| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-13页 |
| 1.1 阿尔茨海默病发病机制进展 | 第10页 |
| 1.2 阿尔茨海默病与细胞凋亡 | 第10-11页 |
| 1.3 μ-calpain与凋亡途径 | 第11-13页 |
| 第2章 材料与仪器 | 第13-15页 |
| 2.1 材料 | 第13-14页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第13页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
| 2.2 主要仪器 | 第14-15页 |
| 第3章 实验方法 | 第15-22页 |
| 3.1 主要溶液配制 | 第15页 |
| 3.2 CAPN1 shRNA重组慢病毒载体构建(neuro-2a-CAPN1 shRNA)筛选 | 第15-16页 |
| 3.3 原代皮层神经元细胞培养 | 第16页 |
| 3.4 实验分组 | 第16-17页 |
| 3.5 CCK-8法观察各组细胞活力的变化 | 第17页 |
| 3.6 Annexin V/PI流式检测 | 第17-18页 |
| 3.7 实时荧光定量PCR检测μ-calpain的表达变化 | 第18-19页 |
| 3.7.1 细胞总RNA提取 | 第18页 |
| 3.7.2 mRNA逆转录反应体系 | 第18页 |
| 3.7.3 mRNA实时荧光定量反应体系 | 第18-19页 |
| 3.7.4 定量PCR反应程序 | 第19页 |
| 3.8 westernblot(WB)方法检测细胞内相关蛋白的表达 | 第19-21页 |
| 3.8.1 提取细胞总蛋白 | 第19页 |
| 3.8.2 BCA法测蛋白浓度 | 第19-20页 |
| 3.8.3 凝胶配制 | 第20页 |
| 3.8.4 电泳、转膜、封闭、孵育抗体及显影 | 第20-21页 |
| 3.9 统计学处理 | 第21-22页 |
| 第4章 结果 | 第22-27页 |
| 4.1 慢病毒介导μ-calpain基因有效干扰片段筛选 | 第22-23页 |
| 4.2 RNAi沉默CAPN1基因对神经元细胞活力的影响 | 第23页 |
| 4.3 RNAi沉默CAPN1基因对神经元细胞凋亡的影响 | 第23-24页 |
| 4.4 RNAi沉默CAPN1基因对神经元细胞CAPN1mRNA表达水平的影响 | 第24-25页 |
| 4.5 RNAi沉默CAPN1基因对神经元细胞相关蛋白表达水平的影响 | 第25-27页 |
| 第5章 讨论 | 第27-31页 |
| 5.1 Aβ25-35诱导的细胞损伤及凋亡的影响 | 第27-28页 |
| 5.2 RNAi沉默CAPN1基因对Aβ25-35诱导的神经毒性作用及CDK5/GSK-3β通路的影响 | 第28-30页 |
| 5.3 p25在RNAi沉默CAPN1基因中对Aβ25-35引起的CDK5/GSK-3β通路的影响 | 第30-31页 |
| 第6章 结论与展望 | 第31-32页 |
| 6.1 全文总结 | 第31页 |
| 6.2 不足之处与展望 | 第31-32页 |
| 致谢 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-37页 |
| 附录：本研究资助项目 | 第37-38页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第38-39页 |
| 综述 | 第39-46页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
