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边鸡遗传多样性及Myostatin基因对生长和繁殖性状的遗传效应研究

中文摘要第1-16页
ABSTRACT第16-20页
第一章 文献综述第20-46页
 1. 遗传多样性的概念、意义及研究方法第20-26页
   ·遗传多样性的概念第20页
   ·遗传多样性研究的作用和意义第20-21页
   ·动物遗传多样性的研究方法第21-26页
     ·形态学方法第21-22页
     ·细胞遗传学方法第22页
     ·生化检测方法第22-23页
     ·DNA 分子标记方法第23-26页
 2. 微卫星标记及在遗传育种中的运用第26-33页
   ·微卫星标记的概况第26-27页
   ·微卫星的功能和形成机理第27-28页
     ·微卫星的功能第27页
     ·微卫星的形成机理第27-28页
   ·微卫星标记在遗传育种中的运用第28-33页
     ·构建遗传图谱第28-29页
     ·QTL 定位和分子标记辅助育种第29-30页
     ·个体及亲缘关系的鉴定第30-31页
     ·遗传多样性的评估第31-32页
     ·DNA 指纹图的制作第32-33页
 3. Myostatin 基因的研究进展第33-38页
   ·Myostatin 基因的发现第33页
   ·Myostatin 基因的定位第33-34页
   ·Myostatin 基因的结构第34页
   ·Myostatin 作用机理第34-35页
   ·Myostatin 基因的生物学功能第35-36页
   ·Myostatin 基因的多态性与生产性能的关系第36-38页
 4. 实时荧光定量PCR 技术第38-44页
   ·实时荧光定量 PCR 技术的基本原理第38-39页
   ·荧光定量 PCR 的定量方法第39页
   ·荧光定量 PCR 反应方法的分类第39-41页
     ·非特异性DNA 结合染料法第39页
     ·探针法第39-41页
   ·实时荧光定量 PCR 的应用第41-44页
     ·病毒检测上的应用第41页
     ·肿瘤检测上的应用第41-42页
     ·转基因生物中的应用第42页
     ·畜牧研究领域的应用第42-44页
 5. 边鸡以及3 个对照鸡种介绍第44-45页
 6. 本研究的目的和意义第45-46页
第二章 边鸡微卫星 DNA 遗传多样性分析第46-65页
 1 材料和方法第46-53页
   ·实验材料第46-49页
     ·样本的采集第46-47页
     ·主要实验仪器第47页
     ·实验试剂第47页
     ·主要试剂的配置第47-49页
   ·试验方法第49-51页
     ·鸡血液DNA 的提取第49-50页
     ·微卫星引物第50-51页
     ·PCR 扩增第51页
   ·统计分析第51-53页
     ·群体内遗传多样性的分析第51-52页
     ·群体间遗传关系第52-53页
     ·统计软件的运用第53页
 2 结果与分析第53-61页
   ·微卫星引物的PCR 产物电泳第53-54页
   ·品种内的遗传变异分析第54-58页
     ·等位基因数(特有等位基因数)第54-55页
     ·多态信息含量、期望杂合度和观察杂合度第55-58页
   ·品种的遗传分化第58页
   ·哈代温伯格平衡第58页
   ·近交系数第58-61页
 3 讨论第61-65页
   ·样本量的确定第61-62页
   ·群体内的遗传多样性第62-63页
   ·群体内的近交系数第63-64页
   ·群体间的遗传分化第64-65页
第三章 边鸡群体的保种效果第65-72页
 1 材料和方法第65-66页
   ·试验材料第65页
   ·主要实验仪器第65-66页
   ·主要实验试剂及配制方法第66页
   ·微卫星引物第66页
   ·统计分析方法第66页
 2 结果与分析第66-69页
   ·2 个世代边鸡的微卫星座位的等位基因数第66-67页
   ·多态信息含量第67页
   ·期望杂合度第67-68页
   ·观察杂合度第68页
   ·近交系数第68-69页
 3 讨论第69-72页
   ·世代间群体遗传多样性的变化第69-70页
   ·世代间近交系数的变化第70页
   ·对边鸡保种的建议第70-72页
第四章 Myostatin 基因的多态性及其与边鸡生长和繁殖性状的关联分析第72-131页
 1 材料与方法第72-79页
   ·试验材料第72-73页
   ·主要仪器第73页
   ·主要试剂及配制第73页
   ·引物设计及 PCR 扩增第73-75页
   ·分析工具第75页
   ·SSCP 分析第75页
   ·PCR 产物的回收第75-76页
   ·PCR 产物的克隆第76-77页
