| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 插图和附表清单 | 第13-15页 |
| 縮略词 | 第15-17页 |
| 第一章 绪言 | 第17-30页 |
| ·云南红梨概述 | 第17页 |
| ·植物的花青素 | 第17-19页 |
| ·植物花青素合成机制 | 第18-19页 |
| ·bHLH转录因子 | 第19-21页 |
| ·bHLH转录因子结构特点 | 第19页 |
| ·bHLH转录因子分类 | 第19-21页 |
| ·bHLH转录因子在调节花青素合成中的进展 | 第21-23页 |
| ·拟南芥中花青素合成相关的bHLH转录因子 | 第21-22页 |
| ·葡萄中花青素合成相关的bHLH转录因子 | 第22页 |
| ·卷心菜中花青素合成相关的bHLH转录因子 | 第22页 |
| ·百合中花青素合成相关的bHLH转录因子 | 第22-23页 |
| ·牵牛花中花青素合成相关的bHLH基因 | 第23页 |
| ·苹果中花青素合成相关的bHLH转录因子 | 第23页 |
| ·bHLH转录因子调节植物形态建成和形态发育 | 第23-24页 |
| ·拟南芥中形态建成发育相关的bHLH转录因子 | 第23-24页 |
| ·水稻中形态建成发育相关的bHLH转录因子 | 第24页 |
| ·bHLH转录因子参与植物的胁迫应答 | 第24-26页 |
| ·水稻中胁迫相关的bHLH转录因子 | 第25页 |
| ·棉花中胁迫相关的bHLH转录因子 | 第25页 |
| ·拟南芥中胁迫相关的bHLH转录因子 | 第25-26页 |
| ·金属硫蛋白 | 第26-28页 |
| ·植物金属硫蛋白的种类 | 第26-27页 |
| ·植物金属硫蛋白的功能 | 第27-28页 |
| ·植物金属硫蛋白重金属解毒的功能 | 第27页 |
| ·植物金属硫蛋参与基因调控 | 第27页 |
| ·植物金属硫蛋白清除自由基功能 | 第27-28页 |
| ·植物金属硫蛋白金属离子的运输功能 | 第28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-30页 |
| 第二章 云南红梨PybHLH转录因子功能研究 | 第30-67页 |
| ·材料和方法 | 第30-33页 |
| ·植物材料 | 第30-31页 |
| ·菌株及质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·培养基和抗生素 | 第31-33页 |
| ·实验方法 | 第33-48页 |
| ·植物材料培养 | 第33-34页 |
| ·引物合成 | 第34页 |
| ·引物稀释 | 第34-35页 |
| ·拟南芥总RNA提取 | 第35页 |
| ·云南红梨外果皮总RNA提取 | 第35-36页 |
| ·植物总RNA纯化 | 第36页 |
| ·cDNA合成 | 第36页 |
| ·PCR扩增PybHLH基因 | 第36-38页 |
| ·DNA片段胶回收 | 第38页 |
| ·PCR产物PybHLH的TA克隆 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第38-39页 |
| ·细菌质粒的提取方法 | 第39-40页 |
| ·质粒酶切检测 | 第40-41页 |
| ·植物表达载体构建 | 第41-42页 |
| ·农杆菌PMP90感受态的制备与电转化 | 第42-43页 |
| ·转基因植物基因组提取及PCR检测 | 第43-44页 |
| ·拟南芥遗传转化 | 第44-45页 |
| ·云南红梨PybHLH氨基酸序列比对分析 | 第45页 |
| ·云南红梨红梨PybHLH基因在转基因拟南芥表达分析 | 第45页 |
| ·转基因拟南芥盐胁迫实验 | 第45页 |
| ·盐胁迫后转基因拟南芥中植物总蛋白提取 | 第45页 |
| ·拟南芥植株中可溶性糖和总蛋白含量测定 | 第45-46页 |
| ·植株中MDA、H_2O_2含量测定 | 第46页 |
| ·拟南芥植株中花青素含量测定 | 第46-47页 |
| ·数据统计分析 | 第47页 |
| ·Western操作方法 | 第47-48页 |
| ·实验结果 | 第48-63页 |
| ·云南红梨32号PybHLH基因植物表达载体的构建 | 第48页 |
| ·PybHLH基因TA克隆 | 第48-50页 |
| ·PybHLH基因和预测蛋白氨基酸序列 | 第50-52页 |
| ·PybHLH蛋白的氨基酸序列比对 | 第52-53页 |
| ·PybHLH基因入门克隆 | 第53-55页 |
| ·LR反应获得植物表达载体 | 第55-57页 |
| ·农杆菌检测 | 第57页 |
| ·拟南芥的转基因 | 第57-61页 |
| ·转基因拟南芥的检测 | 第58-59页 |
| ·转基因拟南芥表型观察 | 第59-60页 |
| ·盐胁迫下转基因拟南芥与野生型拟南芥表型差异 | 第60-61页 |
| ·可溶性糖和可溶性总蛋白含量测定结果 | 第61页 |
| ·MDA、H_2O_2含量测定结果 | 第61-62页 |
| ·植株中花青素含量测定结果 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-67页 |
| 第三章 PyMT1金属硫蛋白基因功能研究 | 第67-80页 |
| ·材料和方法 | 第67页 |
| ·植物材料 | 第67页 |
| ·菌株及质粒 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-70页 |
| ·引物合成 | 第67-68页 |
| ·PCR扩增PyMT基因组序列和PyMT1基因的扩增 | 第68页 |
| ·PyMT生物信息学分析 | 第68页 |
| ·原核表达载体的构建策略 | 第68-69页 |
| ·目的蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第69-70页 |
| ·PyMT1蛋白功能验证 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-78页 |
| ·云南红梨PyMT基因克隆与分析 | 第70-72页 |
| ·原核表达重组质粒的鉴定 | 第72页 |
| ·PyMT1基因和预测蛋白氨基酸序列 | 第72-73页 |
| ·PyMT1蛋白的氨基酸序列比对 | 第73-74页 |
| ·SDS-PAGE分析结果 | 第74-76页 |
| ·PyMT1的重金属耐受性试验 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| 第四章 总结及展望 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第91页 |
