| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一部分 引言及文献综述 | 第10-19页 |
| 引言 | 第10页 |
| 1 构建乙醛生成量少的转基因酵母 | 第10-14页 |
| ·乙醛的性质及测定方法 | 第11页 |
| ·乙醛的代谢 | 第11-12页 |
| ·关于控制啤酒中乙醛含量的研究进展 | 第12-14页 |
| 2 酿酒酵母中谷胱甘肽合成酶基因的研究进展 | 第14-19页 |
| ·谷胱甘肽的性质、分布与合成 | 第14-15页 |
| ·谷胱甘肽在生物体内的功能 | 第15-16页 |
| ·谷胱甘肽在工业酵母中的应用 | 第16-17页 |
| ·谷胱甘肽代谢途径相关基因介绍及其基因工程研究进展 | 第17-19页 |
| 第二部分 研究内容 | 第19-45页 |
| 1 实验材料 | 第19-26页 |
| ·实验菌株和质粒 | 第19页 |
| ·培养基和培养条件 | 第19-21页 |
| ·酶和试剂 | 第21页 |
| ·缓冲液与试剂 | 第21-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-33页 |
| ·酵母总DNA的提取 | 第26页 |
| ·引物设计和合成 | 第26页 |
| ·质粒的限制性酶切和连接转化 | 第26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第28页 |
| ·低熔点胶琼脂糖凝胶电泳纯化回收DNA片段 | 第28页 |
| ·酵母菌完整细胞转化 | 第28-29页 |
| ·酵母转化子稳定性检测 | 第29页 |
| ·小型发酵实验中酵母菌的前期培养 | 第29页 |
| ·细胞中GSH含量测定 | 第29-30页 |
| ·发酵液中GSH含量测定 | 第30页 |
| ·乙醇脱氢酶Ⅱ活性测定 | 第30页 |
| ·蛋白质浓度测定:考马斯亮蓝法 | 第30页 |
| ·酵母凝聚性的测定 | 第30-31页 |
| ·α—N的测定 | 第31页 |
| ·二氧化碳减重 | 第31-32页 |
| ·PH值的测定 | 第32页 |
| ·发酵度的测定 | 第32页 |
| ·其他 | 第32-33页 |
| 3 结果和分析 | 第33-43页 |
| ·重组质粒的构建 | 第33-36页 |
| ·ADH2基因的PCR扩增 | 第33页 |
| ·重组质粒PYA的构建 | 第33-34页 |
| ·重组质粒PACG的构建 | 第34-36页 |
| ·工程菌的构建 | 第36-37页 |
| ·工程菌的验证 | 第37-40页 |
| ·PCR扩增验证 | 第37-39页 |
| ·谷胱甘肽含量检测 | 第39页 |
| ·铜抗性检测 | 第39-40页 |
| ·ADH 11酶活性测定 | 第40页 |
| ·遗传稳定性分析 | 第40-41页 |
| ·小型发酵实验 | 第41-43页 |
| 4 结论和讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 发表文章列表 | 第50页 |