| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 一 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 水稻光周期开花调控网络研究概况 | 第11-17页 |
| 1.1 开花调控网络研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 两种成花素基因:Hd3a和RFT1 | 第12-13页 |
| 1.3 Hd1依赖性的开花调控机制 | 第13-16页 |
| 1.4 Ehd1依懒性的开花调控机制 | 第16-17页 |
| 1.5 其他开花调控机制 | 第17页 |
| 2 蛋白互作方法的研究进展 | 第17-21页 |
| 2.1 酵母双杂交实验 | 第18-19页 |
| 2.2 免疫共沉淀和In vitro pull-down | 第19-20页 |
| 2.3 报告基因依赖性的研究方法 | 第20-21页 |
| 3 CRISPR/Cas9基因组编辑技术的研究进展 | 第21-24页 |
| 4 论文的研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 二 材料与方法 | 第25-33页 |
| 1 实验材料 | 第25页 |
| 1.1 水稻材料 | 第25页 |
| 1.2 水稻原生质体 | 第25页 |
| 1.3 烟草 | 第25页 |
| 2 菌株和载体 | 第25-27页 |
| 2.1 菌株 | 第25-26页 |
| 2.2 重组载体 | 第26-27页 |
| 3 抗体 | 第27页 |
| 4 实验方法 | 第27-33页 |
| 4.1 酵母双杂 | 第27-28页 |
| 4.2 水稻原生质体的制备 | 第28页 |
| 4.3 双分子荧光互补分析(BiFC) | 第28-29页 |
| 4.4 萤火虫荧光素酶互补成像实验 | 第29页 |
| 4.5 原核表达和蛋白纯化 | 第29-30页 |
| 4.6 In vitro pull-down | 第30-31页 |
| 4.7 Western blot分析 | 第31页 |
| 4.8 CRISPR/Cas9载体的构建 | 第31页 |
| 4.9 转基因植株阳性植株的检测 | 第31页 |
| 4.10 主要试剂 | 第31-33页 |
| 三 结果与分析 | 第33-49页 |
| 1 Hd1与DTH8互作分析 | 第33-43页 |
| 1.1 酵母双杂交 | 第33-36页 |
| 1.2 水稻原生质体的制备 | 第36-38页 |
| 1.3 水稻原生质体体系下的双分子荧光互补实验结果结果与分析 | 第38页 |
| 1.4 烟草瞬时表达系统下的LCI结果与分析 | 第38-39页 |
| 1.5 原核表达和蛋白纯化结果与分析 | 第39-41页 |
| 1.6 In vitro pull-down结果与分析 | 第41-43页 |
| 2 CRISPR/Cas9系统敲除Hd1与DTH8基因结果分析 | 第43-48页 |
| 2.1 CRISPR/Cas9载体构建 | 第43-46页 |
| 2.2 T0代转基因植株阳性植株的筛选结果与分析 | 第46-48页 |
| 3 总结 | 第48-49页 |
| 四 小结与讨论 | 第49-53页 |
| 1 蛋白互作研究方法的比较和优劣势 | 第49-50页 |
| 2 融合蛋白标签的选择和蛋白纯化方法的优化 | 第50-51页 |
| 3 CRISPR/Cas9多靶点敲除系统在水稻中的应用 | 第51页 |
| 4 课题展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 附录 | 第63-68页 |
| 附录Ⅰ 本实验用到试剂配制 | 第63-66页 |
| 附录Ⅱ 本研究中载体构建所用到的引物 | 第66-67页 |
| 附录Ⅲ SDS-PAGE凝胶配制 | 第67-68页 |
