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L-异亮氨酸产生菌的选育及其发酵条件的研究

第一章 绪论第1-25页
   ·引言第11页
   ·L-异亮氨酸结构及理化性质第11页
   ·L-异亮氨酸的用途第11-12页
     ·食品方面第12页
     ·医药方面第12页
   ·L-异亮氨酸生产方法及生产概况第12-13页
     ·L-异亮氨酸生产方法第12-13页
       ·添加前体物发酵法第12页
       ·直接发酵法第12-13页
     ·L-异亮氨酸生产概况第13页
   ·L-异亮氨酸的生物合成途径及调节机制第13-16页
     ·L-异亮氨酸的生物合成途径第13-14页
     ·L-异亮氨酸生物合成的调节机制第14-15页
     ·L-异亮氨酸产生菌应具备的生化特征第15-16页
   ·L-异亮氨酸产生菌常规育种思路及育种实例第16-19页
     ·L-异亮氨酸产生菌常规育种思路第16-18页
       ·切断或减弱支路代谢第16页
       ·解除菌体自身的反馈调节第16-17页
       ·增加前体物的合成第17-18页
       ·切断进一步代谢第18页
     ·L-异亮氨酸产生菌育种实例第18-19页
   ·代谢工程与L-异亮氨酸生产菌的选育第19-22页
     ·代谢工程对于氨基酸工程菌构建的具体思路第20页
     ·基于代谢工程思路构建L-异亮氨酸高产菌第20-22页
   ·L-异亮氨酸发酵条件控制第22-24页
     ·营养条件的控制第23页
       ·碳源和氮源的影响第23页
       ·无机盐的影响第23页
       ·生长因子的影响第23页
     ·环境条件的控制第23-24页
       ·温度、pH的影响第23页
       ·溶氧的影响第23-24页
   ·菌种保藏第24页
   ·论文立题背景及主要研究内容第24-25页
第二章 L-异亮氨酸的测定方法第25-30页
   ·引言第25页
   ·实验材料第25-26页
     ·主要仪器第25页
     ·主要试剂第25页
     ·主要溶液第25-26页
       ·层析展开液第25页
       ·显色液第25页
       ·洗脱液第25-26页
       ·L-异亮氨酸标准液第26页
   ·实验方法第26页
     ·发酵液预处理第26页
     ·发酵液L-异亮氨酸的定性测定第26页
     ·纸层析-色斑洗脱比色法定量测定L-异亮氨酸第26页
   ·结果与讨论第26-29页
     ·显色剂的选择第27页
     ·洗脱液颜色稳定性的研究第27-28页
     ·L-异亮氨酸标准曲线的绘制第28-29页
     ·高速氨基酸分析仪测定L-异亮氨酸第29页
   ·本章小结第29-30页
第三章 L-异亮氨酸产生菌的诱变育种第30-43页
   ·引言第30页
   ·材料与方法第30-35页
     ·菌种第30页
     ·仪器及试剂第30-31页
       ·主要仪器第30-31页
       ·主要试剂第31页
     ·培养基第31-33页
     ·相关溶液第33页
     ·实验方法第33-35页
       ·菌体生长曲线的测定第33页
       ·诱变方法第33-34页
       ·营养缺陷型突变株的筛选第34-35页
       ·抗性突变株的检出第35页
       ·初筛、复筛方法第35页
       ·分析方法第35页
   ·结果与讨论第35-42页
     ·出发菌株的选择及遗传标记鉴定第35-37页
     ·菌体生长曲线第37页
     ·DES诱变条件的选择第37-38页
     ·氨基酸缺陷型菌株的选育第38页
     ·抗性菌株的选育第38-41页
       ·AEC抗性突变株的筛选第39页
       ·α-AB抗性突变株筛选第39-41页
     ·WYJ1遗传稳定性测定第41页
     ·诱变育种机理分析第41-42页
   ·本章小结第42-43页
第四章 L-异亮氨酸摇瓶分批发酵条件的研究第43-58页
   ·引言第43页
   ·实验材料和方法第43-45页
     ·实验材料第43-44页
       ·菌种第43页
       ·仪器及试剂第43页
       ·培养基第43-44页
     ·实验方法第44-45页
       ·菌种活化第44页
       ·种子培养第44页
       ·发酵第44页
       ·种子生长曲线的测定第44页
       ·分析测定方法第44-45页
   ·结果与讨论第45-56页
     ·培养基优化方法第45页
     ·种子培养基的优化第45-48页
       ·不同碳氮源组合的对比第45-46页
       ·均匀设计优化种子培养基第46-48页
     ·种子培养条件的确定第48-50页
       ·种子培养基初始pH值的影响第48-49页
       ·种子培养温度的影响第49页
       ·种子培养基装液量试验第49-50页
       ·种子培养时间的确定第50页
     ·发酵培养基优化第50-54页
       ·不同碳源对L-异亮氨酸发酵的影响第50-51页
       ·不同氮源对L-异亮氨酸发酵的影响第51页
       ·发酵培养基的优化第51-54页
     ·发酵条件的优化第54-56页
       ·摇瓶发酵pH控制方式的影响第54页
       ·接种量对L-异亮氨酸发酵的影响第54-55页
       ·溶氧对产酸的影响第55-56页
     ·发酵过程曲线的绘制第56页
   ·本章小结第56-58页
第五章 5L罐分批发酵过程的代谢分析第58-71页
   ·引言第58页
   ·材料和方法第58-60页
     ·材料第58-60页
       ·菌种第59页
       ·主要仪器第59页
       ·主要试剂第59页
       ·培养基第59页
       ·主要溶液第59-60页
     ·方法第60页
       ·种子培养方法第60页
       ·5L罐发酵培养方法第60页
       ·分析方法第60页
   ·结果与讨论第60-69页
     ·基于物流平衡的代谢流分析(MFA)及其理论基础第60-62页
     ·L-异亮氨酸产生菌黄色短杆菌WYJ1代谢网络及代谢流平衡模型的建立第62-64页
       ·代谢网络的建立第62-63页
       ·代谢流平衡模型的建立第63-64页
     ·L-异亮氨酸最大理论转化率的计算第64页
     ·L-异亮氨酸发酵过程动力学曲线及全程代谢分析第64-66页
     ·L-异亮氨酸发酵中后期的代谢流分析第66-69页
       ·L-异亮氨酸发酵中后期代谢流分布第66-67页
       ·估算代谢流与理想代谢流的比较分析第67-68页
       ·应用线性规划所得极端代谢流分布的比较第68-69页
   ·本章小结第69-70页
   ·附录第70-71页
第六章 全文总结与展望第71-74页
   ·全文总结第71-72页
   ·本论文创新点第72-73页
   ·展望第73-74页
参考文献第74-77页
读研究生期间发表论文情况第77-78页
致谢第78页

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