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十字花科黑腐病菌RNA聚合酶ω亚基的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
第一章 前言第12-24页
   ·植物病原细菌的致病机理第12-13页
   ·十字花科黑腐病菌简介第13-14页
   ·十字花科黑腐病菌的致病生化因子第14-17页
     ·胞外多糖(EPS)第14-15页
     ·脂多糖(LPS)第15页
     ·胞外酶第15-16页
     ·三型分泌效应物第16-17页
   ·细菌RNA聚合酶Omega(ω)亚基的研究进展第17-23页
     ·ω亚基的发现和其亚基地位的确定第17-19页
     ·ω亚基在RNA聚合酶中的作用第19-22页
     ·ω亚基的生物学功能第22-23页
   ·本工作的目的及意义第23-24页
第二章 材料与方法第24-48页
   ·研究用的材料第24-30页
     ·菌株和质粒第24-25页
     ·抗生素和其它药剂第25-26页
     ·植物材料第26页
     ·细菌培养基第26-27页
     ·常用溶液与缓冲液第27-30页
   ·常规微生物学操作第30-36页
     ·培养条件及保存第30页
     ·突变体营养缺陷型检测第30页
     ·胞外多糖的检测第30-31页
     ·胞外蛋白酶的检测第31页
     ·胞外淀粉酶的检测第31-33页
     ·胞外纤维素酶的检测第33-34页
     ·细菌游动性的检测第34页
     ·鞭毛观察第34页
     ·细菌生物膜的检测第34-35页
     ·Xcc在培养基生长情况测定第35页
     ·GUS(β-葡糖苷酸酶)活性检测第35-36页
   ·分子操作技术第36-46页
     ·DNA分子生物学操作第36-39页
       ·质粒的提取第36-37页
       ·十字花科黑腐病菌总DNA的提取第37页
       ·DNA片段的回收第37页
       ·限制性内切酶酶切第37-38页
       ·DNA连接第38页
       ·琼脂糖凝胶电泳第38-39页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第39-41页
       ·常规PCR反应第39-40页
       ·反转录PCR第40-41页
     ·十字花科黑腐病基因组总RNA的提取第41-42页
     ·细菌的转化与结合实验第42-44页
       ·CaCl2转化法第42-43页
       ·电脉冲转化法第43-44页
       ·细菌的结合实验第44页
     ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建与互补第44-46页
       ·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建第44-46页
       ·突变体的互补第46页
   ·植株试验第46-47页
     ·植株的致病性试验第46页
     ·过敏反应第46-47页
   ·生物信息学分析方法第47-48页
第三章 结果与分析第48-73页
   ·rpoZ基因的基本特征第48页
   ·rpoZ基因的整合突变体的构建第48-51页
     ·rpoZ基因内部片段的PCR扩增第49页
     ·将内部片段克隆到载体pK18mob上第49-50页
     ·突变体的获得及验证第50-51页
   ·NK0913互补菌株的构建第51-54页
     ·rpoZ基因的PCR扩增第51-52页
     ·将rpoZ基因全基因克隆到载体pLAFR3上第52-53页
     ·互补菌株的获得第53-54页
   ·ω亚基是Xcc的生长所需要的第54-57页
   ·ω亚基是Xcc的致病力所需要的第57-58页
   ·ω亚基是Xcc的HR反应所必需的第58-59页
   ·ω亚基是Xcc的胞外酶活性和胞外多糖产生所需要的第59-65页
     ·ω亚基是Xcc胞外蛋白酶活性所需要的第59-60页
     ·ω亚基是Xcc胞外淀粉酶活性所需要的第60-61页
     ·ω亚基是Xcc胞外纤维素酶活性所需要的第61-63页
     ·ω亚基是Xcc胞外多糖产生所需要的第63-65页
   ·ω亚基是Xcc的游动性所需要的第65-66页
   ·ω亚基与在Xcc生物聚膜形成中存在作用第66-68页
   ·亚基调控hrp基因和鞭毛相关基因表达的初步研究第68-73页
     ·ω亚基调控hrp基因第68-71页
     ·ω亚基调控部分鞭毛合成相关基因第71-73页
第四章 总结和讨论第73-76页
   ·ω亚基在Xcc生长中的作用第73-74页
   ·ω亚基与Xcc胞外酶活性和胞外多糖产生相关第74页
   ·ω亚基是Xcc HR反应产生的必要因素第74页
   ·ω亚基调控Xcc的运动能力第74-75页
   ·ω亚基对Xcc致病力的影响第75-76页
参考文献第76-84页
致谢第84-85页
攻读学位期间发表论文情况第85页

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