中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
前言 | 第8-18页 |
1 recA基因 | 第8页 |
2 λ噬菌体裂解循环和溶原途径的调控 | 第8-9页 |
3 λ原噬菌体的紫外诱导 | 第9-10页 |
4 RecA蛋白和CI阻遏蛋白作用的分子机制 | 第10-12页 |
5 应用BacterIoMatch~(TM)双杂交系统研究RecA与λCI的相互作用 | 第12-14页 |
6 自由基及其对生物的损伤 | 第14-15页 |
7 耐辐射奇球菌和katB基因 | 第15-17页 |
8 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
材料与方法 | 第18-27页 |
1 材料 | 第18-21页 |
·菌株及质粒 | 第18页 |
·培养基 | 第18-19页 |
·酶及生化试剂 | 第19页 |
·PCR扩增引物 | 第19页 |
·相关试剂 | 第19-20页 |
·丙烯酰胺凝胶的制备 | 第20-21页 |
·主要仪器 | 第21页 |
2 方法 | 第21-27页 |
·大肠杆菌染色体DNA的制备 | 第21页 |
·耐辐射奇球菌染色体DNA的制备 | 第21-22页 |
·recA和katB基因的克隆 | 第22-24页 |
·PCR扩增反应体系 | 第22页 |
·PCR反应条件 | 第22页 |
·感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
·含recA基因不同重组质粒的构建 | 第23页 |
·含katB基因重组质粒的构建 | 第23页 |
·重组质粒的转化 | 第23页 |
·转化子的筛选与鉴定 | 第23-24页 |
·蛋白质SDS-PAGE电泳 | 第24页 |
·蛋白质样品的处理 | 第24页 |
·电泳及染色 | 第24页 |
·重组子在λ溶原菌细胞内的生物学作用 | 第24-25页 |
·紫外诱导条件 | 第25页 |
·非诱导条件 | 第25页 |
·培养液中噬菌体效价的测定 | 第25页 |
·细菌双杂交系统检测RecA和λCI的相互作用 | 第25-27页 |
·转化 | 第25-26页 |
·HO-OX系统对RecA-λCI作用的影响 | 第26-27页 |
结果 | 第27-39页 |
1 recA基因在λ溶原菌细胞内的生物学作用 | 第27-32页 |
·recd基因的PCR扩增 | 第27页 |
·含recA基因的重组质粒的克隆与鉴定 | 第27-29页 |
·蛋白质SDS-PAGE结果 | 第29-30页 |
·recA基因在λ溶原菌细胞内的生物学作用 | 第30-32页 |
·在非诱导条件下 | 第30-32页 |
·在诱导条件下 | 第32页 |
2 katB基因对于λ溶原菌自发裂解的抑制作用 | 第32-34页 |
·katB基因的PCR扩增 | 第32页 |
·含katB基因的重组质粒的克隆与鉴定 | 第32-33页 |
·katB基因对于λ溶原细胞自发裂解的抑制作用 | 第33-34页 |
3 细菌双杂交系统(BTHS)检测RecA和λCI的相互作用 | 第34-39页 |
·pTRG-R2的构建 | 第34-35页 |
·检测RecA-λCI的相互作用 | 第35-39页 |
讨论 | 第39-44页 |
1 RecA在溶原细胞中的酶活性 | 第39-42页 |
2 CatB对λ溶原菌自发裂解的抑制作用 | 第42页 |
3 双杂交系统检测RecA和λCI的相互作用 | 第42-43页 |
4 今后的研究方向 | 第43-44页 |
主要参考文献 | 第44-48页 |
在读期间所发表的论文目录 | 第48-49页 |
致谢 | 第49页 |