| ·cDNA差异片段的回收及二次扩增 | 第30页 |
| ·Reverse Northern鉴定 | 第30-32页 |
| ·cDNA差异片段克隆测序及同源性比较 | 第32-35页 |
| ·淀粉磷酸化酶的克隆 | 第35-38页 |
| 结果与分析 | 第38-51页 |
| 1 小麦幼苗的培养及取材时期 | 第38-39页 |
| 2 植物材料总RNA的提取及检测 | 第39页 |
| 3 mRNA差异显示银染检测 | 第39-40页 |
| 4 cDNA差异片段回收及二次扩增 | 第40-41页 |
| 5 Reverse Northern杂交检测 | 第41-42页 |
| 6 cDNA差异片段的克隆 | 第42-43页 |
| 7 重组质粒的鉴定 | 第43-44页 |
| ·质粒的提取 | 第43页 |
| ·重组质粒的菌液PCR鉴定 | 第43-44页 |
| 8 测序 | 第44-47页 |
| 9 测序结果在GeneBank的查询比对 | 第47-50页 |
| 10 淀粉磷酸化酶的PCR鉴定 | 第50-51页 |
| 讨论 | 第51-57页 |
| 1 mRNA差异显示相关技术 | 第51-53页 |
| ·植物材料RNA的提取 | 第51页 |
| ·模板RNA投入量对PCR扩增效果的影响 | 第51页 |
| ·PCR退火温度 | 第51页 |
| ·银染条件的优化 | 第51-52页 |
| ·Reverse Northern杂交 | 第52-53页 |
| 2 差异片段的克隆 | 第53-54页 |
| ·差异片段的回收 | 第53页 |
| ·差异片段的纯化、连接与转化 | 第53-54页 |
| 3 降低差异显示PCR假阳性和提高重复性的几种策略 | 第54-55页 |
| ·高质量的总RNA是降低假阳性率的前提 | 第54页 |
| ·选择最适的反转录和PCR退火温度 | 第54页 |
| ·设立重复对照降低假阳性率 | 第54-55页 |
| 4 肌动蛋白与育性的关系 | 第55页 |
| 5 淀粉磷酸化酶与小麦细胞质雄性不育 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-70页 |
| 附录 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |