| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| ·地衣芽孢杆菌 | 第7页 |
| ·果胶酶 | 第7-10页 |
| ·果胶酶的分类 | 第7-8页 |
| ·果胶酶的应用 | 第8-9页 |
| ·果胶酶的研究进展 | 第9-10页 |
| ·普鲁兰酶 | 第10-14页 |
| ·普鲁兰酶的分类 | 第10-11页 |
| ·普鲁兰酶的应用 | 第11页 |
| ·普鲁兰酶的研究进展 | 第11-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-22页 |
| ·材料 | 第14-16页 |
| ·菌株和质粒 | 第14页 |
| ·工具酶和试剂 | 第14页 |
| ·常用溶液及试剂的配制 | 第14-15页 |
| ·培养基和培养条件 | 第15-16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-22页 |
| ·地衣芽孢杆菌B. licheniformis CICIM B1699 染色体DNA 提取 | 第16页 |
| ·引物设计与PCR 扩增 | 第16-17页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第17页 |
| ·枯草芽孢杆菌感受态的制备及转化 | 第17-18页 |
| ·地衣芽孢杆菌感受态的制备及转化 | 第18页 |
| ·枯草芽孢杆菌及地衣芽孢杆菌质粒DNA 的提取 | 第18页 |
| ·酶活力测定方法 | 第18-20页 |
| ·重组酶酶活检测及酶学性质分析 | 第20页 |
| ·重组质粒的稳定性分析 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-39页 |
| ·地衣芽孢杆菌 pelB 基因的克隆与鉴定 | 第22-28页 |
| ·地衣芽孢杆菌pelB 基因的克隆 | 第22-24页 |
| ·重组表达载体pLa-PQ-pelB 及pHY-PQ-pelB 的构建 | 第24-25页 |
| ·重组菌E. coli JM109 (pLa-PQ-pelB)酶活检测及重组酶酶学性质分析 | 第25-27页 |
| ·温度对酶活力和酶的稳定性的影响 | 第25-26页 |
| ·pH 对酶活力和酶的稳定性的影响 | 第26页 |
| ·金属离子对重组酶酶活力的影响 | 第26页 |
| ·重组酶的水解产物分析 | 第26-27页 |
| ·重组菌 B. licheniformis CICIM B1699 (pHY-PQ-pelB)的酶活力测定 | 第27页 |
| ·重组质粒稳定性分析 | 第27-28页 |
| ·地衣芽孢杆菌 amyX 基因的鉴定及其在枯草芽孢杆菌中的表达 | 第28-32页 |
| ·地衣芽孢杆菌amyX 基因的克隆 | 第28页 |
| ·重组表达载体pHY-P43-amyX 的构建 | 第28-29页 |
| ·重组酶酶活力检测 | 第29-30页 |
| ·重组酶AmyX 的酶学性质分析 | 第30-32页 |
| ·重组酶最适温度及温度稳定性的测定 | 第30页 |
| ·重组酶最适pH 及pH 稳定性的测定 | 第30-31页 |
| ·化学试剂及金属离子对重组酶活力的影响 | 第31-32页 |
| ·重组质粒pHY-P43-amyX 稳定性分析 | 第32页 |
| ·地衣芽孢杆菌普鲁兰酶基因 yvdF 在芽孢杆菌中的分泌表达 | 第32-39页 |
| ·地衣芽孢杆菌的yvdF 基因克隆 | 第32页 |
| ·重组表达载体pHY-P43-yvdF 的构建 | 第32-33页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第33-34页 |
| ·重组酶YvdF 酶学性质分析 | 第34-36页 |
| ·重组酶最适温度及温度稳定性的测定 | 第34-35页 |
| ·重组酶YvdF 最适pH 及pH 稳定性的测定 | 第35页 |
| ·化学试剂及金属离子对重组酶活力的影响 | 第35-36页 |
| ·重组酶水解性质分析 | 第36页 |
| ·产普鲁兰酶重组地衣芽孢杆菌的构建 | 第36-37页 |
| ·重组质粒pHY-P43-yvdF 稳定性分析 | 第37-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第46页 |
