| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 前言 | 第10-25页 |
| 1.1 生物体内的分子马达 | 第10-14页 |
| 1.1.1 分子马达简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 分子马达分类 | 第11-13页 |
| 1.1.3 分子马达研究意义 | 第13-14页 |
| 1.2 物质运输中的细胞骨架马达 | 第14-18页 |
| 1.2.1 微丝分子马达 | 第15-16页 |
| 1.2.2 微管分子马达 | 第16-18页 |
| 1.3 驱动蛋白的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.3.1 超级家族 | 第18-19页 |
| 1.3.2 结构功能 | 第19-21页 |
| 1.3.3 相关疾病 | 第21-22页 |
| 1.4 结构生物学 | 第22-24页 |
| 1.4.1 蛋白质的X-射线晶体学 | 第22-24页 |
| 1.5 本论文研究的内容与意义 | 第24-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-34页 |
| 2.1.1 基因引物 | 第25页 |
| 2.1.2 载体质粒 | 第25-27页 |
| 2.1.3 常用菌株 | 第27页 |
| 2.1.4 酶和试剂 | 第27-29页 |
| 2.1.5 试剂配方 | 第29-32页 |
| 2.1.6 实验仪器 | 第32-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-51页 |
| 2.2.1 基因的分子克隆 | 第34-36页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第36-39页 |
| 2.2.3 感受态细胞制备 | 第39-41页 |
| 2.2.4 重组蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 2.2.5 重组蛋白的纯化 | 第42-47页 |
| 2.2.6 蛋白质相互作用检测 | 第47-48页 |
| 2.2.7 蛋白质晶体生长收集 | 第48-51页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第51-77页 |
| 3.1 驱动蛋白轻重两链的基因克隆 | 第51-55页 |
| 3.1.1 KIF5B与KLC2的生物信息学分析 | 第51-54页 |
| 3.1.2 KIF5B与KLC的引物设计 | 第54-55页 |
| 3.1.3 重组质粒的构建 | 第55页 |
| 3.2 驱动蛋白轻重两链的样品制备 | 第55-61页 |
| 3.2.1 驱动蛋白重链mKIF5B的相关片段制备 | 第55-59页 |
| 3.2.2 驱动蛋白轻链KLC的相关片段制备 | 第59-61页 |
| 3.3 驱动蛋白轻重两链相互作用研究 | 第61-69页 |
| 3.3.1 GST-Pull-Down实验 | 第61-65页 |
| 3.3.2 分子排阻色谱实验 | 第65-67页 |
| 3.3.3 多角度静态光散射实验 | 第67-69页 |
| 3.4 驱动蛋白轻重两链的晶体学研究 | 第69-75页 |
| 3.5 总结与讨论 | 第75-77页 |
| 附录 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 致谢 | 第85页 |