     ·连接反应第76-77页
     ·转化第77页
     ·重组质粒的鉴定第77页
   ·数据的统计分析第77-78页
     ·群体基因频率、基因型频率的计算以及卡方检验第77-78页
     ·遗传多样性参数第78页
   ·统计分析模型和软件第78-79页
 2 结果与分析第79-118页
   ·鸡基因组 DNA 和 PCR 产物结果第79-81页
     ·基因组 DNA 提取结果第79页
     ·SSCP 引物基因组DNA 的PCR 扩增第79-81页
   ·Myostatin 基因 SSCP 检测及序列分析第81-90页
     ·SSCP 检测第81-85页
     ·序列分析结果第85-90页
   ·转录因子结合位点的预测第90-94页
   ·边鸡Myostatin 基因氨基酸序列分析第94-95页
   ·边鸡Myostatin 蛋白的理化性质和功能域预测第95-96页
   ·群体遗传学分析第96-105页
     ·Myostatin 基因5′调控区群体遗传学分析第96-102页
     ·Myostatin 基因外显子区的群体遗传学分析第102-105页
   ·Myostatin 基因与生长和繁殖性状的关联分析第105-115页
     ·Myostatin 基因与生长性状的关联分析第105-111页
       ·Myostatin 5′调控区与生长性状的关联分析第105-108页
       ·Myostatin 外显子区与生长性状的关联分析第108-111页
     ·Myostatin 基因与繁殖性状的关联分析第111-115页
       ·Myostatin 5′调控区与繁殖性状的关联分析第111-113页
       ·Myostatin 外显子区与繁殖性状的关联分析第113-115页
   ·Myostatin 基因不同位点间的互作效应第115-118页
     ·Myostatin 基因不同位点对边鸡生长性状的互作效应第115-116页
     ·Myostatin 基因不同位点对边鸡繁殖性状的互作效应第116-118页
 3 讨论第118-131页
   ·4 个鸡品种 Myostatin 基因的群体遗传学分析第118-119页
   ·Myostatin 基因转录因子结合位点的功能第119-121页
   ·Myostatin 基因的多态性第121-122页
   ·Myostatin 基因与生长性状的关联分析第122-126页
     ·5′调控区与生长性状的关联分析第122-124页
     ·外显子区与生长性状的关联分析第124-126页
   ·Myostatin 基因与繁殖性状的相关性分析第126-129页
     ·5′调控区与繁殖性状的相关性第126页
     ·外显子区与繁殖性状的相关性第126-129页
   ·Myostatin 基因不同位点对生长和繁殖性状的互作效应第129-131页
第五章 Myostatin 基因表达的研究第131-151页
 1 材料与方法第131-138页
   ·试验鸡群和样本采集第131-133页
   ·主要试剂第133页
   ·主要仪器设备第133页
   ·分析工具软件第133页
   ·实验方法第133-136页
     ·主要试剂配制第133页
     ·鸡组织总RNA 的提取和检测(Trizol 法)第133-134页
     ·引物设计和PCR 扩增第134-135页
     ·反转录第135页
     ·目的基因和内参基因的 PCR 扩增第135-136页
     ·扩增片段的回收和克隆测序第136页
     ·实时荧光定量PCR第136页
     ·目的基因和内参基因标准曲线的绘制第136页
   ·统计软件和方法第136-138页
 2 结果与分析第138-146页
   ·RNA 的提取结果第138页
   ·常规 PCR 及测序结果第138-139页
   ·目的基因和内参基因的溶解曲线第139-141页
   ·Myostatin 基因的扩增曲线第141-142页
   ·目的基因和内参基因的标准曲线第142-143页
   ·3 种基因型的表达水平相对定量分析第143-145页
   ·3 种组织中 Myostatin 基因的表达水平分析第145-146页
 3 讨论第146-151页
   ·内参基因的选择第146-147页
   ·荧光定量 PCR 引物的设计第147-148页
   ·Myostatin 基因的组织表达第148-149页
   ·Myostatin 基因的表达与生产性状的关系第149-151页
全文结论第151-153页
创新之处第153-154页
参考文献第154-167页
致谢第167-168页
攻读学位期间发表学术论文第168页

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