| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-16页 |
| 1 前言 | 第16-39页 |
| ·转基因植物可饲疫苗的研究进展及其应用前景 | 第17-30页 |
| ·转基因植物可饲疫苗的诞生与发展 | 第17-19页 |
| ·转基因植物可饲疫苗的作用机理 | 第19-23页 |
| ·植物可饲疫苗的表达系统 | 第23-25页 |
| ·抗原在植物中的稳定性 | 第25页 |
| ·转基因植物可饲疫苗的优点 | 第25-26页 |
| ·植物疫苗研究存在的问题 | 第26-30页 |
| ·口蹄疫病毒研究进展 | 第30-33页 |
| ·口蹄疫的危害 | 第30页 |
| ·口蹄疫病毒 | 第30-32页 |
| ·口蹄疫病毒感染特性 | 第32-33页 |
| ·FMDV转基因植物疫苗国外研究现状 | 第33页 |
| ·乙型脑炎研究进展 | 第33-39页 |
| ·乙型脑炎及其危害 | 第33-35页 |
| ·乙型脑炎感染特性 | 第35-36页 |
| ·乙型脑炎疫苗研究现状 | 第36-39页 |
| 2 研究目的和意义 | 第39-40页 |
| 3 材料与方法 | 第40-59页 |
| ·实验材料 | 第40-47页 |
| ·毒株、细胞、菌种与水稻品种 | 第40页 |
| ·载体与质粒 | 第40-43页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第43-44页 |
| ·培养基与抗生素及其配制 | 第44-45页 |
| ·缓冲液 | 第45-46页 |
| ·其它溶液 | 第46-47页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·试验方法 | 第47-59页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第47页 |
| ·线性质粒DNA末端去磷酸化 | 第47页 |
| ·PCR产物或酶切产物回收与纯化 | 第47-48页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第48页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第48-49页 |
| ·连接产物的转化 | 第49页 |
| ·质粒的制备与鉴定 | 第49-52页 |
| ·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第52页 |
| ·植物总DNA的提取和Southern blot印迹分析 | 第52页 |
| ·植物总RNA的提取和Northern blot印记分析 | 第52页 |
| ·植物总可溶蛋白的提取 | 第52页 |
| ·目的蛋白的原核诱导表达 | 第52-53页 |
| ·包涵体提取、纯化与复性 | 第53页 |
| ·ELISA检测 | 第53-54页 |
| ·Western blot检测 | 第54-55页 |
| ·目的蛋白在植物总蛋白中含量的测定 | 第55-56页 |
| ·半数细胞培养物感染量(TCID50)的测定 | 第56页 |
| ·微量中和试验(固定病毒-稀释血清法) | 第56-57页 |
| ·动物实验 | 第57-58页 |
| ·小鼠小肠体外培养 | 第58页 |
| ·FMDV强毒攻击试验 | 第58页 |
| ·统计学方法 | 第58-59页 |
| 4 结果与分析 | 第59-75页 |
| ·口蹄疫病毒P1基因在水稻中的表达和免疫原性的研究 | 第59-67页 |
| ·FMDV P1基因水稻表达载体pRTCAM-P1的构建 | 第59-60页 |
| ·转P1基因水稻的获得及遗传稳定性研究 | 第60-61页 |
| ·转基因水稻中P1基因的Northern blot分析 | 第61页 |
| ·转基因水稻中P1基因的Western blot分析 | 第61-62页 |
| ·转基因水稻中P1基因的表达量分析 | 第62页 |
| ·转基因水稻遗传稳定性研究 | 第62-63页 |
| ·腹腔注射实验组小鼠的免疫水平检测 | 第63-65页 |
| ·口服实验组小鼠的免疫水平检测 | 第65-67页 |
| ·攻毒后实验小鼠血清中FMDV清除情况 | 第67页 |
| ·乙型脑炎病毒E基因在水稻中的表达和免疫原性的研究 | 第67-75页 |
| ·JEV E基因水稻表达载体pRTCAM-E的构建 | 第67-68页 |
| ·转E基因水稻的获得及遗传稳定性研究 | 第68-69页 |
| ·转基因水稻中E基因的Northern blot分析 | 第69页 |
| ·转基因水稻中E基因的Western blot分析 | 第69-70页 |
| ·转基因水稻中E基因的表达量分析 | 第70-71页 |
| ·腹腔注射实验组小鼠的免疫水平检测 | 第71-73页 |
| ·口服实验组小鼠的免疫水平检测 | 第73-75页 |
| 5 讨论 | 第75-79页 |
| ·外源蛋白在水稻中表达量分析 | 第75-76页 |
| ·转基因水稻表达的P1蛋白免疫原性研究结果分析 | 第76-77页 |
| ·转基因水稻表达的E蛋白免疫原性研究结果分析 | 第77-78页 |
| ·关于改进转基因植物可饲疫苗的设想 | 第78-79页 |
| 6 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-96页 |
| 附录1 | 第96-98页 |
| 附录2 | 第98-108页 |
| 附录3 | 第108-109页 |
| 在读期间发表论文 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
