| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-28页 |
| 1.1 文献综述 | 第11-28页 |
| 1.1.1 黄酮类化合物及其糖基化 | 第11-14页 |
| 1.1.2 糖基转移酶 | 第14-16页 |
| 1.1.3 糖基转移酶的结构生物学研究进展 | 第16-20页 |
| 1.1.4 水稻与二穗短柄草 | 第20-21页 |
| 1.1.5 结构生物学研究进展 | 第21-28页 |
| 1.2 研究目的及意义 | 第28页 |
| 1.3 研究创新点 | 第28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.2 主要药品试剂 | 第29页 |
| 2.3 表达载体的构建 | 第29-34页 |
| 2.3.1 引物设计与合成 | 第29-30页 |
| 2.3.2 琼脂糖凝胶电泳与PCR产物回收 | 第30-31页 |
| 2.3.3 重组质粒的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.4 DH5α感受态细胞制备 | 第32-33页 |
| 2.3.5 重组质粒转化 | 第33页 |
| 2.3.6 重组质粒抽提与鉴定 | 第33页 |
| 2.3.7 转化表达菌株 | 第33-34页 |
| 2.4 融合蛋白的表达 | 第34页 |
| 2.5 目的蛋白的纯化 | 第34-37页 |
| 2.5.1 OsCGT1、OsCGT2、OsCGT3的纯化路径 | 第34-36页 |
| 2.5.2 BdCGT1、BdCGT2的纯化路径 | 第36-37页 |
| 2.6 晶体的初筛 | 第37-38页 |
| 2.7 晶体的优化 | 第38页 |
| 2.8 种晶体 | 第38页 |
| 2.9 晶体的衍射和结构解析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-58页 |
| 3.1 生物信息学分析 | 第39页 |
| 3.2 目的片段PCR扩增 | 第39-40页 |
| 3.3 重组质粒双酶切检验 | 第40页 |
| 3.4 重组蛋白的小量表达测试 | 第40-41页 |
| 3.5 重组蛋白的大量表达与纯化 | 第41-48页 |
| 3.5.1 OsCGT1、OsCGT2、OsCGT3融合蛋白的大量表达与纯化 | 第41-46页 |
| 3.5.2 BdCGT1、BdCGT2融合蛋白的大量表达与纯化 | 第46-48页 |
| 3.6 OsCGT1、OsCGT2、OsCGT3晶体初筛 | 第48-49页 |
| 3.7 BdCGT1与BdCGT2的晶体初筛与优化 | 第49页 |
| 3.8 BdCGT2晶体的衍射 | 第49-53页 |
| 3.9 BdCGT2晶体结构的解析与修正 | 第53页 |
| 3.10 最终模型的质量评估 | 第53-55页 |
| 3.11 BdCGT2晶体整体结构 | 第55-57页 |
| 3.12 比较BdCGT2与其他GT的结构 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-64页 |
| 4.1 结晶过程中的问题 | 第58-60页 |
| 4.2 BdCGT2的聚合情况 | 第60-61页 |
| 4.3 BdCGT2催化机理的猜想 | 第61页 |
| 4.4 GT功能的多样性 | 第61-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
