| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 综述 | 第10-23页 |
| 1.1 细胞外基质(ECM)简介 | 第10页 |
| 1.2 基质金属蛋白酶(MMPs)简介 | 第10-14页 |
| 1.2.1 基质金属蛋白酶的分类 | 第11-12页 |
| 1.2.2 基质金属蛋白酶的结构 | 第12-13页 |
| 1.2.3 基质金属蛋白酶的功能 | 第13-14页 |
| 1.2.4 基质金属蛋白酶13 | 第14页 |
| 1.3 基质金属蛋白酶抑制剂(matrix metalloproteinase inhibitors,MMPIs) | 第14-16页 |
| 1.3.1 MMPs组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs) | 第14-15页 |
| 1.3.2 人工合成的MMPIs | 第15页 |
| 1.3.3 从天然产物中筛选的MMPIs | 第15-16页 |
| 1.3.4 计算机辅助药物设计MMPIs | 第16页 |
| 1.4 蛋白纯化复性方法 | 第16-19页 |
| 1.4.1 蛋白纯化方法 | 第16-17页 |
| 1.4.2 蛋白复性方法 | 第17-19页 |
| 1.5 酶抑制动力学研究 | 第19-21页 |
| 1.5.1 抑制类型 | 第19-20页 |
| 1.5.2 可逆抑制 | 第20-21页 |
| 1.5.3 不可逆抑制 | 第21页 |
| 1.6 论文设计思路与研究内容 | 第21-23页 |
| 1.6.1 设计思路 | 第21-22页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-32页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 主要试剂和实验耗材 | 第23-24页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.3 菌种 | 第24页 |
| 2.2 溶液配制 | 第24-27页 |
| 2.2.1 蛋白表达溶液 | 第24-25页 |
| 2.2.2 蛋白分离纯化溶液 | 第25页 |
| 2.2.3 蛋白复性溶液 | 第25页 |
| 2.2.4 SDS-PAGE电泳溶液 | 第25-26页 |
| 2.2.5 考马斯亮蓝G-250溶液 | 第26页 |
| 2.2.6 酶反应缓冲液 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-32页 |
| 2.3.1 MMP-13催化结构域的表达 | 第27页 |
| 2.3.2 包涵体的溶解 | 第27页 |
| 2.3.3 MMP-13催化结构域的纯化 | 第27-28页 |
| 2.3.4 MMP-13催化结构域的复性 | 第28页 |
| 2.3.5 蛋白表征 | 第28-30页 |
| 2.3.6 动力学研究 | 第30-32页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第32-62页 |
| 3.1 MMP-13催化结构域蛋白的诱导表达 | 第32页 |
| 3.2 MMP-13催化结构域蛋白分离纯化 | 第32-43页 |
| 3.2.1 包涵体的溶解 | 第32-33页 |
| 3.2.2 MMP-13催化结构域蛋白的纯化 | 第33-43页 |
| 3.3 MMP-13催化结构域蛋白复性 | 第43-58页 |
| 3.3.1 阴离子交换色谱复性MMP-13催化结构域蛋白 | 第43-53页 |
| 3.3.2 尺寸排阻色谱对MMP-13催化结构域蛋白复性 | 第53-55页 |
| 3.3.3 透析法复性MMP-13催化结构域蛋白 | 第55-56页 |
| 3.3.4 MMP-13催化结构域蛋白的飞行质谱(MALDI-TOF-MS)表征 | 第56页 |
| 3.3.5 MMP-13催化结构域蛋白的活性表征 | 第56-57页 |
| 3.3.6 MMP-13催化结构域蛋白的CD表征 | 第57-58页 |
| 3.4 MMP-13催化结构域蛋白酶动力学研究 | 第58-60页 |
| 3.4.1 MMP-13催化结构域蛋白酶促反应动力学 | 第58-60页 |
| 3.4.2 MMP-13催化结构域蛋白酶抑制动力学 | 第60页 |
| 3.5 小结 | 第60-62页 |
| 第四章 展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 攻读硕士期间取得的科研成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
