| 摘要 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 一. 前言 | 第9-13页 |
| 二. 材料与方法 | 第13-32页 |
| 1 菌种筛选 | 第13-20页 |
| ·培养基 | 第13-14页 |
| ·样品 | 第14-15页 |
| ·具有抗肿瘤活性海洋放线菌及细菌、真菌 | 第15-18页 |
| ·各种样品预处理方法 | 第15-16页 |
| ·稀释涂布 | 第16页 |
| ·挑菌发酵 | 第16页 |
| ·菌种纯化 | 第16页 |
| ·菌种保藏 | 第16页 |
| ·测活 | 第16-18页 |
| ·细胞培养 | 第16-17页 |
| ·测活 | 第17-18页 |
| ·第五批样品的分离筛选 | 第18-19页 |
| ·具有抗肿瘤活性海洋放线菌的分离筛选 | 第18-19页 |
| ·具有抗肿瘤活性海洋细菌、真菌的分离筛选 | 第19页 |
| ·复筛 | 第19页 |
| ·第六批样品的分离筛选 | 第19-20页 |
| ·具有抗肿瘤活性海洋放线菌的分离筛选 | 第19-20页 |
| ·具有抗肿瘤活性海洋细菌、真菌的分离筛选 | 第20页 |
| ·复筛 | 第20页 |
| 2 有抗肿瘤活性放线菌的16S rDNA多样性分析 | 第20-32页 |
| ·供试菌种、质粒、宿主菌 | 第20-21页 |
| ·引物以及主要试剂 | 第21页 |
| ·放线菌基因组DNA的提取 | 第21-23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| ·16S rDNA的PCR扩增 | 第23-25页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第25页 |
| ·酶切 | 第25-26页 |
| ·16S rDNA的克隆与测序 | 第26-30页 |
| ·16S rDNA目的片段的回收 | 第26-27页 |
| ·PCR回收产物与T载体连接 | 第27-28页 |
| ·Ecoli.DH_(5a)感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·碱裂解法少量提取质粒 | 第29页 |
| ·重组质粒的纯化 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·测序 | 第30-31页 |
| ·序列的校对、整理及分析 | 第31-32页 |
| 三. 结果与分析 | 第32-49页 |
| 1 具有抗肿瘤活性海洋放线菌的分离筛选 | 第32-41页 |
| ·样品来源对放线菌分离筛选的影响 | 第32-36页 |
| ·分离方法对放线菌分离筛选的影响 | 第36-38页 |
| ·培养基对放线菌分离筛选的影响 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| ·具有抗肿瘤活性海洋细菌、真菌的分离筛选 | 第40-41页 |
| 2 30株有抗肿瘤活性海洋放线菌的16S rDNA多样性分析 | 第41-49页 |
| ·供试菌种 | 第42页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第42-44页 |
| ·16S rDNA的PCR扩增 | 第44-45页 |
| ·酶切图谱分析 | 第45页 |
| ·聚类分析 | 第45-47页 |
| ·菌株050642、060524、06038616S rDNA序列测定与系统发育分析 | 第47-49页 |
| ·连接、转化与验证 | 第47-48页 |
| ·16S rDNA序列测定与系统发育分析 | 第48-49页 |
| 四. 讨论 | 第49-53页 |
| 五. 结论 | 第53-54页 |
| 文献综述 | 第54-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录1 | 第77-82页 |
| 附录2 | 第82-83页 |
| 附录3 | 第83-87页 |
| 附录4 | 第87-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
