| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 研究背景和意义 | 第10-22页 |
| 1.1 玉米茎腐病抗性机制研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 玉米茎腐病 | 第10-11页 |
| 1.1.2 玉米禾谷镰孢菌茎腐病抗性研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 玉米穗腐病 | 第12-13页 |
| 1.2.1 玉米穗腐病 | 第12页 |
| 1.2.2 黄曲霉引起的穗腐病 | 第12-13页 |
| 1.3 茉莉酸和乙烯信号途径在茎腐病/穗腐病抗性中的研究进展 | 第13-19页 |
| 1.3.1 茉莉酸途径 | 第13-18页 |
| 1.3.2 乙烯途径 | 第18-19页 |
| 1.4 植物转录因子WD40-repeat研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4.1 WD40-repeat基因简介 | 第19页 |
| 1.4.2 植物中WD40-repeat基因的功能研究 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的、意义 | 第20-22页 |
| 第二章 茉莉酸途径参与调控玉米茎腐病抗性的研究 | 第22-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.1.2 菌和载体 | 第22页 |
| 2.1.3 试剂 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-33页 |
| 2.2.1 获取ZmJAZs基因的序列信息 | 第23页 |
| 2.2.2 多序列对比和功能域分析 | 第23页 |
| 2.2.3 进化树和外显子/内含子分析 | 第23-24页 |
| 2.2.4 ZmJAZs基因在染色体上的定位 | 第24页 |
| 2.2.5 ZmJAZs基因组织表达 | 第24页 |
| 2.2.6 玉米总RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.7 RNA反转录成cDNA | 第24-25页 |
| 2.2.8 实时定量PCR | 第25页 |
| 2.2.9 PCR扩增目的基因片段 | 第25-26页 |
| 2.2.10 回收产物与pTOPO-Blunt载体连接 | 第26-27页 |
| 2.2.11 连接产物的转化与测序 | 第27页 |
| 2.2.12 质粒提取 | 第27页 |
| 2.2.13 ZmJAZ基因pGBKT7和ZmCOI1基因pGADT7载体的构建和转化 | 第27-28页 |
| 2.2.14 ZmJAZ基因和ZmCOI1基因的互作验证 | 第28页 |
| 2.2.15 玉米植株生长条件 | 第28页 |
| 2.2.16 F.graminearum接种方法 | 第28-29页 |
| 2.2.17 mRNA的分离和纯化 | 第29页 |
| 2.2.18 合成cDNA双链 | 第29-30页 |
| 2.2.19 cDNA文库的构建和检测 | 第30页 |
| 2.2.20 构建Bait (ZmJAZ+pGBKT7)克隆和克隆转化 | 第30页 |
| 2.2.21 用“Bait”筛选文库 | 第30-32页 |
| 2.2.22 酵母双杂方法验证阳性互作 | 第32页 |
| 2.2.23 BiFC方法进一步验证阳性互作 | 第32-33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-48页 |
| 2.3.1 ZmJAZs基因家族的进化分析和功能域分析 | 第33-34页 |
| 2.3.2 ZmJAZs基因家族的基因结构和在染色体上的位置 | 第34页 |
| 2.3.3 ZmJAZs基因的组织表达分析 | 第34-39页 |
| 2.3.4 ZmJAZs和ZmCOI1s基因的克隆和互作鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.5 总RNA的提取及mRNA的分离纯化 | 第40-41页 |
| 2.3.6 双链cDNA的合成及纯化 | 第41页 |
| 2.3.7 文库的鉴定 | 第41-42页 |
| 2.3.8 Bait克隆的自激活活性、毒性检测 | 第42-43页 |
| 2.3.9 筛库质量 | 第43-44页 |
| 2.3.10 酵母双杂验证结果 | 第44页 |
| 2.3.11 BiFC法验证互作结果 | 第44页 |
| 2.3.12 opr8-2接种F.graminearum表型结果 | 第44-45页 |
| 2.3.13 opr8-2接种F.graminearum后免疫基因和ZmJAZ基因表达结果 | 第45-48页 |
| 第三章 乙烯在玉米黄曲霉粒腐病抗性中的功能研究 | 第48-52页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第48页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第48页 |
| 3.1.2 试剂 | 第48页 |
| 3.1.3 菌株 | 第48页 |
| 3.2 试验方法 | 第48-49页 |
| 3.2.1 玉米籽粒黄曲霉接种和孢子计数方法 | 第48-49页 |
| 3.2.2 实时定量PCR | 第49页 |
| 3.2.3 黄曲霉毒素和麦角醇量的测定方法 | 第49页 |
| 3.2.4 乙烯测定方法 | 第49页 |
| 3.3 结果分析 | 第49-52页 |
| 3.3.1 acs单突变体对黄曲霉更加感病 | 第49-50页 |
| 3.3.2 acs单突变体在接种黄曲霉后乙烯产量增加 | 第50页 |
| 3.3.3 acs单突变体在接种黄曲霉后ACS基因的表达 | 第50-52页 |
| 第四章 讨论 | 第52-56页 |
| 全文结论 | 第56-58页 |
| 创新点及不足之处 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-74页 |
| 附录 | 第74-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第84页 |
