| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-31页 |
| 1 Bt毒素 | 第11-13页 |
| ·苏云金芽孢杆菌 | 第11页 |
| ·Bt毒素命名和分类 | 第11-12页 |
| ·Bt毒素的应用 | 第12-13页 |
| 2 昆虫对Bt毒素的抗性研究概况 | 第13-26页 |
| ·Bt毒素的作用机理 | 第13-15页 |
| ·Bt毒素在昆虫中肠内的结合受体 | 第15-20页 |
| ·受体氨肽酶N | 第15-17页 |
| ·类钙粘蛋白受体 | 第17-19页 |
| ·其他类受体 | 第19-20页 |
| ·昆虫对Bt毒素的抗性现状 | 第20-21页 |
| ·Bt毒素抗性机理研究进展 | 第21-25页 |
| ·昆虫中肠蛋白酶的改变 | 第21-22页 |
| ·APN类受体的改变 | 第22-23页 |
| ·Cadherin类受体的改变 | 第23-24页 |
| ·其他类受体的改变 | 第24-25页 |
| ·Bt抗性治理策略 | 第25-26页 |
| 3 RNA干扰技术以及研究进展 | 第26-31页 |
| ·RNA干扰的发现 | 第26-27页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第27页 |
| ·Dicer降解dsRNA成为siRNA | 第27页 |
| ·RISC参与的特异性mRNA的降解 | 第27页 |
| ·通过RdRP进行RNAi过程中的循环放大机制 | 第27页 |
| ·RNAi的系统性及其机理 | 第27-28页 |
| ·RNAi在昆虫中的应用 | 第28-31页 |
| ·昆虫RNAi的方法 | 第29-30页 |
| ·RNAi技术在昆虫中的应用现状 | 第30-31页 |
| 第二章 RNAi介导的棉铃虫氨肽酶N(Haapn1)和钙粘蛋白(Ha_BtR)基因沉默对Cry1Ac毒力影响 | 第31-65页 |
| 1 材料与方法 | 第33-38页 |
| ·供试昆虫 | 第33页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器设备 | 第33页 |
| ·供试棉铃虫的饲养 | 第33-34页 |
| ·昆虫中肠总RNA提取以及cDNA第一链的合成 | 第34页 |
| ·Haapn1和Ha_BtR基因片段的克隆 | 第34-36页 |
| ·双链RNA的合成 | 第36页 |
| ·试虫dsRNA的注射 | 第36页 |
| ·Haapn1和Ha_BtR dsRNA的注射 | 第36页 |
| ·RNAi基因沉默效率检测 | 第36-38页 |
| ·生物测定 | 第38页 |
| ·敏感幼虫SCD四龄幼虫生测 | 第38页 |
| ·注射dsRNA后四龄幼虫的生测 | 第38页 |
| ·数据分析与统计 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-62页 |
| ·棉铃虫Haapn1和Ha_BtR基因片段的扩增、克隆与序列分析 | 第38-41页 |
| ·PCR产物熔解曲线及荧光定量PCR扩增效率一致性分析 | 第41-44页 |
| ·Haapn1和Ha_BtR dsRNA注射剂量的确定 | 第44-46页 |
| ·Cry1Ac活化毒素和原毒素对棉铃虫的毒力测定 | 第46页 |
| ·在敏感品系SCD中Haapn1和Ha_BtR基因沉默对Cry1Ac毒力影响 | 第46-54页 |
| ·Haapn1基因沉默对Cry1Ac毒力影响 | 第46-48页 |
| ·Ha_BtR基因沉默对Cry1Ac毒力影响 | 第48-51页 |
| ·Haapn1和Ha_BtR同时沉默对Cry1Ac毒力的影响 | 第51-54页 |
| ·SCD与SCD-r1杂交后代(F_1)Ha_BtR mRNA相对表达量 | 第54页 |
| ·在F_1中Haapn1和Ha_BtR基因沉默对Cry1Ac毒力影响 | 第54-62页 |
| ·在F_1中Haapn1基因沉默对Cry1Ac毒力影响 | 第54-56页 |
| ·在F_1中Ha_BtR基因沉默对Cry1Ac毒力影响 | 第56-59页 |
| ·在F_1中Haapn1和Ha_BtR同时沉默对Cry1Ac毒力的影响 | 第59-62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| 全文总结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 附表1 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
