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褪黑素对大鼠肝纤维化的保护作用及其对NF-κB活性的影响

英文缩略词表第1-11页
中文摘要第11-16页
英文摘要第16-21页
1 前言第21-24页
2 材料与方法第24-45页
   ·实验材料第24-28页
     ·实验动物第24页
     ·药物及试剂第24-26页
     ·部分试剂配制第26-28页
   ·仪器与设备第28-29页
   ·实验方法第29-45页
     ·大鼠肝纤维化模型制备第29页
       ·动物分组第29页
       ·动物模型制备第29页
       ·给药方案第29页
     ·动物处理和标本制备第29-30页
     ·大鼠血清生化检测第30页
     ·病理学检查第30页
       ·肝组织固定、切片、染色第30页
       ·肝纤维化病理分级判定标准第30页
     ·MDA 含量测定、GPx 活性测定第30-32页
       ·MDA 的测定(TBA 法)第30-31页
       ·GPX 测定第31-32页
     ·肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量测定第32-33页
     ·血清血清LN、HA、PⅢ NP含量测定第33-35页
       ·LN放射免疫分析法第33-34页
       ·HA放射免疫分析法第34页
       ·PⅢNP放射免疫分析法第34-35页
     ·免疫组化检测第35-38页
       ·NF-кB P50 免疫组化检测方法第35页
       ·NF-кB P65 免疫组化检测方法第35-36页
       ·TNF-α免疫组化检测方法第36-37页
       ·ICAM-1(CD54)免疫组化检测方法第37页
       ·免疫组化评分标准第37-38页
     ·RT-PCR检测肝组织α1(I)型前胶原mRNA的表达第38-40页
       ·总RNA提取第38-39页
       ·以RNA为模板逆转录cDNA第39页
       ·PCR扩增第39-40页
     ·EMSA检测肝组织NF-κB结合活性第40-43页
       ·胞浆和核蛋白提取第41页
       ·蛋白定量第41-42页
       ·电泳迁移率改变分析实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)第42-43页
     ·MEL 对大鼠 HSC 增殖的影响第43-45页
       ·肝星状细胞分离培养第43-44页
       ·星状细胞纯度及活力鉴定第44页
       ·肝星状细胞免疫组化鉴定第44-45页
       ·MTT 法检测MEL 和 LPS 对 HSC 增殖的影响第45页
   ·数据处理和统计学分析第45页
3 结果第45-64页
   ·MEL 对 CCl4 诱导的肝纤维化大鼠的保护作用第45-54页
     ·大鼠体重、肝指数变化第45-46页
     ·MEL 对纤维化大鼠血清ALT、AST、A/G 的影响第46-47页
     ·MEL 对纤维化大鼠血清LN、HA、PⅢNP 含量的影响第47页
     ·MTL 对纤维化大鼠肝匀浆Hyp 含量的影响第47-48页
     ·MEL 对纤维化大鼠肝组织I 型前胶原mRNA 表达的影响第48-50页
     ·MEL 对纤维化大鼠肝脏病理组织学的影响第50-53页
     ·MEL 对纤维化大鼠肝匀浆 MDA、GPx 水平的影响第53-54页
   ·MEL 对大鼠肝星状细胞增殖的影响第54-57页
     ·大鼠肝星状细胞分离和培养第54-55页
     ·大鼠肝星状细胞鉴定第55-56页
     ·MEL 对脂多糖激活的大鼠肝星状细胞增殖的影响第56-57页
   ·MEL 对纤维化大鼠肝组织 NF-кB 通路表达的影响第57-64页
     ·MEL 对纤维化大鼠肝组织的 NF-кB P50 ,NF-кB P65 ,TNF-α,ICAM-1(CD54) 表达的影响第57-62页
     ·MEL 对纤维化大鼠肝组织 NF-кB 结合活性的影响第62-64页
4 讨论第64-81页
   ·大鼠肝纤维化模型的建立第64-65页
   ·MEL 对大鼠 CCl4 所致肝纤维化的改善作用第65-69页
   ·MEL 抗氧化作用:对纤维化大鼠肝脏MDA、GPx 水平的影响第69-70页
   ·MEL 抑制脂多糖诱导的大鼠肝星状细胞增殖第70-72页
   ·MEL 对纤维化大鼠肝组织I 型前胶原mRNA 表达的抑制作用第72-73页
   ·NF-кB 通路在肝纤维化形成过程中的作用第73-79页
   ·NF-кB 与 TNF-α及ICAM-1 关系第79-80页
   ·MEL 抑制 NF-кB 活性及对肝纤维化的影响第80-81页
5 结论第81-82页
参考文献第82-99页
附录第99-101页
致谢第101-103页
NF-кB 在肝脏疾病中的作用第103-126页
 参考文献第115-126页

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