| 致 谢 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 适合于基因打靶的细胞 | 第11-15页 |
| ·ES细胞 | 第11-12页 |
| ·体细胞 | 第12-15页 |
| 2 乳蛋白基因座打靶位点 | 第15-17页 |
| ·β-酪蛋白基因位点 | 第16页 |
| ·αs1-酪蛋白基因位点 | 第16页 |
| ·β-乳球蛋白(BLG)基因位点 | 第16页 |
| ·α-乳清蛋白基因位点 | 第16-17页 |
| 3 基因打靶与核移植技术的结合 | 第17-21页 |
| ·基因打靶 | 第17页 |
| ·核移植技术生产乳腺生物反应器的研究进展 | 第17-18页 |
| ·基因打靶与体细胞核移植技术相结合的优势 | 第18-19页 |
| ·体细胞基因打靶与核移植技术难点 | 第19-20页 |
| ·体细胞基因打靶与核移植应用前景 | 第20-21页 |
| 实验部分 | 第21-45页 |
| 实验一 牛Β-酪蛋白抗体的制备 | 第21-27页 |
| 1 材料与方法 | 第21-24页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·试剂与仪器 | 第21页 |
| ·主要溶液的配制 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| 2 结果 | 第24-25页 |
| ·抗血清效价的检测 | 第24页 |
| ·抗体纯度检测 | 第24-25页 |
| ·抗体特异性检测 | 第25页 |
| 3 讨论 | 第25-27页 |
| ·免疫效果 | 第25-26页 |
| ·辛酸-硫酸铵法提纯抗血清 | 第26页 |
| ·免疫印迹反应中封闭液的选择 | 第26-27页 |
| 实验二 两种牛乳Β-酪蛋白ELISA检测方法的建立及比较 | 第27-34页 |
| 1 材料与方法 | 第27-30页 |
| ·试剂与仪器 | 第27-28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·酶标兔抗牛β-CN抗体的制备 | 第28-29页 |
| ·ELISA方法检测牛β-酪蛋白的实验设计 | 第29页 |
| ·双抗夹心ELISA方法检测牛β-酪蛋白 | 第29页 |
| ·间接竞争ELISA方法检测牛β-酪蛋白 | 第29-30页 |
| 2 结果 | 第30-32页 |
| ·酶标IgG抗体检测 | 第30页 |
| ·双抗夹心ELISA法检测酪蛋白结果 | 第30-31页 |
| ·间接竞争ELISA方法检测酪蛋白结果 | 第31页 |
| ·标准曲线的确定 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| ·酶标板的选择 | 第32页 |
| ·不同纯度抗体的比较 | 第32页 |
| ·封闭液的选择 | 第32-33页 |
| ·双抗夹心ELISA方法与间接竞争ELISA方法检测结果比较 | 第33-34页 |
| 实验三 牛乳腺上皮细胞中Β-酪蛋白的检测 | 第34-45页 |
| 1 材料与方法 | 第35-39页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| 2 结果 | 第39-43页 |
| ·牛初乳中分离的乳腺上皮细胞中β-酪蛋白表达的检测 | 第39-41页 |
| ·体外培养牛乳腺上皮细胞免疫组化鉴定结果 | 第41页 |
| ·激素诱导后体外培养乳腺上皮细胞中β-酪蛋白表达的检测结果 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| ·牛乳中分离出的乳腺上皮细胞中β-酪蛋白表达的检测 | 第43页 |
| ·体外培养牛乳腺上皮细胞的形态和生长变化规律 | 第43页 |
| ·免疫组化鉴定体外培养乳腺上皮细胞的上皮特性 | 第43页 |
| ·体外培养牛乳腺上皮细胞中β-酪蛋白的检测结果分析 | 第43-45页 |
| 结 论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
