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recA基因、katB基因的克隆及其在λ溶原菌中生物学功能的研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-8页
前言第8-18页
 1 recA基因第8页
 2 λ噬菌体裂解循环和溶原途径的调控第8-9页
 3 λ原噬菌体的紫外诱导第9-10页
 4 RecA蛋白和CI阻遏蛋白作用的分子机制第10-12页
 5 应用BacterIoMatch~(TM)双杂交系统研究RecA与λCI的相互作用第12-14页
 6 自由基及其对生物的损伤第14-15页
 7 耐辐射奇球菌和katB基因第15-17页
 8 本研究的目的与意义第17-18页
材料与方法第18-27页
 1 材料第18-21页
   ·菌株及质粒第18页
   ·培养基第18-19页
   ·酶及生化试剂第19页
   ·PCR扩增引物第19页
   ·相关试剂第19-20页
   ·丙烯酰胺凝胶的制备第20-21页
   ·主要仪器第21页
 2 方法第21-27页
   ·大肠杆菌染色体DNA的制备第21页
   ·耐辐射奇球菌染色体DNA的制备第21-22页
   ·recA和katB基因的克隆第22-24页
     ·PCR扩增反应体系第22页
     ·PCR反应条件第22页
     ·感受态细胞的制备第22-23页
     ·含recA基因不同重组质粒的构建第23页
     ·含katB基因重组质粒的构建第23页
     ·重组质粒的转化第23页
     ·转化子的筛选与鉴定第23-24页
   ·蛋白质SDS-PAGE电泳第24页
     ·蛋白质样品的处理第24页
     ·电泳及染色第24页
   ·重组子在λ溶原菌细胞内的生物学作用第24-25页
     ·紫外诱导条件第25页
     ·非诱导条件第25页
     ·培养液中噬菌体效价的测定第25页
   ·细菌双杂交系统检测RecA和λCI的相互作用第25-27页
     ·转化第25-26页
     ·HO-OX系统对RecA-λCI作用的影响第26-27页
结果第27-39页
 1 recA基因在λ溶原菌细胞内的生物学作用第27-32页
   ·recd基因的PCR扩增第27页
   ·含recA基因的重组质粒的克隆与鉴定第27-29页
   ·蛋白质SDS-PAGE结果第29-30页
   ·recA基因在λ溶原菌细胞内的生物学作用第30-32页
     ·在非诱导条件下第30-32页
     ·在诱导条件下第32页
 2 katB基因对于λ溶原菌自发裂解的抑制作用第32-34页
   ·katB基因的PCR扩增第32页
   ·含katB基因的重组质粒的克隆与鉴定第32-33页
   ·katB基因对于λ溶原细胞自发裂解的抑制作用第33-34页
 3 细菌双杂交系统(BTHS)检测RecA和λCI的相互作用第34-39页
   ·pTRG-R2的构建第34-35页
   ·检测RecA-λCI的相互作用第35-39页
讨论第39-44页
 1 RecA在溶原细胞中的酶活性第39-42页
 2 CatB对λ溶原菌自发裂解的抑制作用第42页
 3 双杂交系统检测RecA和λCI的相互作用第42-43页
 4 今后的研究方向第43-44页
主要参考文献第44-48页
在读期间所发表的论文目录第48-49页
致谢第49页

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