| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 引言 | 第14-29页 |
| 1 银杏叶黄酮类化合物的生物合成研究进展 | 第14-22页 |
| ·黄酮类化合物种类和作用 | 第14-16页 |
| ·银杏叶类黄酮种类 | 第16页 |
| ·黄酮类化合物的生物合成 | 第16-18页 |
| ·银杏叶类黄酮调控研究进展 | 第18-22页 |
| 2 植物基因启动子结构与功能研究 | 第22-28页 |
| ·植物基因启动子结构与特征 | 第22-23页 |
| ·启动子分离的技术方法 | 第23-25页 |
| ·启动子功能分析方法 | 第25-28页 |
| 3 本论文的研究目的及研究内容 | 第28-29页 |
| 第一章 银杏查尔酮异构酶CHI基因克隆及表达分析 | 第29-59页 |
| 1、实验材料与试剂 | 第30-31页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·酶与分子生物学试剂 | 第30-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-44页 |
| ·银杏总RNA的提取 | 第31页 |
| ·RNA质量检测 | 第31页 |
| ·CHI基因的cDNA全长扩增 | 第31-37页 |
| ·银杏总DNA提取 | 第37页 |
| ·GbCHI基因基因组序列的克隆 | 第37-38页 |
| ·GbCHI基因的生物信息学分析 | 第38页 |
| ·GbCHI基因的Southern blot分析 | 第38-39页 |
| ·GbCHI基因启动子扩增 | 第39-40页 |
| ·GbCHI基因启动子信息学分析 | 第40页 |
| ·GbCHI基因表达分析 | 第40页 |
| ·CHI活性测定 | 第40-41页 |
| ·黄酮含量测定 | 第41页 |
| ·GbCHI基因的原核细胞表达分析 | 第41-42页 |
| ·GbCHI重组蛋白体外酶活性分析 | 第42-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-57页 |
| ·GbCHI基因及上游启动子序列的克隆及特征分析 | 第44-47页 |
| ·GbCHI的Southern印迹分析 | 第47页 |
| ·GbCHI不同组织表达分析 | 第47-48页 |
| ·GbCHI蛋白质三维结构预测 | 第48页 |
| ·CHI基因原核表达及Western blot分析 | 第48-50页 |
| ·GbCHI重组蛋白体外酶活性分析 | 第50-53页 |
| ·CHI对银杏黄酮代谢的调控 | 第53-55页 |
| ·UV-B及外施激素对银杏CHI转录的调节 | 第55-57页 |
| 4 小结与讨论 | 第57-59页 |
| 第二章 银杏F3'H基因克隆及表达分析 | 第59-74页 |
| 1 材料和方法 | 第60-63页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-72页 |
| ·GbF3'H cDNA的克隆及其序列特征分析 | 第63-67页 |
| ·GbF3 H Southern印迹分析 | 第67页 |
| ·GbF3'H蛋白质三维结构预测 | 第67-68页 |
| ·F3'H基因原核表达及Western blot分析 | 第68-70页 |
| ·GbF3'H不同组织表达分析 | 第70页 |
| ·GbF3'H诱导表达分析 | 第70-72页 |
| 3 小结与讨论 | 第72-74页 |
| 第三章 银杏EPSP合酶基因克隆及表达分析 | 第74-84页 |
| 1 材料与方法 | 第75-78页 |
| ·实验材料 | 第75页 |
| ·酶与分子试剂等 | 第75页 |
| ·总RNA提取、反转录 | 第75页 |
| ·基因cDNA序列扩增 | 第75页 |
| ·DNA提取及Southern杂交 | 第75-76页 |
| ·诱导处理 | 第76页 |
| ·表达检测 | 第76-77页 |
| ·生物信息学分析 | 第77-78页 |
| 2 结果与分析 | 第78-83页 |
| ·GbEPSPs cDNA的克隆及其序列特征分析 | 第78-80页 |
| ·GbEPSPs进化树分析 | 第80页 |
| ·GbEPSPs Southern印迹分析 | 第80-81页 |
| ·GbEPSPs不同组织表达分析 | 第81页 |
| ·GbEPSPs诱导表达分析 | 第81-83页 |
| 3 小结与讨论 | 第83-84页 |
| 第四章 银杏CCR基因克隆及表达分析 | 第84-101页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第86-87页 |
| ·实验材料 | 第86页 |
| ·酶与分子生物学试剂 | 第86-87页 |
| 2 实验方法 | 第87-92页 |
| ·银杏总RNA提取 | 第87页 |
| ·RNA质量检测 | 第87页 |
| ·CCR基因的cDNA全长扩增 | 第87-88页 |
| ·银杏总DNA提取 | 第88页 |
| ·GbCCR基因的Southern blot分析 | 第88页 |
| ·GbCCR基因上游启动子调控序列扩增 | 第88页 |
| ·GbCCR基因启动子信息学分析 | 第88页 |
| ·GbCCCR基因在银杏不同组织中的表达分析 | 第88-89页 |
| ·GbCCR基因的原核细胞表达分析 | 第89页 |
| ·GbCCR基因诱导表达 | 第89-92页 |
| 3 结果与分析 | 第92-99页 |
| ·GbCCR cDNA的克隆及其序列特征分析 | 第92-94页 |
| ·GbCCR蛋白质三维结构预测 | 第94页 |
| ·GbCCR Southern印迹分析 | 第94-95页 |
| ·GbCCR不同组织表达分析 | 第95-96页 |
| ·GbCCR基因原核表达及Western blot分析 | 第96-98页 |
| ·GbCCR诱导表达分析 | 第98-99页 |
| 4 小结与讨论 | 第99-101页 |
| 第五章 银杏查尔酮合成酶基因启动子(GbCHSP)的调控元件及功能分析 | 第101-119页 |
| 1 实验材料与试剂 | 第102-103页 |
| ·实验材料 | 第102页 |
| ·试剂 | 第102-103页 |
| 2 实验方法 | 第103-111页 |
| ·总DNA和RNA的提取 | 第103页 |
| ·GbCHS启动子(CHSP)克隆 | 第103-104页 |
| ·GbCHS启动子(CHSP)作用元件分析 | 第104页 |
| ·银杏CHSP基因的植物表达载体的构建 | 第104-107页 |
| ·植物表达载体向农杆菌的转化 | 第107-108页 |
| ·转化烟草 | 第108-109页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第109-111页 |
| 3 结果与分析 | 第111-117页 |
| ·GbCHS上游DNA序列获得及验证 | 第111页 |
| ·启动子顺式作用元件预测和序列分析 | 第111-113页 |
| ·功能验证表达载体构建 | 第113-114页 |
| ·转化阳性烟草GUS组织化学检测 | 第114-117页 |
| 4 小结与讨论 | 第117-119页 |
| 结论及创新点 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-133页 |
| 在读期间已发表论文 | 第133-134页 |
| 作者简历 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135-136页 |
