| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第16-29页 |
| 1.1 睑板腺形态、结构与功能 | 第16-17页 |
| 1.2 睑脂的性状与作用 | 第17页 |
| 1.3 睑脂的分泌调节 | 第17-19页 |
| 1.4 睑板腺功能障碍 | 第19-22页 |
| 1.4.1 睑板腺功能障碍的定义 | 第19页 |
| 1.4.2 睑板腺功能障碍的病理分型及发病机制 | 第19-20页 |
| 1.4.3 睑板腺功能障碍的诊断与临床分型 | 第20页 |
| 1.4.4 睑板腺功能障碍的检查及评分 | 第20-21页 |
| 1.4.5 睑板腺功能障碍的治疗 | 第21页 |
| 1.4.6 睑板腺功能障碍与干眼病的关系 | 第21-22页 |
| 1.5 睑板腺功能障碍的研究现状 | 第22-26页 |
| 1.6 研究意义 | 第26页 |
| 1.7 技术路线 | 第26-29页 |
| 1.7.1 大鼠睑板腺腺祖细胞的鉴定 | 第26-27页 |
| 1.7.2 大鼠睑板腺腺祖细胞的分离及培养 | 第27页 |
| 1.7.3 大鼠睑板腺祖细胞克隆形成率的分析 | 第27页 |
| 1.7.4 大鼠睑板腺祖细胞干细胞特异性标志物的表达 | 第27页 |
| 1.7.5 大鼠睑板腺祖细胞的分化 | 第27-28页 |
| 1.7.6 大鼠睑板腺组织及祖细胞脂质代谢 | 第28-29页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第29-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-38页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第29页 |
| 2.1.2 主要化学试剂及耗材 | 第29-31页 |
| 2.1.3 主要抗体 | 第31-32页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.5 主要溶液配置 | 第33-38页 |
| 2.1.5.1 细胞培养相关溶液配置 | 第33-35页 |
| 2.1.5.2 HE、免疫荧光、及油红(Oil-Red-O)染色溶液的配置 | 第35-36页 |
| 2.1.5.3 实时定量PCR反应相关试剂 | 第36-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-49页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第38-42页 |
| 2.2.1.1 复苏冻存的3T3-L1细胞 | 第38页 |
| 2.2.1.2 3T3-L1细胞的传代培养 | 第38-39页 |
| 2.2.1.3 3T3-L1细胞的冻存 | 第39页 |
| 2.2.1.4 3T3-L1滋养层细胞的准备 | 第39-40页 |
| 2.2.1.5 大鼠睑板腺祖细胞的分离与原代培养 | 第40-41页 |
| 2.2.1.6 大鼠睑板腺祖细胞的传代培养 | 第41页 |
| 2.2.1.7 大鼠睑板腺祖细胞原代克隆形成率分析 | 第41-42页 |
| 2.2.2 大鼠睑板腺及眼球石蜡切片的制备 | 第42页 |
| 2.2.3 大鼠睑板腺及眼球冰冻切片的制备 | 第42-43页 |
| 2.2.4 大鼠睑板腺祖细胞爬片标本的制备 | 第43-44页 |
| 2.2.5 大鼠睑板腺组织学及组织化学染色 | 第44-46页 |
| 2.2.5.1 石蜡切片脱蜡 | 第44页 |
| 2.2.5.2 苏木素&伊红(H&E染色) | 第44-45页 |
| 2.2.5.3 大鼠睑板腺组织及睑板腺上皮细胞爬片免疫荧光染色 | 第45-46页 |
| 2.2.5.4 Oil-Red-O(油红O示脂法) | 第46页 |
| 2.2.6 qRT-PCR反应 | 第46-49页 |
| 2.2.6.1 大鼠睑板腺组织及睑板腺上皮细胞RNA的提取 | 第46-47页 |
| 2.2.6.2 逆转录PCR | 第47-48页 |
| 2.2.6.3 实时定量PCR(Real-Time PCR) | 第48-49页 |
| 2.3 数据处理及分析 | 第49-50页 |
| 2.3.1 图像处理 | 第49页 |
| 2.3.2 统计分析 | 第49-50页 |
| 第三章 实验结果 | 第50-68页 |
| 3.1 大鼠睑板腺的组织学形态 | 第50-51页 |
| 3.2 大鼠睑板腺祖细胞的鉴定 | 第51-53页 |
| 3.3 大鼠睑板腺上皮祖细胞(progenitor cell)的培养 | 第53-59页 |
| 3.3.1 大鼠睑板腺腺体的分离 | 第53-55页 |
| 3.3.2 大鼠睑板腺祖细胞的原代培养及形态观察 | 第55-57页 |
| 3.3.3 大鼠睑板腺祖细胞的传代培养及形态观察 | 第57-59页 |
| 3.4 大鼠睑板腺祖细胞体外培养克隆形成率(Cloning efficiency)分析 | 第59-60页 |
| 3.5 大鼠睑板腺祖细胞干细胞相关基因及蛋白的表达 | 第60-62页 |
| 3.5.1 大鼠睑板腺祖细胞干细胞相关基因的表达 | 第60-61页 |
| 3.5.2 大鼠睑板腺组织与其祖细胞干细胞相关性蛋白的表达 | 第61-62页 |
| 3.6 大鼠睑板腺祖细胞的分化相关特异性标志物的表达 | 第62-65页 |
| 3.7 大鼠睑板腺组织与其祖细胞的脂质代谢 | 第65-68页 |
| 3.7.1 大鼠睑板腺组织与其祖细胞的脂质相关性基因的表达 | 第65-66页 |
| 3.7.2 大鼠睑板腺腺体及体外培养祖细胞的油红(Oil-Red-O)染色 | 第66-68页 |
| 第四章 讨论 | 第68-74页 |
| 4.1 大鼠睑板腺上皮祖细胞的分离及培养 | 第69-70页 |
| 4.2 大鼠睑板腺祖细胞的特异性标志物 | 第70页 |
| 4.3 Y27632可有效增加大鼠睑板腺上皮祖细胞增殖与克隆形成能力 | 第70页 |
| 4.4 大鼠睑板腺祖细胞的干细胞相关性特异性分子标志物的表达 | 第70-71页 |
| 4.5 大鼠睑板腺祖细胞的分化 | 第71-73页 |
| 4.6 大鼠睑板腺上皮细胞原代培养中脂质相关代谢 | 第73-74页 |
| 第五章 全文总结 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
