致谢 | 第1-4页 |
摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-27页 |
·植物分枝发育的研究进展 | 第12-19页 |
·腋生分生组织的起始 | 第12-13页 |
·腋生分生组织的发育 | 第13-14页 |
·植物激素对腋芽活动的调控作用 | 第14-16页 |
·控制分枝的相关基因 | 第16-19页 |
·常用的差异表达基因克隆技术 | 第19-22页 |
·mRNA 差异显示技术 | 第19页 |
·代表性序列差别分析 | 第19-20页 |
·抑制消减杂交法 | 第20页 |
·基因表达系列分析 | 第20页 |
·cDNA 微阵列 | 第20页 |
·cDNA-AFLP 技术 | 第20-22页 |
参考文献 | 第22-27页 |
第二章 杉木020 扦插苗生长物候期与形成层活动的周期性研究 | 第27-34页 |
·材料与方法 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-32页 |
·杉木无性系“020”生长的物候节律 | 第27-28页 |
·杉木分枝的物候期 | 第28-29页 |
·杉木的高生长 | 第29页 |
·形成层活动的物候期 | 第29-32页 |
·结论 | 第32-33页 |
·杉木“020”顶芽休眠较晚 | 第32页 |
·杉木“020”新梢的高生长规律 | 第32页 |
·甲苯胺蓝染色适用于形成层活动研究 | 第32页 |
·杉木“020”形成层的活动规律 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-34页 |
第三章 杉木cDNA-AFLP 反应体系的优化 | 第34-45页 |
·材料与方法 | 第34-37页 |
·材料与试剂 | 第34页 |
·总RNA 的提取 | 第34-35页 |
·cDNA 双链的合成与纯化 | 第35页 |
·酶切与连接 | 第35-36页 |
·PCR 体系的优化 | 第36页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-43页 |
·RNA 的提取及ds cDNA 的合成 | 第37-38页 |
·ds cDNA 的酶切体系与连接酶用量 | 第38-39页 |
·优化的PCR 体系 | 第39-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·RNA 提取与cDNA 的合成 | 第43页 |
·内切酶的选择与酶切体系 | 第43页 |
·扩增体系 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-45页 |
第四章 cDNA-AFLP 技术克隆杉木分枝发育调控的关键基因 | 第45-64页 |
·材料与方法 | 第45-48页 |
·植物材料 | 第45页 |
·方法 | 第45-48页 |
·结果与分析 | 第48-52页 |
·用cDNA-AFLP 差异显示技术显示出杉木分枝相关的差异片段 | 第48-49页 |
·差异TDF 的回收、再扩增和再回收 | 第49页 |
·差异TDF 的测序和分析 | 第49-52页 |
·讨论 | 第52-60页 |
·杉木分枝调控的关键基因 | 第52-57页 |
·杉木分枝的调控网络 | 第57-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
第五章 杉木两个分枝负相关基因的克隆与功能鉴定 | 第64-95页 |
·材料与方法 | 第64-71页 |
·植物材料 | 第64页 |
·RNA 的提取 | 第64页 |
·基因全长序列的获得 | 第64-66页 |
·基因的表达模式分析 | 第66-67页 |
·正义表达载体的构建 | 第67-70页 |
·花序浸染法转化拟南芥 | 第70-71页 |
·拟南芥转化植株种子的筛选 | 第71页 |
·转基因阳性植株的表型观察 | 第71页 |
·结果与分析 | 第71-91页 |
·杉木PAE 基因的全长的克隆与功能分析 | 第71-82页 |
·杉木 Rab 蛋白 11C(Rab GTPASE)基因的全长的克隆与功能分析 | 第82-91页 |
·讨论 | 第91-94页 |
·杉木PAE 基因的序列分析与表达分析 | 第91页 |
·杉木 PAE 通过蛋白降解功能作用于激素信号传导调控杉木的分枝 | 第91-92页 |
·杉木 PAE 基因的表达量对调控杉木的分枝有重要作用 | 第92页 |
·杉木 RAB11C 基因的序列分析与表达分析 | 第92页 |
·杉木 RAB11C 表达量的增强调控杉木的分枝 | 第92页 |
·杉木 RAB11C 通过囊泡运输调控杉木的分枝 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-95页 |
第六章 杉木两个分枝正相关基因的克隆与功能鉴定 | 第95-126页 |
·材料与方法 | 第95-101页 |
·植物材料 | 第95页 |
·RNA 的提取 | 第95页 |
·基因全长序列的获得 | 第95-96页 |
·基因的表达模式分析 | 第96-97页 |
·正义表达载体的构建 | 第97-100页 |
·花序浸染法转化拟南芥 | 第100-101页 |
·拟南芥转化植株种子的筛选 | 第101页 |
·转基因阳性植株的检测 | 第101页 |
·结果与分析 | 第101-121页 |
·杉木RNaseⅢ基因的全长的克隆与功能分析 | 第101-112页 |
·杉木DELLA 基因的全长的克隆与表达分析 | 第112-121页 |
·讨论 | 第121-124页 |
·杉木RNaseⅢ基因的序列分析和表达分析 | 第121页 |
·杉木RNaseⅢ基因在转录水平或翻译水平调控杉木的分枝 | 第121页 |
·杉木DELLA 基因的序列分析和表达分析 | 第121-122页 |
·杉木DELLA 蛋白通过负调控GA 信号传导促进杉木分枝 | 第122-124页 |
参考文献 | 第124-126页 |
第七章 总结 | 第126-131页 |
·主要结论 | 第126-130页 |
·杉木“020”的物候期特点 | 第126页 |
·适用于杉木分子遗传学研究的cDNA-AFLP 体系 | 第126-127页 |
·杉木分枝发育的基因调控网络 | 第127-128页 |
·四个分枝相关基因全长的克隆与功能鉴定 | 第128-130页 |
·存在的问题 | 第130页 |
·下一步的研究方向 | 第130-131页 |
详细摘要 | 第131-136页 |