摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-12页 |
第一章 前言 | 第12-24页 |
·植物病原细菌的致病机理 | 第12-13页 |
·十字花科黑腐病菌简介 | 第13-14页 |
·十字花科黑腐病菌的致病生化因子 | 第14-17页 |
·胞外多糖(EPS) | 第14-15页 |
·脂多糖(LPS) | 第15页 |
·胞外酶 | 第15-16页 |
·三型分泌效应物 | 第16-17页 |
·细菌RNA聚合酶Omega(ω)亚基的研究进展 | 第17-23页 |
·ω亚基的发现和其亚基地位的确定 | 第17-19页 |
·ω亚基在RNA聚合酶中的作用 | 第19-22页 |
·ω亚基的生物学功能 | 第22-23页 |
·本工作的目的及意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-48页 |
·研究用的材料 | 第24-30页 |
·菌株和质粒 | 第24-25页 |
·抗生素和其它药剂 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第26页 |
·细菌培养基 | 第26-27页 |
·常用溶液与缓冲液 | 第27-30页 |
·常规微生物学操作 | 第30-36页 |
·培养条件及保存 | 第30页 |
·突变体营养缺陷型检测 | 第30页 |
·胞外多糖的检测 | 第30-31页 |
·胞外蛋白酶的检测 | 第31页 |
·胞外淀粉酶的检测 | 第31-33页 |
·胞外纤维素酶的检测 | 第33-34页 |
·细菌游动性的检测 | 第34页 |
·鞭毛观察 | 第34页 |
·细菌生物膜的检测 | 第34-35页 |
·Xcc在培养基生长情况测定 | 第35页 |
·GUS(β-葡糖苷酸酶)活性检测 | 第35-36页 |
·分子操作技术 | 第36-46页 |
·DNA分子生物学操作 | 第36-39页 |
·质粒的提取 | 第36-37页 |
·十字花科黑腐病菌总DNA的提取 | 第37页 |
·DNA片段的回收 | 第37页 |
·限制性内切酶酶切 | 第37-38页 |
·DNA连接 | 第38页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第38-39页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第39-41页 |
·常规PCR反应 | 第39-40页 |
·反转录PCR | 第40-41页 |
·十字花科黑腐病基因组总RNA的提取 | 第41-42页 |
·细菌的转化与结合实验 | 第42-44页 |
·CaCl2转化法 | 第42-43页 |
·电脉冲转化法 | 第43-44页 |
·细菌的结合实验 | 第44页 |
·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建与互补 | 第44-46页 |
·Xcc 8004基因组上目标基因的整合突变体的构建 | 第44-46页 |
·突变体的互补 | 第46页 |
·植株试验 | 第46-47页 |
·植株的致病性试验 | 第46页 |
·过敏反应 | 第46-47页 |
·生物信息学分析方法 | 第47-48页 |
第三章 结果与分析 | 第48-73页 |
·rpoZ基因的基本特征 | 第48页 |
·rpoZ基因的整合突变体的构建 | 第48-51页 |
·rpoZ基因内部片段的PCR扩增 | 第49页 |
·将内部片段克隆到载体pK18mob上 | 第49-50页 |
·突变体的获得及验证 | 第50-51页 |
·NK0913互补菌株的构建 | 第51-54页 |
·rpoZ基因的PCR扩增 | 第51-52页 |
·将rpoZ基因全基因克隆到载体pLAFR3上 | 第52-53页 |
·互补菌株的获得 | 第53-54页 |
·ω亚基是Xcc的生长所需要的 | 第54-57页 |
·ω亚基是Xcc的致病力所需要的 | 第57-58页 |
·ω亚基是Xcc的HR反应所必需的 | 第58-59页 |
·ω亚基是Xcc的胞外酶活性和胞外多糖产生所需要的 | 第59-65页 |
·ω亚基是Xcc胞外蛋白酶活性所需要的 | 第59-60页 |
·ω亚基是Xcc胞外淀粉酶活性所需要的 | 第60-61页 |
·ω亚基是Xcc胞外纤维素酶活性所需要的 | 第61-63页 |
·ω亚基是Xcc胞外多糖产生所需要的 | 第63-65页 |
·ω亚基是Xcc的游动性所需要的 | 第65-66页 |
·ω亚基与在Xcc生物聚膜形成中存在作用 | 第66-68页 |
·亚基调控hrp基因和鞭毛相关基因表达的初步研究 | 第68-73页 |
·ω亚基调控hrp基因 | 第68-71页 |
·ω亚基调控部分鞭毛合成相关基因 | 第71-73页 |
第四章 总结和讨论 | 第73-76页 |
·ω亚基在Xcc生长中的作用 | 第73-74页 |
·ω亚基与Xcc胞外酶活性和胞外多糖产生相关 | 第74页 |
·ω亚基是Xcc HR反应产生的必要因素 | 第74页 |
·ω亚基调控Xcc的运动能力 | 第74-75页 |
·ω亚基对Xcc致病力的影响 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第85页 |