摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
上篇 文献综述 | 第11-36页 |
第一章 稻瘟无毒基因的研究进展及LXAR-type效应蛋白的发现 | 第12-24页 |
1. 已克隆的稻瘟病菌无毒基因 | 第12-15页 |
·PWL基因家族 | 第13页 |
·AVR-Pita | 第13-14页 |
·AVR1-CO39 | 第14页 |
·ACE1 | 第14-15页 |
·AvrPiz-t | 第15页 |
·AVR-Pia,AVR-Pii,AVR-Pik | 第15页 |
2. 稻瘟无毒基因的群体多样性和遗传不稳定性 | 第15-17页 |
3. 稻瘟病菌效应蛋白中LXAR-type基序的发现及其分布特征 | 第17-19页 |
参考文献 | 第19-24页 |
第二章 激发子诱发的植物防卫反应 | 第24-36页 |
1. 激发子与植物抗病基因分类 | 第25-27页 |
·激发子的种类和性质 | 第25-26页 |
·真菌激发子 | 第25页 |
·细菌激发子 | 第25-26页 |
·非生物激发子和物理刺激因子 | 第26页 |
·植物抗病基因 | 第26-27页 |
2. 激发子诱导植物防卫反应的特征 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-36页 |
下篇 研究内容 | 第36-80页 |
第一章 稻瘟病菌LXAR类效应蛋白的功能筛选 | 第38-66页 |
1. 材料与方法 | 第40-47页 |
·材料 | 第40-41页 |
·供试烟草及供试稻瘟菌株 | 第40页 |
·重组的马铃薯X病毒载体pgR107 | 第40-41页 |
·大肠杆菌菌株JM109和农杆菌菌株GV3101 | 第41页 |
·方法 | 第41-47页 |
·稻瘟病菌DNA、RNA提取和cDNA合成 | 第41页 |
·候选LXAR效应分子的生物信息学分析方法 | 第41-42页 |
·效应分子的基因克隆及载体构建 | 第42-43页 |
·农杆菌GV3101感受态细胞的制备及转化方法 | 第43页 |
·效应分子的筛选方法 | 第43-45页 |
·能抑制BAX引起HCD的效应分子的多态性分析 | 第45-46页 |
·GUS组织化学染色 | 第46-47页 |
2. 结果 | 第47-59页 |
·LXAR效应分子的生物信息学分析 | 第47-49页 |
·LXAR效应分子的载体构建 | 第49页 |
·候选LXAR效应分子中筛选到14个能强烈抑制BAX诱导的HCD | 第49-52页 |
·候选效应分子中能抑制BAX引起的HCD的效应分子也能抑制激酶及激发子引起的HCD | 第52-53页 |
·候选效应分子中筛选到2个能诱导烟草细胞HCD的效应分子 | 第53-54页 |
·对筛选到的14个能强烈抑制BAX诱导HCD效应分子的功能研究 | 第54-59页 |
·效应分子去信号肽和不去信号肽注射烟草后对BAX引起HCD的抑制效果比较 | 第54-55页 |
·效应分子去信号肽和不去信号肽GUS报告基因在烟草细胞中的表达量比较 | 第55-56页 |
·效应分子在稻瘟病菌不同菌株间的多态分析 | 第56-57页 |
·效应分子的LXAR基序突变成AAAA后对BAX的抑制情况 | 第57-59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
第二章 效应分子part1_5248与part2_4474的功能研究 | 第66-80页 |
1. 材料与方法 | 第67-70页 |
·供试烟草、拟南芥及供试稻瘟菌株 | 第67-68页 |
·重组的马铃薯X病毒载体pgR107及酵母载体pGILDA | 第68页 |
·大肠杆菌菌株JM109、农杆菌菌株GV3101及酵母菌株W303 | 第68页 |
·稻瘟病菌基因组DNA的合成 | 第68页 |
·part1_5248与part2_4474基因的克隆及PVX载体构建 | 第68-69页 |
·part1_5248与part2_4474在拟南芥上诱导细胞死亡的分析方法 | 第69页 |
·part1_5248与part2_4474酵母载体的构建及酵母细胞生长情况分析 | 第69-70页 |
·part1_5248与part2_4474原核表达载体的构建及表达方法 | 第70页 |
2. 结果 | 第70-75页 |
·能抑制BAX的Effectors也能抑制由激发子part1_5248与part2_4474在本氏烟上诱导的HCD | 第70-72页 |
·part1_5248与part2_4474能诱导拟南芥产生HCD | 第72页 |
·part1_5248与part2_4474能降低酵母细胞存活率 | 第72-74页 |
·part1_5248与part2_4474的原核表达 | 第74-75页 |
3 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-80页 |
附录1 克隆去信号肽候选基因所用引物及引入的酶切位点 | 第80-83页 |
附录2 克隆全长候选基因所用引物及引入的酶切位点 | 第83-86页 |
附录3 能抑制BAX诱导的HCD候选基因启动子区多态分析所用引物 | 第86-88页 |
攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第88-90页 |
致谢 | 第90页 |