| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-21页 |
| ·染色体微分离及微克隆技术概述 | 第12-14页 |
| ·染色体微分离及微克隆技术研究进展 | 第12-13页 |
| ·染色体微分离及微克隆技术在植物上的研究 | 第13-14页 |
| ·染色体微分离和微克隆在柚类中的研究 | 第14页 |
| ·AFLP 分子标记技术在植物中的研究进展 | 第14-19页 |
| ·AFLP 分子标记基本原理和技术流程 | 第15-16页 |
| ·AFLP 分子标记在植物研究中的应用 | 第16-18页 |
| ·植物遗传多样性的分析 | 第16-17页 |
| ·遗传图谱的构建 | 第17页 |
| ·基因定位与数量性状位点（QTLS）分析 | 第17-18页 |
| ·AFLP 分子标记技术在柚类中的应用 | 第18-19页 |
| ·研究目的意义与试验设计 | 第19-21页 |
| ·研究目的意义 | 第19-20页 |
| ·试验设计及技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| ·主要仪器设备和生化试剂 | 第21-23页 |
| ·仪器设备 | 第21-22页 |
| ·生化试剂 | 第22-23页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·试验方法与步骤 | 第23-37页 |
| ·琯溪蜜柚基因组DNA 的提取 | 第23-25页 |
| ·DNA 的提取步骤 | 第23-24页 |
| ·基因组DNA 质量检测 | 第24页 |
| ·基因组DNA 的酶切及纯化 | 第24-25页 |
| ·染色体标本的制备 | 第25页 |
| ·单染色体的微分离 | 第25-26页 |
| ·玻璃针的制备 | 第25页 |
| ·显微分离 | 第25-26页 |
| ·单染色体的体外扩增 | 第26-28页 |
| ·蛋白酶K 消化 | 第26页 |
| ·LA-PCR | 第26-28页 |
| ·单染色体AFLP 分析 | 第28-31页 |
| ·选择性扩增 | 第28-30页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第30-31页 |
| ·单染色体聚类分析 | 第31-32页 |
| ·单染色体AFLP 差异片段的回收、纯化 | 第32-33页 |
| ·差异片段的回收 | 第32页 |
| ·差异片段的二次扩增 | 第32页 |
| ·二次扩增产物的纯化 | 第32-33页 |
| ·Southern 杂交筛选验证特异分子标记 | 第33-35页 |
| ·探针制备 | 第33页 |
| ·估计探针效率 | 第33-34页 |
| ·Southern 杂交 | 第34-35页 |
| ·显色反应 | 第35页 |
| ·单染色体特异分子标记的克隆及测序 | 第35-37页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·连接载体 | 第36页 |
| ·连接产物的转化 | 第36页 |
| ·菌落PCR 检测 | 第36页 |
| ·序列测定与分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-60页 |
| ·柚基因组DNA 的提取及酶切 | 第37页 |
| ·柚染色体制片、单染色体微分离与体外扩增 | 第37-40页 |
| ·柚染色体制片 | 第37-38页 |
| ·柚单染色体微分离 | 第38页 |
| ·单染色体体外扩增 | 第38-40页 |
| ·柚单染色体文库SOUTHERN 杂交验证 | 第40页 |
| ·柚单染色体AFLP 图谱的构建及初分类 | 第40-48页 |
| ·选择性扩增模板稀释倍数的确定 | 第40-41页 |
| ·引物的筛选 | 第41-42页 |
| ·选择性扩增 | 第42-44页 |
| ·AFLP 图谱分析 | 第44-47页 |
| ·聚类分析对琯溪蜜柚单染色体初步分类 | 第47-48页 |
| ·柚单染色体分子标记体系的构建 | 第48-55页 |
| ·单染色体差异片段的筛选 | 第48页 |
| ·差异片段的回收纯化 | 第48-50页 |
| ·SOUTHERN 杂交筛选柚单染色体特异分子标记 | 第50-55页 |
| ·差异片段来源真实性鉴定 | 第50页 |
| ·柚单染色体特异分子标记的筛选 | 第50-55页 |
| ·柚单染色体再分类分析 | 第55页 |
| ·单染色体特异分子标记序列分析 | 第55-60页 |
| 4 讨论 | 第60-66页 |
| ·柚基因组DNA 的提取 | 第60页 |
| ·柚高质量染色体标本的制备 | 第60-61页 |
| ·柚单染色体显微分离的关键问题 | 第61页 |
| ·柚单染色体的体外扩增及污染问题 | 第61-62页 |
| ·单染色体体外扩增 | 第61-62页 |
| ·单染色体体外DNA 体外扩增的污染问题 | 第62页 |
| ·柚单染色体的分类分析 | 第62-63页 |
| ·柚单染色体特异分子标记体系的构建 | 第63-66页 |
| ·特异分子标记的筛选验证 | 第63-64页 |
| ·特异分子标记的功能分析 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 致谢 | 第77页 |