英文缩略词表 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-17页 |
第一部分: T细胞表达FasL与急性移植物抗宿主病相关性研究 | 第17-29页 |
一、 材料和方法 | 第17-20页 |
(一) 研究对象 | 第17-18页 |
(二) 试剂及仪器设备 | 第18-19页 |
(三) 实验方法 | 第19-20页 |
二、 结果 | 第20-25页 |
(一) T淋巴细胞及其亚群的FasL表达 | 第20-24页 |
(二) 移植前后T淋巴细胞亚群变化 | 第24-25页 |
三、 讨论 | 第25-26页 |
四、 小结 | 第26-27页 |
五、 参考文献 | 第27-29页 |
第二部分: 基因重组FasAD多肽的研制 | 第29-66页 |
一、 材料和方法 | 第29-66页 |
(一) 试剂 | 第29-33页 |
(二) 材料与设备 | 第33-34页 |
(三) 实验方法 | 第34-44页 |
1. Fas死亡信号激发域cDNA的克隆 | 第34-39页 |
2. 构建重组表达载体FasAD-pTYB及鉴定 | 第39-41页 |
3. 重组蛋白的诱导表达及鉴定 | 第41-42页 |
4. FasAD多肽的纯化 | 第42-44页 |
(四) 结果 | 第44-57页 |
1. 技术路线流程图 | 第44-45页 |
2. 半巢式RT-PCR扩增Fas死亡信号激发域 | 第45页 |
3. 重组克隆载体FasAD-pGEM-T的构建及鉴定 | 第45-48页 |
4. 重组表达载体FasAD-pTYB的构建及鉴定 | 第48页 |
5. 重组蛋白的诱导表达 | 第48-53页 |
6. FasAD的纯化 | 第53-55页 |
7. Western-blot鉴定重组蛋白及纯化产物的抗原性 | 第55-57页 |
(五) 讨论 | 第57-61页 |
(六) 小结 | 第61-63页 |
(七) 参考文献 | 第63-66页 |
第三部分: 基因重组FasAD多肽的体外生物活性鉴定 | 第66-80页 |
一、 材料和方法 | 第66-69页 |
(一) 试剂及仪器设备 | 第66-67页 |
(二) 实验方法 | 第67-69页 |
二、 结果 | 第69-74页 |
(一) rhFasL及FasL+淋巴细胞诱导的Jurkat细胞凋亡 | 第69-70页 |
(二) FasAD多肽对rhFasL诱导的Jurkat细胞凋亡的影响 | 第70-72页 |
(三) FasAD多肽对FasL+淋巴细胞诱导Jurkat细胞凋亡的影响 | 第72-74页 |
三、 讨论 | 第74-76页 |
四、 小结 | 第76-77页 |
五、 参考文献 | 第77-80页 |
第四部分: 全文总结 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
附录: 在学期间发表论文 | 第83-100页 |
1. Fas/FasL在移植免疫中的作用(综述) | 第83-90页 |
2. 监测FasL表达评估异基因造血干细胞移植后T细胞免疫功能状态 | 第90-95页 |
3. 急性白血病表达凋亡因子Fas配基的研究 | 第95-100页 |
4. Expression of Fas Ligand in Acute Leukemia | 第100页 |